服務(wù)流程: 接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測(cè)——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。 產(chǎn)品名稱 | 滅鮭氣單胞菌PCR檢測(cè)試劑盒 | 英文名稱 | Aeromonas salmonicidaPCR | 貨號(hào) | HE30587-R |
實(shí)驗(yàn)外包: 1.基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測(cè)、DNA甲基化檢測(cè)、生物信息學(xué)分析 2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片、LncRNA芯片、表達(dá)譜芯片、RNA-seq 3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM 4.基因檢測(cè):DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR 5.蛋白質(zhì)檢測(cè):Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA 6.病理檢測(cè):HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細(xì)胞分選 7.代謝組學(xué):GC-MS、LC-MS、NMR 8.細(xì)胞及動(dòng)物模型:原代細(xì)胞、細(xì)胞模型、動(dòng)物模型構(gòu)建 ? 特點(diǎn)優(yōu)勢(shì): 1. 特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過TIANDZ及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè),特異性均達(dá)到100%。 2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。 3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè),當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè),無需繁瑣的增菌過程。 4. 實(shí)用性:產(chǎn)品僅用于科研檢測(cè)范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè),整個(gè)檢測(cè)過程為3-4個(gè)小時(shí)。 5. 優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除TIANDZ公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。 6. 優(yōu)勢(shì)2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。 PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟: 方法 1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5 μl dNTP mix (2mM) 4 μl 引物1(10pM) 2 μl 引物2(10pM) 2 μl Taq酶 (2U/μl) 1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。 2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。 3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長期保存。 4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。 使用方法: 一、樣品 DNA 的制備 用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測(cè)靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測(cè)靈敏度。 二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線(以 10-10E6 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對(duì)照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對(duì)照。 1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號(hào)。 2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(用帶芯槍頭,下同)。 3. 產(chǎn)品僅用于科研先將本試劑盒提供的陽性對(duì)照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請(qǐng)不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。 4. 在 6 號(hào)管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。 5. 換槍頭,從 6 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 5 號(hào)管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽性對(duì)照。 6. 換槍頭,從 5 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 4 號(hào)管中,重復(fù)上面的操作直到得到 6個(gè)稀釋度的陽性對(duì)照。7. NC 管中不加任何陽性對(duì)照。 8. 從 1-6 號(hào)管中分別取 5 μL 和待測(cè)樣品一起進(jìn)行定量 PCR(見下步),每個(gè)樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個(gè)陽性對(duì)照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對(duì)數(shù)值為橫軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。 髓鞘相關(guān)糖蛋白抗體試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR,細(xì)胞培養(yǎng)級(jí) 包裝;1g 髓鞘相關(guān)糖蛋白試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>99%,EP6,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng) 包裝;5g 髓鞘堿性蛋白抗體試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;1g 髓鞘蛋白P0試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,CP2005,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng) 包裝;5g 髓磷脂堿性蛋白試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;1g 髓磷脂P2蛋白試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:≥99%,BR 包裝;25g 髓過氧化物酶特異性抗中性粒細(xì)胞胞質(zhì)抗體IgG試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;5g 髓過氧化物酶試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:≥98.5%,BR 包裝;100mg 酸性鐵蛋白試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;25mg 酸性神經(jīng)鞘磷脂酶試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>99.5%,EP6.2 包裝;25g 酸性磷酸酶試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;1g 