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化膿放線菌PCR檢測試劑盒說明書

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更新日期:
2024-08-29
點擊次數(shù):
783
產(chǎn)品特點:
化膿放線菌PCR檢測試劑盒說明書實驗步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。
  50T化膿放線菌PCR檢測試劑盒說明書的詳細(xì)資料:

服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。

產(chǎn)品名稱

化膿放線菌PCR檢測試劑盒說明書

 英文名稱

 Actinomyces pyogenesPCR

 貨號

 HE30581-R

實驗外包:
1.基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學(xué)分析
2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片、LncRNA芯片、表達譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因檢測:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測:Western blot、Co-ip  EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA
6.病理檢測:HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細(xì)胞分選
7.代謝組學(xué):GC-MS、LC-MS、NMR
8.細(xì)胞及動物模型:原代細(xì)胞、細(xì)胞模型、動物模型構(gòu)建

?
特點優(yōu)勢:
    1.   特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過TIANDZ及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
    2.   重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
    3.   靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
    4.   實用性:產(chǎn)品僅用于科研檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
     5.   優(yōu)勢1:序列資源豐富,除TIANDZ公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
    6.   優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix (2mM)             
4 μl     引物1(10pM)                 
2 μl     引物2(10pM)                 
2 μl     Taq酶 (2U/μl)               
1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl) 
1 μl      加ddH2O至 50 μl 
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線(以 10-10E6 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。
1. 標(biāo)記 6 個離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(用帶芯槍頭,下同)。
3. 產(chǎn)品僅用于科研先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。
5. 換槍頭,從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。
6. 換槍頭,從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中,重復(fù)上面的操作直到得到 6個稀釋度的陽性對照。7. NC 管中不加任何陽性對照。
8. 從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進行定量 PCR(見下步),每個樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對數(shù)值為橫軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
維生素E試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:≥98.0% 包裝;100g

維生素D受體試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>98%,USP31,BR 包裝;25g

維生素D結(jié)合蛋白試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;5g

維生素D3試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR,細(xì)胞培養(yǎng)級 包裝;10g

維生素D2試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;2g

維生素C試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>98% 包裝;100g

維生素B6試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:≥580IU/ mg,BR 包裝;25g

維生素B3試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:含量測定 包裝;5g

維生素B2試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:≥98%,BR,醋酸鹽形式 包裝;1g

維生素B12試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>99%,用于藥理造模 包裝;5g

維生素B1試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;1g

維生素A試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%,JP2002 包裝;5g

微管相關(guān)蛋白tau試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;1g

微管相關(guān)蛋白2試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>98.5% 包裝;5g

微管相關(guān)蛋白1A/1B輕鏈3B試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;100g

微管相關(guān)蛋白1A/1B輕鏈3A試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>99.0%,BR 包裝;25g

微管微絲交聯(lián)因子1試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;5g
化膿放線菌PCR檢測試劑盒說明書StreptococusthermophilusOrla-Jensen 中文名稱:嗜熱乳酸鏈球菌種屬:StreptococusthermophilusOrla-Jensen安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:5,44生長條件:50℃ 純度:98%

Cordyceps│militaris 中文名稱:蛹蟲草(北冬蟲夏草,北蟲草)種屬:Cordyceps│militaris提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:、藥用,適合液體發(fā)酵菌絲體。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0017生長條件:25℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;定期移植法 純度:AR,99.5%

Vibrio anguillarum 中文名稱:鰻弧菌種屬:Vibrio anguillarum提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:研究、質(zhì)量控制。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:細(xì)菌用海洋液體培養(yǎng)基:[Bacto marine broth (DIFCO 2216)]:酵母膏 1.0g,蛋白胨 5.0g,F(xiàn)e(III) citrate 0.1g,NaCl 19.45g,MgCl2 5.9g,KCl 0.55g,Na2SO4 3.24g,CaCl2 1.80g,Na2CO3 0.16g,KBr 0.08g,SrCl2 34.0mg,H3BO3 22.0mg,NaSiO3 4.0mg,NaF 2.4g,NH4NO3 1.6mg,Na2HPO4 8mg,蒸餾水 1.0L,pH7.6。121℃,15min。生長條件:20℃,好氧存儲條件:真空冷凍干燥法 純度:AR,99.5%

