特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途! 產(chǎn)品名稱 | 淋病奈瑟菌探針法熒光PCR檢測試劑盒 | 英文名稱 | Neisseria gonorrhoeae | 貨號 | YSP96993 |
熒光染料的優(yōu)點: 產(chǎn)品僅用于科研使用簡便; 可以與任何PCR產(chǎn)物結(jié)合; 價格便宜; 熒光染料的缺點: 不能區(qū)分不同的雙鏈DNA 引物二聚體會影響檢測的敏感性 非特異性產(chǎn)物會影響結(jié)果的敏感性 引物二聚體和非特異性擴(kuò)增問題可以通過熔解曲線 (Melting curve) 進(jìn)行識別,進(jìn)而通過PCR引物的設(shè)計和反應(yīng)條件的優(yōu)化得以解決??偟膩碚f,SYBR Green I方法是一種基礎(chǔ)也的Real-time qPCR實驗手段。 ? 熒光探針: Real-e qPCR中的熒光探針為TaqMan探針,其基本原理是依據(jù)目的基因設(shè)計合成一個能夠與之特異性雜交的探針,該探針的5'端標(biāo)記熒光基團(tuán),3'端標(biāo)記淬滅基團(tuán)。 正常情況下兩個基團(tuán)的空間距離很近,熒光基因因淬滅而不能發(fā)出熒光。PCR擴(kuò)增時,引物與該探針同時結(jié)合到模板上,探針的結(jié)合位置位于上下游引物之間。 當(dāng)擴(kuò)增延伸到探針結(jié)合的位置時,Taq酶利用5'外切酶活性,將探針5'端連接的熒光分子從探針上切割下來,從而使其發(fā)出熒光。檢測到的熒光分子數(shù)與PCR產(chǎn)物的數(shù)量成正比,因此,根據(jù)PCR反應(yīng)體系中的熒光強(qiáng)度即可計算出初始DNA模板的數(shù)量。 TaqMan探針技術(shù)解決了熒光染料與非特異性擴(kuò)增結(jié)合的問題,反應(yīng)結(jié)束后無需通過熔解曲線檢測,縮短了實驗時間。 TaqMan探針技術(shù)的優(yōu)點: 熒光背景低; 敏感性高; 雜交穩(wěn)定性高; 熒光光譜分辨率好; 特異性高。 TaqMan探針技術(shù)的缺點: 成本高; 設(shè)計難度大; 只能用于檢測產(chǎn)物長度低于150bp的反應(yīng)。 由于TaqMan探針的高特異性,可用于等位基因的辨別,特別適用于人類基因多態(tài)性以及根據(jù)SNP區(qū)別和定量菌株。 PCR技術(shù)的定量原理: 擴(kuò)增曲線 在Real- qPCR中,對整個PCR反應(yīng)擴(kuò)增過程進(jìn)行了實時的檢測并記錄其熒光信號,隨著反應(yīng)的進(jìn)行,監(jiān)測到的熒光信號可以繪制成一條曲線,即為擴(kuò)增曲線。熒光擴(kuò)增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺期。 在Real-time qPCR擴(kuò)增早期,擴(kuò)增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋,無法判斷產(chǎn)物量的變化,此時即為基線期。 PCR反應(yīng)過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的,隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加,終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板,從而進(jìn)入“平臺期”。在該時期,擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加,PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關(guān)系,所以根據(jù)終的PCR產(chǎn)物量不能計算出初始模板量。 ? 熒光定量PCR原理: 產(chǎn)品僅用于科研熒光定量PCR早稱TaqMan PCR,后來也叫Real-Time PCR,是美國PE(Perkin Elmer)公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術(shù)。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標(biāo)記探針或相應(yīng)的熒光染料來實現(xiàn)其定量功能的。其原理:隨著PCR反應(yīng)的進(jìn)行,PCR反應(yīng)產(chǎn)物不斷累計,熒光信號強(qiáng)度也等比例增加。每經(jīng)過一個循環(huán),收集一個熒光強(qiáng)度信號,這樣我們就可以通過熒光強(qiáng)度變化監(jiān)測產(chǎn)物量的變化,從而得到一條熒光擴(kuò)增曲線圖。 一般而言,熒光擴(kuò)增曲線可以分成三個階段:熒光背景信號階段,熒光信號指數(shù)擴(kuò)增階段和平臺期。