保存條件: 僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法 1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。 2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。 3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。 4. 組織勻漿:將組織加入適量鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。 5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測,請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。 產(chǎn)品名稱:內(nèi)氏放線菌PCR檢測試劑盒規(guī)格 英文名稱:Actinomyces naeslundiiPCR 編號(hào):HE30580-R 類別:PCR檢測試劑盒 儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。 運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。 ? 產(chǎn)品僅用于科研注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。 反應(yīng)五要素: 參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則: ①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。 ②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。 ③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。 ④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。 ⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。 ⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。 ⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。 引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。 技術(shù)原理: DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動(dòng)子的參與下,根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。 在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時(shí)也可以發(fā)生變性解鏈,當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性,并設(shè)計(jì)引物做啟動(dòng)子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。( DNA高溫變性低溫復(fù)性) 產(chǎn)品僅用于科研發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對(duì)于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個(gè)循環(huán)加酶,使PCR技術(shù)變得非常簡捷、同時(shí)也大大降低了成本,PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用,并逐步應(yīng)用于臨床。 儲(chǔ)需要自備的器材: 1.儀器:分析天平、離心機(jī)、熒光 PCR 擴(kuò)增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器(2 µL、20 µL、200 µL、1000 µL)。 2.耗材:熒光 PCR 反應(yīng)管、眼科剪、眼科鑷、鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯(DEPC)水 處理的滅菌離心管、吸頭(10 µL、200 µL、1000 µL)、滅菌雙蒸水。 特點(diǎn): 1.即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡單,定量準(zhǔn)確快速。 2. 引物經(jīng)過優(yōu)化,特異性強(qiáng)。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長度為 560 bp。 3. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。 4. 提供陽性對(duì)照,便于分析試驗(yàn)結(jié)果。 胃泌素釋放肽前體試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR 包裝;25g 胃泌素釋放多肽試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;5g 胃泌素試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>99.0% 包裝;250mg 胃動(dòng)素試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;1g 胃動(dòng)蛋白2試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng) 包裝;100g 胃蛋白酶原II elisa試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;25g 胃蛋白酶原I elisa試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;500g 胃蛋白酶原C試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>99% 包裝;1g 胃蛋白酶原A試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>99.0% 包裝;250mg 胃蛋白酶試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;1g 胃癌抗原MG7-Ag elisa試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>99.0%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng) 包裝;5g 胃癌標(biāo)志物elisa試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;1g 