實驗外包: 1.基因組學:基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學分析 2.轉錄組學:microRNA芯片、LncRNA芯片、表達譜芯片、RNA-seq 3.蛋白質組學:2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM 4.基因檢測:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR 5.蛋白質檢測:Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA 6.病理檢測:HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細胞分選 7.代謝組學:GC-MS、LC-MS、NMR 8.細胞及動物模型:原代細胞、細胞模型、動物模型構建 服務流程: 接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數(shù)據(jù)分析——結果交付——售后服務。 ? 產(chǎn)品名稱 | 衣氏放線菌PCR檢測試劑盒 | 英文名稱 | Actinomyces israeliiPCR | 貨號 | HE30579-R |
使用方法: 一、樣品 DNA 的制備 用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。 二、制備 Cps 標準曲線(以 10-10E6 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。 1. 標記 6 個離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號。 2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(用帶芯槍頭,下同)。 3. 產(chǎn)品僅用于科研先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請不要將本試劑盒提供的標準品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。 4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。 5. 換槍頭,從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。 6. 換槍頭,從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中,重復上面的操作直到得到 6個稀釋度的陽性對照。7. NC 管中不加任何陽性對照。 8. 從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進行定量 PCR(見下步),每個樣品做 3 次重復。PCR 后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對數(shù)值為橫軸,繪制標準曲線。 PCR實驗方法步驟: 方法 1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5 μl dNTP mix (2mM) 4 μl 引物1(10pM) 2 μl 引物2(10pM) 2 μl Taq酶 (2U/μl) 1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。 2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。 3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。 特點優(yōu)勢: 1. 特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學分析,經(jīng)過TIANDZ及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。 2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。 3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。 4. 實用性:產(chǎn)品僅用于科研檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。 5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除TIANDZ公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。 6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結果。 細胞毒素相關蛋白A試劑盒 質量規(guī)格:HPLC>98%,標準品 包裝;5g 細胞凋亡相關斑點樣蛋白試劑盒 質量規(guī)格:含量>98.5%,BR 包裝;1g 硒結合蛋白1試劑盒 質量規(guī)格:>98.5%,BR 包裝;250mg 硒蛋白P試劑盒 質量規(guī)格:>98.0%,BR,可用于細胞培養(yǎng) 包裝;5g 戊型肝炎病毒抗體試劑盒 質量規(guī)格:HPLC>98%,標準品 包裝;250g 戊型肝炎病毒抗體試劑盒 質量規(guī)格:>98.5% 包裝;500g 戊糖素試劑盒 質量規(guī)格:>97.0%,BR 包裝;1G 舞蹈病蛋白相互作用蛋白1試劑盒 質量規(guī)格:HPLC≥99%,標準品 包裝;250MG 五聚素3試劑盒 質量規(guī)格:含量>99.0% 包裝;1g 無花果酶2試劑盒 質量規(guī)格:HPLC>95%, 包裝;25g 烏頭酸酶2試劑盒 質量規(guī)格:>99%,BR 包裝;5g 蝸牛同源物2試劑盒 質量規(guī)格:HPLC>98%,標準品 包裝;20MG 蝸牛同源物1試劑盒 質量規(guī)格:≥630µg/mg,BR,可用于細胞培養(yǎng) 