特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途! 產(chǎn)品名稱(chēng) | 亞利桑那沙門(mén)氏菌探針?lè)晒釶CR檢測(cè)試劑盒 | 英文名稱(chēng) | Salmonella arizonae | 貨號(hào) | YSP97152 |
熒光染料的優(yōu)點(diǎn): 產(chǎn)品僅用于科研使用簡(jiǎn)便; 可以與任何PCR產(chǎn)物結(jié)合; 價(jià)格便宜; 熒光染料的缺點(diǎn): 不能區(qū)分不同的雙鏈DNA 引物二聚體會(huì)影響檢測(cè)的敏感性 非特異性產(chǎn)物會(huì)影響結(jié)果的敏感性 引物二聚體和非特異性擴(kuò)增問(wèn)題可以通過(guò)熔解曲線(xiàn) (Melting curve) 進(jìn)行識(shí)別,進(jìn)而通過(guò)PCR引物的設(shè)計(jì)和反應(yīng)條件的優(yōu)化得以解決??偟膩?lái)說(shuō),SYBR Green I方法是一種基礎(chǔ)也的Real-time qPCR實(shí)驗(yàn)手段。 ? 熒光探針: Real-e qPCR中的熒光探針為T(mén)aqMan探針,其基本原理是依據(jù)目的基因設(shè)計(jì)合成一個(gè)能夠與之特異性雜交的探針,該探針的5'端標(biāo)記熒光基團(tuán),3'端標(biāo)記淬滅基團(tuán)。 正常情況下兩個(gè)基團(tuán)的空間距離很近,熒光基因因淬滅而不能發(fā)出熒光。PCR擴(kuò)增時(shí),引物與該探針同時(shí)結(jié)合到模板上,探針的結(jié)合位置位于上下游引物之間。 當(dāng)擴(kuò)增延伸到探針結(jié)合的位置時(shí),Taq酶利用5'外切酶活性,將探針5'端連接的熒光分子從探針上切割下來(lái),從而使其發(fā)出熒光。檢測(cè)到的熒光分子數(shù)與PCR產(chǎn)物的數(shù)量成正比,因此,根據(jù)PCR反應(yīng)體系中的熒光強(qiáng)度即可計(jì)算出初始DNA模板的數(shù)量。 TaqMan探針技術(shù)解決了熒光染料與非特異性擴(kuò)增結(jié)合的問(wèn)題,反應(yīng)結(jié)束后無(wú)需通過(guò)熔解曲線(xiàn)檢測(cè),縮短了實(shí)驗(yàn)時(shí)間。 TaqMan探針技術(shù)的優(yōu)點(diǎn): 熒光背景低; 敏感性高; 雜交穩(wěn)定性高; 熒光光譜分辨率好; 特異性高。 TaqMan探針技術(shù)的缺點(diǎn): 成本高; 設(shè)計(jì)難度大; 只能用于檢測(cè)產(chǎn)物長(zhǎng)度低于150bp的反應(yīng)。 由于TaqMan探針的高特異性,可用于等位基因的辨別,特別適用于人類(lèi)基因多態(tài)性以及根據(jù)SNP區(qū)別和定量菌株。 PCR技術(shù)的定量原理: 擴(kuò)增曲線(xiàn) 在Real- qPCR中,對(duì)整個(gè)PCR反應(yīng)擴(kuò)增過(guò)程進(jìn)行了實(shí)時(shí)的檢測(cè)并記錄其熒光信號(hào),隨著反應(yīng)的進(jìn)行,監(jiān)測(cè)到的熒光信號(hào)可以繪制成一條曲線(xiàn),即為擴(kuò)增曲線(xiàn)。熒光擴(kuò)增曲線(xiàn)一般分為基線(xiàn)期、指數(shù)增長(zhǎng)期和平臺(tái)期。 在Real-time qPCR擴(kuò)增早期,擴(kuò)增的熒光信號(hào)被熒光背景信號(hào)所掩蓋,無(wú)法判斷產(chǎn)物量的變化,此時(shí)即為基線(xiàn)期。 PCR反應(yīng)過(guò)程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的,隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加,終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板,從而進(jìn)入“平臺(tái)期”。在該時(shí)期,擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級(jí)的增加,PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無(wú)線(xiàn)性關(guān)系,所以根據(jù)終的PCR產(chǎn)物量不能計(jì)算出初始模板量。 ? 熒光定量PCR原理: 產(chǎn)品僅用于科研熒光定量PCR早稱(chēng)TaqMan PCR,后來(lái)也叫Real-Time PCR,是美國(guó)PE(Perkin Elmer)公司1995年研制出來(lái)的一種新的核酸定量技術(shù)。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標(biāo)記探針或相應(yīng)的熒光染料來(lái)實(shí)現(xiàn)其定量功能的。其原理:隨著PCR反應(yīng)的進(jìn)行,PCR反應(yīng)產(chǎn)物不斷累計(jì),熒光信號(hào)強(qiáng)度也等比例增加。每經(jīng)過(guò)一個(gè)循環(huán),收集一個(gè)熒光強(qiáng)度信號(hào),這樣我們就可以通過(guò)熒光強(qiáng)度變化監(jiān)測(cè)產(chǎn)物量的變化,從而得到一條熒光擴(kuò)增曲線(xiàn)圖。 一般而言,熒光擴(kuò)增曲線(xiàn)可以分成三個(gè)階段:熒光背景信號(hào)階段,熒光信號(hào)指數(shù)擴(kuò)增階段和平臺(tái)期。