酸性富亮氨酸核磷蛋白32家族成員E試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>1200u/mg,CP2005 包裝;100g 酸性成纖維細(xì)胞生長因子試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR 包裝;25g 四氫生物蝶呤試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;1g 四連接素試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>3900IU/MG,EP,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng) 包裝;250mg 死亡相關(guān)蛋白1試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;1g 絲裂原活化蛋白激酶激酶6試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>99%,USP 32,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng) 包裝;1g 滅鮭氣單胞菌PCR檢測(cè)試劑盒Salmonella enterica subsp. 中文名稱:腸炎沙門氏菌亞種種屬:Salmonella enterica subsp.分離基物:進(jìn)口麥樂雞提供形式:凍干物安全等級(jí):2模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:研究、質(zhì)量控制培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:營養(yǎng)肉汁瓊脂培養(yǎng)基::蛋白胨 5.0g,牛肉浸取物 3.0g,NaCl 5.0g,瓊脂 15.0g,蒸餾水 1.0L,pH7.0。[注] 培養(yǎng)芽孢桿菌時(shí)加入5mg MnSO4·H2O,則有利于產(chǎn)生芽孢。121℃,15min。生長條件:36℃,好氧存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法 純度:用于熒光分析 Hanseniaspora uvarum 中文名稱:葡萄汁有孢漢遜酵母種屬:Hanseniaspora uvarum分離基物:蘋果提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:用于果酒發(fā)酵研究培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0077生長條件:28℃存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法 純度:90%,for fluorescence Bacillus altitudinis 中文名稱:高地芽胞桿菌種屬:Bacillus altitudinis分離基物:紅樹林土壤提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:產(chǎn)纖維素酶 ,可降解羧甲基纖維素CMC。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:營養(yǎng)肉汁瓊脂: 3.0g,蛋白胨 10.0g,NaCl 5.0g,瓊脂 15.0g,蒸餾水 1.0L,pH7.0。[注] 培養(yǎng)芽孢桿菌時(shí)加入5mg MnSO4·H2O,則有利于產(chǎn)生芽孢。pH7.0生長條件:25-28℃,好氧,24h,鏡檢為陽性短桿菌,菌種純。存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法 純度:≥99% Escherichia coli 中文名稱:大腸埃希氏菌(凍干粉)種屬:Escherichia coli分離基物:人的糞便提供形式:凍干管安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:血清型:O157:H7。伴出血性腸炎培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:營養(yǎng)肉汁瓊脂: 3.0g,蛋白胨 10.0g,NaCl 5.0g,瓊脂 15.0g,蒸餾水 1.0L,pH7.0。[注] 培養(yǎng)芽孢桿菌時(shí)加入5mg MnSO4·H2O,則有利于產(chǎn)生芽孢。pH7.0。121℃,15min。傳代方法①凍干管:75%酒精擦拭管壁,后用砂輪在凍干管壁劃兩圈,掰斷,用200μL無菌水或培養(yǎng)基:充分溶解,平板涂布,活化培養(yǎng)。 ②斜面:試管口用75%酒精擦拭后,火焰灼燒,后用無菌接種鏟切塊,挑取接入平板或斜面,培養(yǎng)。生長條件:37℃,好氧存儲(chǔ)條件:2-8℃冷藏 純度:99% Cordyceps militaris 中文名稱:蛹蟲草(北冬蟲夏草,北蟲草)(斜面)種屬:Cordyceps militaris提供形式:斜面培養(yǎng)物,凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:研究;。、藥用,適合液體發(fā)酵菌絲體。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:綜合PDA瓊脂:馬鈴薯提取液 1.0L,葡萄糖 20.0g,KH2PO4 3.0g,MgSO4.7H2O 1.5g,維生素B1 微量,瓊脂 15.0g,pH6.0。生長條件:25℃,好氧生長特性15天長滿斜面,菌絲潔白、濃密、豐厚、菌絲絨毛狀。液體深層發(fā)酵溫度23-25℃,pH值為5.5-7,發(fā)酵周期3-4天。存儲(chǔ)條件:2-8℃。液氮超低溫凍結(jié)法;定期移植法 純度:99% Rhodopseudomonas palustris 中文名稱:沼澤紅假單胞菌(菌液)(暫無)種屬:Rhodopseudomonas palustris提供形式:僅提供菌液安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:研究;。應(yīng)用于番茄紅素、水質(zhì)凈化和作為飼料添加劑等方面。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:112 Van Niel's Yeast Agar:K2HPO4 1.0 g,MgSO4 0.5 g,酵母提取物 10.0 g,蒸餾水 1000 ml,pH 7.0-7.2。121℃,15min。生長條件:30℃,厭氧,在鎢絲燈下培養(yǎng)生長特性光合細(xì)菌存儲(chǔ)條件:2-8℃。 純度:98% Escherichia coli O157 中文名稱:腸致病性大腸埃希氏菌種屬:Escherichia coli O157分離基物:腹瀉病例糞便標(biāo)本提供形式:凍干物安全等級(jí):2模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:研究?!禛B/T 4789.6-2003致瀉大腸埃希氏菌檢驗(yàn)》陽性對(duì)照菌株。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:營養(yǎng)肉汁瓊脂:蛋白胨 5.0g,牛肉浸取物 3.0g,NaCl 5.0g,瓊脂 15.0g,蒸餾水 1.0L,pH7.0。[注] 培養(yǎng)芽孢桿菌時(shí)加入5mg MnSO4·H2O,則有利于產(chǎn)生芽孢。生長條件:37℃,好氧。生長特性革蘭氏陰性桿菌,在麥康凱培養(yǎng)基:上生長成紅色菌落,菌落圓而突起,能發(fā)酵乳糖。存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;2-8℃,真空冷凍干燥法 純度:98% Staphylococcus aureus subsp.aureus Rosenbach 中文名稱:金黃色葡萄球菌亞種種屬:Staphylococcus aureus subsp.aureus Rosenbach分離基物:臨床分離提供形式:凍干管、試管斜面安全等級(jí):2模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:耐甲氧西林培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:Trypticase Soy Agar(TSA):胰蛋白胨15g,大豆蛋白胨5.0 g ,氯化鈉 5.0 g ,蒸餾水1000.00 ml, 瓊脂 15.0 g ,pH 7.3生長條件:37℃,好氧存儲(chǔ)條件:4℃,避光冷藏。 純度:≥99% |