包裝;1g 胃粘膜相關淋巴樣組織淋巴瘤抗體試劑盒 質量規(guī)格:>97%,BR 包裝;1g 胃內(nèi)因子試劑盒 質量規(guī)格:HPLC>95%,標準品 包裝;25g 胃泌酸調節(jié)素elisa試劑盒 質量規(guī)格:>97% 包裝;5g 胃泌素細胞抗體試劑盒 質量規(guī)格:含量測定 包裝;100g 衣氏放線菌PCR檢測試劑盒Salmonella cholerae-suis 中文名稱:豬霍亂沙門氏菌種屬:Salmonella cholerae-suis提供形式:凍干物安全等級:2模式菌株:no應用領域:研究、質量控制培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:營養(yǎng)肉汁瓊脂培養(yǎng)基::蛋白胨 10.0g,牛肉浸取物 3.0g,NaCl 5.0g,瓊脂 15.0g,蒸餾水 1.0L,pH7.0。[注] 培養(yǎng)芽孢桿菌時加入5mg MnSO4·H2O,則有利于產(chǎn)生芽孢。121℃,15min。生長條件:36℃,好氧存儲條件:真空冷凍干燥法 純度:99% Rhizoctonia solani 中文名稱:立枯絲核菌(斜面)種屬:Rhizoctonia solani提供形式:斜面安全等級:1模式菌株:no應用領域:用于植物立枯病防治研究。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:綜合PDA:20%馬鈴薯汁1L,葡萄糖20g ,KH2PO4 3g, MgSO4.7H2O 1.5g,硫胺素微量,瓊脂 15g,pH 自然。生長條件:25-28℃,好氧存儲條件:真空冷凍干燥法 純度:99% Mycobacterium sp. 中文名稱:分枝桿菌屬種屬:Mycobacterium sp.提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應用領域:甾體轉化(降解甾醇AD和ADD)培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:營養(yǎng)肉汁瓊脂: 3.0g,蛋白胨 10.0g,NaCl 5.0g,瓊脂 15.0g,蒸餾水 1.0L,pH7.0。[注] 培養(yǎng)芽孢桿菌時加入5mg MnSO4·H2O,則有利于產(chǎn)生芽孢。pH7.0。121℃,15min。生長條件:30℃,好氧存儲條件:真空冷凍干燥法 純度:96% Bifidobacterium animalis subsp. lactis 中文名稱:動物雙歧桿菌乳亞種種屬:Bifidobacterium animalis subsp. lactis提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應用領域:乳制品發(fā)酵,乳酸菌飲料培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:MRS:生長條件:37℃,厭氧存儲條件:真空冷凍干燥法 純度:96% Ganoderma Lucidum(Leysser:Fries)Karsten 中文名稱:靈芝(紅芝,赤芝)(斜面)種屬:Ganoderma Lucidum(Leysser:Fries)Karsten提供形式:斜面安全等級:1模式菌株:no應用領域:藥用培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:綜合PDA:馬鈴薯煮汁1000mL,磷酸二氫鉀 3g,硫酸鎂 1.5g,葡萄糖 20g,維生素B1 10mg,瓊脂 20g,pH自然。馬鈴薯煮液:200g馬鈴薯,去皮,切塊,放入蒸餾水中煮沸30min,取濾液定容至1000mL,備用。121℃,15min。生長條件:25-27℃,好氧 純度:96% Pleurotus ostreatus (Jacq.:Fr.) Quél. 中文名稱:糙皮側耳、平菇(斜面)種屬:Pleurotus ostreatus (Jacq.:Fr.) Quél.提供形式:僅提供斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no應用領域:食用培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:綜合PDA:20%馬鈴薯汁1L,葡萄糖20g ,KH2PO4 3g, MgSO4.7H2O 1.5g,硫胺素微量,瓊脂 15g,pH 自然。生長條件:25-28℃,好氧 純度:銠含量,10.6% Aspergillus brasiliensis 中文名稱:巴西曲霉種屬:Aspergillus brasiliensis提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應用領域:防霉抗菌。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:Czapek's 瓊脂:蔗糖 30.0 g,NaNO3 3.0 g,MgSO4·7H2O 0.5 g,KCl 0.5 g,FeSO4·4H2O 0.01 g,K2HPO4 1.0 g,瓊脂 15.0 g,蒸餾水 1.0 L,pH 6.0-6.5,121℃,15min。121℃,15min。生長條件:28℃,好氧存儲條件:真空冷凍干燥法 純度:98% Anoxybacillus rupiensis 中文名稱:努比鹵地無氧芽孢桿菌種屬:Anoxybacillus rupiensis提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應用領域:產(chǎn)半纖維素酶。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:營養(yǎng)肉汁瓊脂: 3.0g,蛋白胨 10.0g,NaCl 5.0g,瓊脂 15.0g,蒸餾水 1.0L,pH7.0。[注] 培養(yǎng)芽孢桿菌時加入5mg MnSO4·H2O,則有利于產(chǎn)生芽孢。pH7.0。121℃,15min。生長條件:60℃,好氧存儲條件:真空冷凍干燥法 純度:98% |