尾肢同源蛋白2試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 包裝;250mg 尾加壓素Ⅱ elisa試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:≥98.50%;Src抑制劑 包裝;1g 維生素K依賴蛋白Z試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR 包裝;1g 維生素K1試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;250mg 維生素H試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>98.0% 包裝;5g 內(nèi)氏放線菌PCR檢測試劑盒規(guī)格 Streptomyces lanatus 中文名稱:羊毛鏈霉菌種屬:Streptomyces lanatus分離基物:土壤提供形式:凍干粉安全等級(jí):1模式菌株:yes應(yīng)用領(lǐng)域:模式菌株:,產(chǎn)生防線菌素X復(fù)合物培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:ISP-2培養(yǎng)基::酵母提取物 4.0 g,麥芽提取物 10.0 g,葡萄糖 4.0 g,瓊脂 15.0 g,蒸餾水 1.0 L,pH7.3。121℃,15分鐘滅菌。生長條件:28℃,好氧 純度:98% Morchella sp. 中文名稱:羊肚菌屬種屬:Morchella sp.提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:研究;。食用。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:綜合PDA:馬鈴薯煮汁1000mL,磷酸二氫鉀 3g,硫酸鎂 1.5g,葡萄糖 20g,維生素B1 10mg,瓊脂 20g,pH自然。馬鈴薯煮液:200g馬鈴薯,去皮,切塊,放入蒸餾水中煮沸30min,取濾液定容至1000mL,備用。121℃,15min。傳代方法①凍干管:75%酒精擦拭管壁,后用砂輪在凍干管壁劃兩圈,掰斷,用200μL無菌水或培養(yǎng)基:充分溶解,平板涂布,活化培養(yǎng)。 ②斜面:試管口用75%酒精擦拭后,火焰灼燒,后用無菌接種鏟切塊,挑取接入平板或斜面,培養(yǎng)。生長條件:25℃,好氧。生長特性8天長滿斜面,菌絲灰白色、稀疏。存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;定期移植法 純度:98% Cordyceps│militaris 中文名稱:蛹蟲草(北冬蟲夏草,北蟲草)種屬:Cordyceps│militaris提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:、藥用,適合液體發(fā)酵菌絲體。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0017生長條件:25℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;定期移植法 純度:97% Cordyceps militaris 中文名稱:蛹蟲草(北冬蟲夏草,北蟲草)(斜面)種屬:Cordyceps militaris提供形式:斜面培養(yǎng)物/凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:研究;。、藥用,適合液體發(fā)酵菌絲體。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:綜合PDA瓊脂:馬鈴薯提取液 1.0L,葡萄糖 20.0g,KH2PO4 3.0g,MgSO4.7H2O 1.5g,維生素B1 微量,瓊脂 15.0g,pH6.0。生長條件:25℃,好氧生長特性15天長滿斜面,菌絲潔白、濃密、豐厚、菌絲絨毛狀。液體深層發(fā)酵溫度23-25℃,pH值為5.5-7,發(fā)酵周期3-5天。存儲(chǔ)條件:2-8℃,定期移植法,液氮超低溫凍結(jié)法; 純度:97% Campylobacter coli 中文名稱:結(jié)腸彎曲菌種屬:Campylobacter coli分離基物:狨猴的糞便提供形式:凍干物安全等級(jí):2模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:《GB4789.28培養(yǎng)基:和試劑的質(zhì)量要求》標(biāo)準(zhǔn)菌株。質(zhì)控菌株,腸道和新興傳染病研究。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:1、哥倫比亞血平板 2、TSA+5%脫纖維羊血生長條件:37℃,微需氧存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法 純度:96% Rhizobium arachis 中文名稱:花生根瘤菌種屬:Rhizobium arachis安全等級(jí):1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:根瘤菌培養(yǎng)基::Yeast eztract (酵母膏) 1g Soil eztract (土壤浸提液) 200ml Mannitol (甘露醇) 10g Agar (瓊脂) 15g Distilled water (蒸餾水) 800ml pH 7.2[Note]:Soil extract:Suspend 50g finely and dried gardon soil in 200ml of tap water. Autoclave at 121℃ for 1 hr. Decant through cotton-cloth, filler though paper, make up volume to 200ml. Resterilize for 20 minutes at 121℃ , then mixed with othringredients and distributed. (土壤浸提液的制法:取土壤50克,加水200毫升,15磅蒸煮1小時(shí),經(jīng)濾紙過濾后加水補(bǔ)足到200毫升。)生長條件:25-28℃,好氧,48h 純度:96% Actinomyces oris = Actinomyces viscosus 中文名稱:粘性放線菌種屬:Actinomyces oris = Actinomyces viscosus分離基物:人類痰提供形式:凍干粉安全等級(jí):1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:哥倫比亞血平板,建議購買即用型平板。生長條件:37℃,5%CO2,鏡檢為陽性桿菌,純.24h 純度:96% Azotobacter vinelandii 中文名稱:棕色固氮菌種屬:Azotobacter vinelandii提供形式:凍干粉安全等級(jí):1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:胰胨大豆瓊脂(TSA):胰蛋白胨(酪蛋白胰酶消化物) 15.0g,大豆蛋白胨(大豆粉木瓜蛋白酶消化物) 5.0g,氯化鈉 5.0g,瓊脂 15.0g,pH7.3±0.2。121℃,15min。生長條件:30℃,好氧 純度:98% |