Aeromonas sobria 中文名稱:溫和氣單胞菌種屬:Aeromonas sobria分離基物:魚提供形式:凍干粉安全等級:1模式菌株:yes培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:營養(yǎng)肉汁瓊脂: 3.0g,蛋白胨 10.0g,NaCl 5.0g,瓊脂 15.0g,蒸餾水 1.0L,pH7.0。[注] 培養(yǎng)芽孢桿菌時加入5mg MnSO4·H2O,則有利于產(chǎn)生芽孢。pH7.0。121℃,15min。生長條件:30℃,好氧 純度:98%

Streptococcus pyogenes 中文名稱:化膿性鏈球菌(釀膿鏈球菌)種屬:Streptococcus pyogenes分離基物:患有流行性咽炎的兒童咽部提供形式:凍干物安全等級:2模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:培養(yǎng)基:質(zhì)控,A組鏈球菌質(zhì)控菌株;BBL、生物梅里埃Vitek、IDS和Micro-Media產(chǎn)品質(zhì)控菌株。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:腦心浸液瓊脂(BHI):牛腦浸粉 4.0g,牛心浸粉 4.0g,蛋白胨 5.0g,酪蛋白胨16.0g,NaCl 5.0g,葡萄糖 2.0g,磷酸氫二鈉 2.5g,瓊脂 20.0g,pH7.4 ± 0.2。121℃,15min。生長條件:37℃,好氧存儲條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:98%

Fusarium solani 中文名稱:腐皮鐮孢(斜面)種屬:Fusarium solani提供形式:僅提供斜面安全等級:2模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:馬鈴薯、葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基:(PDA):馬鈴薯提取液 1.0L,葡萄糖 20.0g,瓊脂 15.0g,pH自然。[注] 馬鈴薯提取液:取去皮馬鈴薯200g,切成小塊,加水1.0L煮沸30min,濾去馬鈴薯塊,將濾液補足至1.0L。傳代方法①凍干管:75%酒精擦拭管壁,后用砂輪在凍干管壁劃兩圈,掰斷,用200μL無菌水或培養(yǎng)基:充分溶解,平板涂布,活化培養(yǎng)。 ②斜面:試管口用75%酒精擦拭后,火焰灼燒,后用無菌接種鏟切塊,挑取接入平板或斜面,培養(yǎng)。生長條件:24℃,好氧存儲條件:2-8℃冷藏,凍干管10年以上,斜面1-3個月。 純度:98%

Vibrio fischeri 中文名稱:費舍爾弧菌種屬:Vibrio fischeri提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:水或污水毒性檢測。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:海洋細(xì)菌培養(yǎng)基:[Bacto marine broth (DIFCO 2216)]:酵母膏 1.0g,蛋白胨 5.0g,F(xiàn)e(III) citrate 0.1g,NaCl 19.45g,MgCl2 5.9g,KCl 0.55g,Na2SO4 3.24g,CaCl2 1.80g,Na2CO3 0.16g,KBr 0.08g,SrCl2 34.0mg,H3BO3 22.0mg,NaSiO3 4.0mg,NaF 2.4g,NH4NO3 1.6mg,Na2HPO4 8mg,蒸餾水 1.0L,pH7.6。生長條件:20-22℃,好氧存儲條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:98%

Clostridium circulans 中文名稱:環(huán)狀芽胞桿菌種屬:Clostridium circulans分離基物:窖泥提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:丁酸、香料或釀酒。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0858生長條件:37℃存儲條件:真空冷凍干燥法 純度:98%

 

產(chǎn)品相關(guān)關(guān)鍵字: 化膿放線菌 PCR檢測試劑盒 50T
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