產(chǎn)品名稱:禽嗜血桿菌PCR檢測試劑盒 英文名稱:Haemophilus gallinarum PCR 編號:HE31047-R 類別:PCR檢測試劑盒 儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。 運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。 產(chǎn)品僅用于科研注意事項:1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。 ? 反應(yīng)五要素: 參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則: ①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。 ②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。 ③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。 ④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。 ⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。 ⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。 ⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。 引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。 技術(shù)原理: DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動子的參與下,根據(jù)堿基互補(bǔ)配對原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。 在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實驗中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時也可以發(fā)生變性解鏈,當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性,并設(shè)計引物做啟動子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。( DNA高溫變性低溫復(fù)性) 產(chǎn)品僅用于科研發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個循環(huán)加酶,使PCR技術(shù)變得非常簡捷、同時也大大降低了成本,PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用,并逐步應(yīng)用于臨床。 儲需要自備的器材: 1.儀器:分析天平、離心機(jī)、熒光 PCR 擴(kuò)增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器(2 µL、20 µL、200 µL、1000 µL)。 2.耗材:熒光 PCR 反應(yīng)管、眼科剪、眼科鑷、鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯(DEPC)水 處理的滅菌離心管、吸頭(10 µL、200 µL、1000 µL)、滅菌雙蒸水。 特點: 1.即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡單,定量準(zhǔn)確快速。 2. 引物經(jīng)過優(yōu)化,特異性強(qiáng)。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長度為 560 bp。 3. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。 4. 提供陽性對照,便于分析試驗結(jié)果。 保存條件: 僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法 1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。 2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。 3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。 4. 組織勻漿:將組織加入適量鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。 5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。 磷酸氫鈉銨/磷酸鈉銨/磷酸氫銨鈉/磷酸銨鈉/Microcosmic salt tetrahydrate 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%,BR 包裝;5g 2-氨基-4-硝基甲苯/大紅色基G/大紅貝司/旗紅貝司/5-硝基鄰甲/2-甲基-5-硝基/旗紅色基G/大紅色基/2-amino-4-nitrotoluene 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 包裝;5g 鹽酸黃連素/鹽酸小檗堿/小檗堿鹽酸鹽/氯化黃連素/氯化小檗堿/黃苓苷/鹽酸小薜堿/黃蓮素鹽酸鹽/Berberine hydrochloride 質(zhì)量規(guī)格:>98%,分子生物學(xué)級 包裝;1g 鹽酸黃連素合物/鹽酸小檗堿合物/小檗堿鹽酸鹽合物/氯化黃連素合物/氯化小檗堿合物/Berberine chloride hydrate 質(zhì)量規(guī)格:>98%,sigma分裝 包裝;5g 苯并芘/苯并[a]芘/苯并[ghi]北/苯并二萘嵌苯/3,4-苯并芘/3,4-Benzopyrene 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 包裝;1g DL-甘油醛/ DL-2,3-二羥基丙醛/DL-丙醛糖/2,3-二羥基丙醛/丙醛糖/DL-Glyceraldehyde 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 包裝;5g 鄰乙氧基苯甲酰氯/2-乙氧基苯甲酰氯/2-Ethoxybenzoyl chloride 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR 包裝;250mg 吡啶甲酸鉻/吡啶羧酸鉻/2-吡啶甲酸鉻/甲基吡啶鉻/2-吡啶羧酸鉻鹽/吡啶甲酸鉻(III)/甲酸吡啶鉻/2-甲酸吡啶鉻(III)/Chromium picolinate 質(zhì)量規(guī)格:BC 包裝;100g 