實(shí)驗(yàn)外包: 1.基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學(xué)分析 2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片、LncRNA芯片、表達(dá)譜芯片、RNA-seq 3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM 4.基因檢測:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR 5.蛋白質(zhì)檢測:Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA 6.病理檢測:HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細(xì)胞分選 7.代謝組學(xué):GC-MS、LC-MS、NMR 8.細(xì)胞及動物模型:原代細(xì)胞、細(xì)胞模型、動物模型構(gòu)建 服務(wù)流程: 接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。 ? 產(chǎn)品名稱 | 豬霍亂病毒即PCR檢測試劑盒規(guī)格 ? | 英文名稱 | Hog Cholera Virus(CSFV)RTPCR | 貨號 | HE31092-R |
使用方法: 一、樣品 DNA 的制備 用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。 二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線(以 10-10E6 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。 1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號。 2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(用帶芯槍頭,下同)。 3. 產(chǎn)品僅用于科研先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。 4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。 5. 換槍頭,從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。 6. 換槍頭,從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中,重復(fù)上面的操作直到得到 6個(gè)稀釋度的陽性對照。7. NC 管中不加任何陽性對照。 8. 從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進(jìn)行定量 PCR(見下步),每個(gè)樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個(gè)陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對數(shù)值為橫軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。 PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟: 方法 1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5 μl dNTP mix (2mM) 4 μl 引物1(10pM) 2 μl 引物2(10pM) 2 μl Taq酶 (2U/μl) 1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。 2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。 3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。 特點(diǎn)優(yōu)勢: 1. 特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過TIANDZ及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達(dá)到100%。 2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。 3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。 4. 實(shí)用性:產(chǎn)品僅用于科研檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個(gè)檢測過程為3-4個(gè)小時(shí)。 5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除TIANDZ公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。 6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。 Littman瓊脂/Littman Agar 包裝;5g DG-18瓊脂/Dichloranglycerol Agar 包裝;5g YM瓊脂/YM Agar 包裝;5mg YM肉湯/YM Broth 包裝;100g YM11瓊脂/YM11 Agar 包裝;25g OGY瓊脂/土霉素葡萄糖酵母粉瓊脂基礎(chǔ)/OGY Agar 包裝;5g WL營養(yǎng)瓊脂/華倫斯坦實(shí)驗(yàn)室營養(yǎng)瓊脂/WL Nutrient Agar 包裝;100g 沙氏BHI瓊脂/沙氏腦心浸液瓊脂/Sabouraud BHI Agar 包裝;1g 菌種培養(yǎng)基/Strain Medium(For B.Cerus) 包裝;25g 四環(huán)素檢定瓊脂/Tetracyline Examination Agar 包裝;5g 亞硫酸鹽瓊脂/Sulfite Agar 包裝;100ml 葡萄糖胰蛋白胨瓊脂/葡萄糖胰酪胨瓊脂/DTA培養(yǎng)基/Dextrose Tryptone Agar 包裝;500ml 改良亞硫酸鹽瓊脂/Sulfite Agar Modified 包裝;100mg 甘露醇卵黃多粘菌素瓊脂基礎(chǔ)/MYP瓊脂基礎(chǔ)/MYP agar base 包裝;1g 亞硫酸鹽多粘菌素磺胺嘧啶瓊脂基礎(chǔ)/SPS瓊脂/SPS Agar 包裝;5g 改良MC培養(yǎng)基/改良MC乳酸菌瓊脂培養(yǎng)基/改良CHALMERS培養(yǎng)基/Chalmers Agar Modified 包裝;1g MRS瓊脂基礎(chǔ)/MRS瓊脂/MRS乳酸菌瓊脂/MRSA 包裝;250mg 豬霍亂病毒即PCR檢測試劑盒規(guī)格 Acinetobacter woffii 中文名稱:魯氏不動桿菌種屬:Acinetobacter woffii提供形式:凍干物安全等級:2模式菌株:yes應(yīng)用領(lǐng)域:模式菌株:培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:腦心浸液(BHIA):牛腦浸粉 4.0g,牛心浸粉 4.0g,蛋白胨 5.0g,酪蛋白胨16.0g,NaCl 5.0g,葡萄糖 2.0g,磷酸氫二鈉 2.5g,pH7.4 ± 0.2。121℃,15min。生長條件:28℃,好氧,24h存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:98% Pseudomonas│sp. 中文名稱:假單胞菌種屬:Pseudomonas│sp.分離基物:土壤提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:在無機(jī)鹽培養(yǎng)基:中以100mg/L的鄰苯二酚為碳源培養(yǎng),3天內(nèi)降解率大于90%培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:33生長條件:30℃ 純度:98% Arthrobacter│sp. 中文名稱:節(jié)桿菌種屬:Arthrobacter│sp.分離基物:廢排污口土壤和廢混合物提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:用于阿特拉津農(nóng)藥廢處理及受污染土壤的生物修復(fù)培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:858生長條件:30℃存儲條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:98% Nocardioides│sp. 中文名稱:類諾卡氏菌種屬:Nocardioides│sp.分離基物:土壤提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:820生長條件:30℃存儲條件:真空冷凍干燥法 純度:98% Escherichia│sp. 中文名稱:埃希氏菌種屬:Escherichia│sp.提供形式:凍干物安全等級:2模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:致病大腸桿菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:2生長條件:28℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:98% Sphingobacterium│sp. 中文名稱:鞘氨醇桿菌種屬:Sphingobacterium│sp.分離基物:河提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:異養(yǎng)反硝化培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:2生長條件:30℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:98% Methylobacterium│sp. 中文名稱:甲基桿菌種屬:Methylobacterium│sp.提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:794生長條件:28-30℃存儲條件:真空冷凍干燥法 純度:98% Ensifer│adhaerens 中文名稱:粘著劍菌種屬:Ensifer│adhaerens分離基物:土壤提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:分類;研究;教學(xué)培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:832生長條件:30℃存儲條件:真空冷凍干燥法 純度:98% |