在熒光背景信號階段,擴(kuò)增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋,無法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺期,擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加,PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒有線性關(guān)系,根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號指數(shù)擴(kuò)增階段, PCR產(chǎn)物量的對數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系,我們可以選擇在這個階段進(jìn)行定量分析。為了定量和比較的方便,在實時熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個非常重要的概念:熒光閾值和 CT值。 Kir6.2 peptide ATP敏感性鉀通道亞基kir6.2抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg 倉鼠基質(zhì)金屬蛋白酶9/明膠酶B(MMP-9/Gelatinase B) ELISA試劑盒英文名稱:Hamster matrix metalloproteinase 9/Gelatinase B,MMP-9 ELISA K* 倉鼠甲狀腺結(jié)合球蛋白(TBG)ELISA試劑盒英文名稱:Hamster Thyroxine-Binding Globulin Assay,TBG ELISA Kit 進(jìn)口/原裝 倉鼠組織蛋白酶K(cath-K)ELISA試劑盒英文名稱:Hamster Cathepsin K,cath-K ELISA Kit * 大腸桿菌宿主殘留蛋白(E.coli P)ELISA試劑盒 英文名稱:Escherichia coli Protein,E.coli P ELISA Kit進(jìn)口/分裝 大豆凝集素(SBA)ELISA試劑盒 英文名稱:Soybean agglutinin,SBA ELISA Kit* TIMP-2 人金屬蛋白酶組織抑制因子2Multi-class antibodies規(guī)格: 48T C17ORF39 英文名稱: 17號染色體開放閱讀框39抗體 0.2ml Anti-factor VIII(FVIII) 第八因子相關(guān)抗原抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml BrdU(Human Bromodeoxyuridine) ELISA Kit 人溴脫氧核苷尿嘧啶Multi-class antibodies規(guī)格: 48T Anti-PIWIL1 piwi樣1蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml Rhesus antibody Rh HIPK3 Fas相互作用蛋白激酶3抗體 規(guī)格 0.2ml OVA sIgG(Human ovalbumin specific IgG) ELISA Kit 人卵清蛋白特異性IgG 96T STK18 英文名稱: 絲酸/蘇酸蛋白激酶18 0.2ml 轉(zhuǎn)鐵蛋白 單克隆抗體Transferrin Monoclonal Antibody700/30ul#1540/100ul#2520/200ul 延胡索酸酶 單克隆抗體FH Fumarase Monoclonal Antibody700/30ul#1540/100ul#2520/200ul 脂筏標(biāo)記蛋白1 單克隆抗體Flotillin-1 Monoclonal Antibody700/30ul#1540/100ul#2520/200ul 波形蛋白 單克隆抗體Vimentin Monoclonal Antibody700/30ul#1540/100ul#2520/200ul 環(huán)氧化酶2 單克隆抗體COX2 Monoclonal Antibody700/30ul#1540/100ul#2520/200ul 乳鐵蛋白 單克隆抗體Lactoferrin Monoclonal Antibody700/30ul#1540/100ul#2520/200ul 淋病奈瑟菌探針法熒光PCR檢測試劑盒胞嘧啶脫氨酶抗體CD34/Biotin 生物素標(biāo)記CD34抗體IgG100 ul C2GNT3蛋白抗體TOPO II Alpha/DNA TP II Alpha /FITC 熒光素標(biāo)記DNA拓普西異構(gòu)酶Ⅱ抗體IgG20 ul 酸化原癌基因c-Jun抗體TNF- Alpha /RBITC 紅色熒光素標(biāo)記腫瘤壞死因子抗體100 ul 酸化原癌基因c-Jun抗體TP53/FITC 熒光素標(biāo)記抗腫瘤P53抗體IgG400 ul 腫瘤標(biāo)志物CYFRA21-1抗體t-PA/FITC 熒光素標(biāo)記組織型纖溶酶原激活劑抗體IgG100 ul 酸化原癌基因c-Jun抗體TPH /FITC 熒光素標(biāo)記色氨酸羥化酶抗體IgG100 ul 周期素A1蛋白抗體TPO/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗甲狀腺過氧化物酶抗體IgG100µl 細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶抑制蛋白3抗體TRA16/FITC 熒光素標(biāo)記激素受體相關(guān)蛋白16抗體IgG100 ul 細(xì)胞角蛋白42TRA16 /FITC 熒光素標(biāo)記激素受體相關(guān)蛋白/孤兒素受體相關(guān)蛋白抗體IgG100 ul |