原花青素/2-(3,4-二羥基苯基)-2-((2-(3,4-二羥基苯基)-3,4-二氫-5,7-二羥基-2H-1-苯并吡喃-3-基)氧基)-3,4-二氫-2H-1-苯并吡喃-3,4,5,7-四醇/Procyanidin 質(zhì)量規(guī)格:70% in H2O 包裝;25g 葡萄籽提取物/Grape Seed Extract 質(zhì)量規(guī)格:>98.5% 包裝;100g 原花青素B2/原矢車菊素B2/Procyanidin B2 質(zhì)量規(guī)格:>99%,分子生物學(xué)級; 包裝;25g 4-氨基-1-甲基-3-正丙基-1H-吡唑-5-甲酰胺/4-氨基-1-甲基-3-正丙基-1H-吡唑-5-羧酰胺/4-Ami-methyl-3-n-propyl-5-pyrazolecarboxamide 質(zhì)量規(guī)格:>99%,進(jìn)分sigma 包裝;25g 棕櫚酸對酯/4-棕櫚酸酯/十六碳酸4-酯/4-基棕櫚酸酯/4-Nitrophenyl palmitate 質(zhì)量規(guī)格:>98% 包裝;5g 高溫油脂III/真空油脂III/阿匹松M/Grease of high temperature III 質(zhì)量規(guī)格:>98% 包裝;250g 胡椒堿/胡椒辣堿/(E,E)-1-[5-(1,3-苯并二氧戊環(huán)-5-基)-1-氧代-2,4-戊二烯基]-哌啶/1-(5-(1,3-苯并二氧代-5-基)-1-氧代-2,4-戊二烯基(-(E,E)-哌啶/胡椒酰胺/Piperine 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 包裝;100g 四丁基氟化銨/四正丁基氟化銨/氟化四丁基胺/氟化四丁銨/TBAF 質(zhì)量規(guī)格:>97%,進(jìn)分TCI A2215 包裝;25g 四丁基氟化銨三合物/四正丁基氟化銨三合物/四丁基氫氧化銨三物/四丁胺氟化物/TBAF trihydrate 質(zhì)量規(guī)格:≥98%,美國進(jìn)口 包裝;25g 禽嗜血桿菌PCR檢測試劑盒Streptomyces│griseoaurantiacus 中文名稱:灰橙鏈霉菌種屬:Streptomyces│griseoaurantiacus分離基物:土壤/近海紅樹林土壤提供形式:凍干物模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:可用于抗菌活性及抗腫瘤活性研究培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:12生長條件:28℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:97% Massilia│timonae 中文名稱:蒂莫內(nèi)馬賽菌種屬:Massilia│timonae分離基物:沉積物/深海沉積物提供形式:凍干物模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:耐鹽機(jī)制的研究培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471生長條件:37℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:99%(支鏈異構(gòu)體類的混合物總和) Nocardiopsis│dassonvillei 中文名稱:達(dá)氏擬諾卡氏菌種屬:Nocardiopsis│dassonvillei分離基物:沉積物/深海沉積物提供形式:凍干物模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:生物活性微生物/抗腫瘤活性培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:12生長條件:28℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:99%(支鏈異構(gòu)體類的混合物總和) Sphingopyxis│baekryungensis 中文名稱:查樸圖鞘氨醇盒菌種屬:Sphingopyxis│baekryungensis分離基物:樣/表層海提供形式:凍干物模式菌株:yes應(yīng)用領(lǐng)域:模式菌株:,用于分類學(xué)研究。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471生長條件:25℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:99%(支鏈異構(gòu)體類的混合物總和) Maribaculum│marinum 中文名稱:海洋海棒狀菌種屬:Maribaculum│marinum分離基物:樣/深海樣提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:芳烴萘,菲等降解菌,可用于生物修復(fù)。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471生長條件:28℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:98% Thalassospira│sp. 中文名稱:海旋菌種屬:Thalassospira│sp.分離基物:樣/表層海提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:潛在石油烴類降解菌/生物活性物質(zhì)篩選培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471生長條件:25℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:98% Oceanisphaera│donghaensis 中文名稱:東海大洋球形菌種屬:Oceanisphaera│donghaensis分離基物:樣/上層海提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:產(chǎn)酶微生物/木聚糖酶培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471生長條件:25℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:98% Algoriphagus│ornithinivorans 中文名稱:食鳥氨酸噬冷菌種屬:Algoriphagus│ornithinivorans分離基物:沉積物/深海沉積物提供形式:凍干物模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:抗重金屬砷,可用于抗砷機(jī)制的研究;可用于生物修復(fù)。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:745生長條件:18-28℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:D,99% |