在熒光背景信號(hào)階段,擴(kuò)增的熒光信號(hào)被熒光背景信號(hào)所掩蓋,無(wú)法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺(tái)期,擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級(jí)的增加,PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒(méi)有線(xiàn)性關(guān)系,根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計(jì)算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號(hào)指數(shù)擴(kuò)增階段, PCR產(chǎn)物量的對(duì)數(shù)值與起始模板量之間存在線(xiàn)性關(guān)系,我們可以選擇在這個(gè)階段進(jìn)行定量分析。為了定量和比較的方便,在實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個(gè)非常重要的概念:熒光閾值和 CT值。 細(xì)胞球蛋白(CYGB)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 96% 牛瘟病毒 25g 停靠蛋白1(DOK1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 96% 副結(jié)核補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)(-)陰性血清 5g 異連蛋白α(DTNα)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 97% 土壤短芽胞桿菌 1g Dymeclin蛋白(DYM)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 97% 琥珀乳牛肝菌 100g 雙氧化酶1(DUOX1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 97% 大腸埃希菌 25g 角化不良蛋白(DKC)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 97% 干酪乳桿菌 5g Dystonin蛋白(DST)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 98% 貝萊斯芽胞桿菌 1g 外異蛋白A(EDA)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 98% 灰離褶傘 25g 內(nèi)粘蛋白(EMCN)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 98% 平菇 5g Enamelin蛋白(ENAM)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 99% 地衣芽孢桿菌 100ml 內(nèi)磺肽α(ENSα)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 99% 迂回殼囊孢 25ml 內(nèi)皮素3(EDN3)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 80% 香菇 1g 核酸外切酶1(EXO1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 80% 雙孢蘑菇(白蘑菇、洋蘑菇) 5g 纖維化蛋白(FBS)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 97% 雙環(huán)林地蘑菇 100g 鐵氧還蛋白1(FDX1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 97% 地衣芽胞桿菌 25g 脂筏特征蛋白2(FLOT2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 99% 后藤假絲酵母 10g 纖維蛋白(FBL)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 98% 大腸桿菌 100g Frataxin蛋白(FXN)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 98% 詹氏丙酸桿菌 25g 亞利桑那沙門(mén)氏菌探針?lè)晒釶CR檢測(cè)試劑盒T細(xì)胞和嗜酸性粒細(xì)胞表達(dá)特應(yīng)性皮炎蛋白EA抗體LOX-1/OLR1(Lectin-type oxidized LDL receptor 1) 凝集素樣氧化型低密度脂蛋白受體抗原1 Kit 電子轉(zhuǎn)移黃素蛋白脫氫酶抗體LPLUNC1 鼻咽癌癌基因多肽抗原1 Kit EGF毒素受體7跨膜結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體LYVE-1(lymphalic vessel endotheilial hyaluronan receptor 1) 淋巴管內(nèi)皮透明質(zhì)酸受體抗原1 Kit 激酶2抗體ACE( ACE, stis-specific isoform precursor) 血管緊張素轉(zhuǎn)換酶(抗原)100 ul 酸化Ets轉(zhuǎn)錄因子家族e(cuò)ts1抗體Ingrin alpha E2 peptide 整合素alpha E2抗原250µl 酸化上皮細(xì)胞癌轉(zhuǎn)化蛋白2抗體Mac-1 (Mac-1/CR3/CD11b+CD18) 巨噬細(xì)胞表面分子抗原1 Kit 嗜酸性粒細(xì)胞過(guò)氧化物酶抗體Mafa(avian)(V-maf musculoaponeurotic fibrosarcoma oncogene homolog A) v-maf 肌腱膜纖維肉瘤癌基因同源物A抗原100 ul 核酸內(nèi)切酶G抗體MAGE-1 gen (Melanoma gen Recognized by T-cells 1) 黑色素瘤相關(guān)抗原100 ul 酪氨酸蛋白激酶受體A10抗體MAPKK1 (MAP kinase kinase 1) 絲裂原活化蛋白激酶激酶1抗原1 Kit |