elisa酶聯(lián)免疫試劑盒樣品的稀釋檢測范圍
1.根據(jù)樣品數(shù)量，按50體積BCA試劑A加1體積BCA試劑B（50:1）配制適量BCA工作液，充分混勻。BCA工作液室溫下24小時內(nèi)穩(wěn)定。
2.*溶解蛋白標(biāo)準(zhǔn)品，取C液10微升稀釋至100微升，使終濃度為0.5mg/mL。原則上，蛋白樣品在什么溶液中，標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)用什么溶液稀釋。但我們強烈建議使用三蒸水稀釋標(biāo)準(zhǔn)品及樣品。
3.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：標(biāo)準(zhǔn)曲線的濃度范圍應(yīng)在20-2000μg/mL之間。建議使用倍比稀釋法；建議取4~6個不同的濃度做標(biāo)準(zhǔn)曲線；建議每個濃度做2~3個復(fù)孔。
4.蛋白樣品的稀釋：將待測蛋白樣品稀釋到標(biāo)準(zhǔn)曲線所能檢測的范圍內(nèi)。在eppendorf管中對待測蛋白進行稀釋，混勻?？捎萌芙獾鞍椎囊后w進行稀釋，但我們建議使用三蒸水稀釋標(biāo)準(zhǔn)品。
5.在96孔板各孔中加入200μLBCA工作液，再在每孔中分別加入已稀釋好的標(biāo)準(zhǔn)品和蛋白樣品各20μL，建議標(biāo)準(zhǔn)品做2~3個復(fù)孔。37℃放置30分鐘。
6.測定A562nm處的吸光度值，540-595nm之間的波長也可接受。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算出蛋白濃度。
elisa酶聯(lián)免疫試劑盒的實驗質(zhì)量控制
?。?）確定控制的對象；
?。?）規(guī)定控制對象的標(biāo)準(zhǔn)（預(yù)期值）；
（3）制定或選擇控制方法和手段；
（4）測量實際數(shù)據(jù)；
（5）比較或較對實際數(shù)據(jù)與預(yù)期值之間的差異，并說明產(chǎn)生這一差異的原因。超出預(yù)定誤差范圍，報警系發(fā)出信號，反饋通道中斷。
（6）采取行動，解決差異。恢復(fù)原狀（原標(biāo)準(zhǔn)狀態(tài)）的手段發(fā)揮作用。質(zhì)量控制主要采用質(zhì)控圖進行。質(zhì)控圖是把某一檢驗的性能數(shù)據(jù)與所計算出來的預(yù)期的"控制限"進行比較的圖。這種性能數(shù)據(jù)是在按規(guī)程正常進行時，按時間順序而抽選出來的，其目的是檢測檢驗過程中變異的"可追查"性原因。"可追逆"性的誤差原因，是指除去隨機誤差以外的其他原因。"控制限"是通過統(tǒng)計計算出來的。
