產(chǎn)品僅用于科研注意事項(xiàng)：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動力學(xué)；8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
產(chǎn)品名稱：溫和氣單胞菌PCR檢測試劑盒規(guī)格
英文名稱：Aeromonas sobriaPCR
編號：HE30588-R
類別:PCR檢測試劑盒
儲存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸：低溫、避光，快遞免費(fèi)送貨上門。
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儲需要自備的器材：
1．儀器：分析天平、離心機(jī)、熒光 PCR 擴(kuò)增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器（2 µL、20
µL、200 µL、1000 µL）。
2．耗材：熒光 PCR 反應(yīng)管、眼科剪、眼科鑷、鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯（DEPC）水
處理的滅菌離心管、吸頭（10 µL、200 µL、1000 µL）、滅菌雙蒸水。
特點(diǎn)：
1.即開即用，用戶只需要提供樣品 DNA 模板，操作簡單，定量準(zhǔn)確快速。
2. 引物經(jīng)過優(yōu)化，特異性強(qiáng)。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長度為 560 bp。
3. PCR mix 中含上樣染料，PCR 后可以直接上樣電泳。
4. 提供陽性對照，便于分析試驗(yàn)結(jié)果。
保存條件：
僅用于科研14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
絲蟲病抗體試劑盒 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;5g

絲氨酸肽酶抑制劑,Kazal 1型試劑盒 質(zhì)量規(guī)格：>99,BR 包裝;1g

絲氨酸肽酶2甘露聚糖結(jié)合凝集素試劑盒 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;1g

絲氨酸蛋白酶抑制因子肽酶抑制因子進(jìn)化枝3G試劑盒 質(zhì)量規(guī)格：>99%,USP,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng) 包裝;250mg

絲氨酸蛋白酶HTRA1試劑盒 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;100g

絲氨酸/蘇氨酸激酶24試劑盒 質(zhì)量規(guī)格：>98%,USP,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng) 包裝;25g

絲氨酸/蘇氨酸蛋白磷酸酶試劑盒 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;25g

絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶PAK4試劑盒 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR 包裝;5g

絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶B-raf試劑盒 質(zhì)量規(guī)格：>98%,USP30,BR 包裝;500mg

瞬態(tài)電壓感受器陽離子通道,子類V,成員4試劑盒 質(zhì)量規(guī)格：>98%,標(biāo)準(zhǔn)品用于含量測定 包裝;100g

瞬態(tài)電壓感受器陽離子通道,子類V,成員1試劑盒 質(zhì)量規(guī)格：>98%,進(jìn)分,Sigma A4882 包裝;25g

瞬時受體電位陽離子通道,亞科C,成員6試劑盒 質(zhì)量規(guī)格：>98%,USP,BR 包裝;500g

閘蛋白14試劑盒 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;25g

通道蛋白5試劑盒 質(zhì)量規(guī)格：>98%%,USP,BR 包裝;5g

通道蛋白4抗體試劑盒 質(zhì)量規(guī)格：>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;1g

通道蛋白3試劑盒 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR 包裝;25g

痘帶狀皰疹病毒IgM試劑盒 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;5g
溫和氣單胞菌PCR檢測試劑盒規(guī)格 Fusobacterium nucleatum subsp nucleatum 中文名稱：具核梭桿菌聚核亞種種屬:Fusobacterium nucleatum subsp nucleatum提供形式:凍干粉安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:哥倫比亞血平板（成品）生長條件:37℃，厭氧，24-48h 純度：≥99%

Bacillus pasteurii 中文名稱：巴氏芽孢桿菌種屬:Bacillus pasteurii提供形式:凍干粉安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CASO +20g/L尿素：蛋白胨 5.0 g，牛肉浸膏 3.0 g ， 尿素 20.0 g ，蒸餾水 1.0 L，pH 7.3 。121℃，15min。生長條件:30℃，好氧 純度：98%

Clostridium difficile 中文名稱：艱難梭菌種屬:Clostridium difficile提供形式:凍干物安全等級:2模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:研究、質(zhì)量控制培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:硫乙醇酸鹽培養(yǎng)基:：酪胨15.0g,酵母浸出粉5.0g，葡萄糖5.0g，硫乙醇酸鈉0.5g，L-胱氨酸0.5g，刃天青0.001g，氯化鈉2.5g，pH7.1±0.2。121℃，15min。生長條件:36℃，厭氧存儲條件:真空冷凍干燥法 純度：98%

Escherichia coli EHEC O157：H7 中文名稱：出血性大腸埃希氏菌 O157：H7種屬:Escherichia coli EHEC O157：H7提供形式:凍干管、試管斜面安全等級:2模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:研究、質(zhì)量控制培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:營養(yǎng)瓊脂： 3.0g，蛋白胨 10.0g，NaCl 5.0g，瓊脂 20.0g，蒸餾水 1.0L，pH 7.0。121℃，15min滅菌。生長條件:37℃，好氧生長特性G-桿菌，賴氨酸脫羧酶、鳥氨酸脫羧酶均陽性，精氨酸雙水解酶陰性，有動力，IMViC實(shí)驗(yàn)：+、+、-、-，尿素酶、苯丙氨酸脫氨酶陰性，不產(chǎn)H2S，不發(fā)酵山梨醇、纖維二糖和側(cè)金盞花醇，MUG陰性，發(fā)酵乳糖、甘露醇。兼性厭氧，適pH7.4~7.6。血清型：O 157 : H 7。存儲條件:4℃，避光冷藏 純度：95%

Haemophilus influenzae 中文名稱：流感嗜血桿菌種屬:Haemophilus influenzae分離基物:57歲患者的肺膿瘍提供形式:凍干粉安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:質(zhì)控菌株；藥敏的試驗(yàn)；呼吸的研究培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:巧克力平板（成品）生長條件:37℃，5%CO2 純度：天然礦物,晶粒,大約 0.06-19in

Kocuria│rhizophila 中文名稱：嗜根考克氏菌種屬:Kocuria│rhizophila提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:抗生物質(zhì)殘留檢查。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0002生長條件:30℃存儲條件:-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法 純度：天然礦物,晶粒,大約 0.06-19in

Escherichia coli O157:H7 中文名稱：大腸埃希氏菌O157種屬:Escherichia coli O157:H7提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:研究；。BBL科瑪嘉質(zhì)控菌株。GB4789.28-2013《食品微生物學(xué)檢驗(yàn) 培養(yǎng)基:和試劑的質(zhì)量要求》中規(guī)定質(zhì)控菌株。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:營養(yǎng)肉汁瓊脂：蛋白胨 5.0g，牛肉浸取物 3.0g，NaCl 5.0g，瓊脂 15.0g，蒸餾水 1.0L，pH7.0。[注] 培養(yǎng)芽孢桿菌時加入5mg MnSO4·H2O，則有利于產(chǎn)生芽孢。生長條件:37℃，好氧，24h生長特性血清型O157：H7，山梨醇陰性，Vero 細(xì)胸毒素(志賀毒素)陰性。存儲條件:2-8℃ 純度：AR,98%

Vibrio harveyi 中文名稱：哈維氏弧菌種屬:Vibrio harveyi分離基物:哈維氏弧菌菌株BB120提供形式:凍干粉安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:哈維氏弧菌 BB－170培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:Marine Agar 2216 ：蛋白棟 5.00 g ，酵母粉 1.00 g ，F(xiàn)e(III) citrate 0.10 g ，NaCl 19.45 g， 無水MgCl2 5.90 g ，Na2SO4 3.24 g， CaCl2 1.80 g ，KCl 0.55 g， NaHCO3 0.16 g， KBr 0.08 g ，SrCl2 34.00 mg ，H3BO3 22.00 mg， Na-silicate 4.00 mg ，NaF 2.40 mg， (NH4)NO3 1.60 mg ，Na2HPO4 8.00 mg， 蒸餾水 1000.00 ml， pH 7.6 ± 0.2生長條件:30℃，好氧 純度：99%
反應(yīng)五要素：
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是末及倒數(shù)第二個堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)， 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn)， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。
技術(shù)原理：
DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈，在DNA聚合酶與啟動子的參與下，根據(jù)堿基互補(bǔ)配對原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。
在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，DNA在高溫時也可以發(fā)生變性解鏈，當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此，通過溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性，并設(shè)計(jì)引物做啟動子，加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。（ DNA高溫變性低溫復(fù)性）
產(chǎn)品僅用于科研發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義，該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活，不需要每個循環(huán)加酶，使PCR技術(shù)變得非常簡捷、同時也大大降低了成本，PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用，并逐步應(yīng)用于臨床。