產(chǎn)品僅用于科研注意事項:1.基礎(chǔ)程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動力學;8.PCR擴增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。 產(chǎn)品名稱:羊闊盤吸蟲PCR檢測試劑盒規(guī)格 英文名稱:Eurytrema ovisPCR 編號:HE30976-R 類別:PCR檢測試劑盒 儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。 運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。 ? 儲需要自備的器材: 1.儀器:分析天平、離心機、熒光 PCR 擴增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器(2 µL、20 µL、200 µL、1000 µL)。 2.耗材:熒光 PCR 反應(yīng)管、眼科剪、眼科鑷、鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯(DEPC)水 處理的滅菌離心管、吸頭(10 µL、200 µL、1000 µL)、滅菌雙蒸水。 特點: 1.即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡單,定量準確快速。 2. 引物經(jīng)過優(yōu)化,特異性強。預期的 PCR 產(chǎn)物長度為 560 bp。 3. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。 4. 提供陽性對照,便于分析試驗結(jié)果。 保存條件: 僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法 1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。 2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。 3. 細胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。 4. 組織勻漿:將組織加入適量鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。 5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。 1,5-萘二磺酸四物/阿姆斯特朗酸/萘-1,5-二磺酸/天藍酸/2-萘胺-1,5-二磺酸/磺化吐氏酸/L酸/1,5-Naphthalene disulfonic acid 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) 包裝;10MG 1,5-萘二磺酸鈉/1,5-萘二磺酸二鈉鹽/萘-1,5-二磺酸鈉鹽/Sodium 1,5-naphthalenedisulfonate dibasic 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) 包裝;25g 2-萘胺-1-磺酸/托拜厄斯酸/2-氨基萘-1-磺酸/2-氨基-1-萘磺酸/脫拜厄斯酸/吐氏酸/2-Naphthylamine-1-sulfonic acid 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) 包裝;5g 甲基磺酸/甲磺酸/甲烷磺酸/MSA 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) 包裝;1g 甲基磺酸乙酯/甲烷磺酸乙酯/甲磺酸乙酯/EMS 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) 包裝;5g 甲基磺酸甲酯/甲烷磺酸甲酯/甲基甲烷磺酸酯/甲磺酸甲酯/MMS 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)(T) 包裝;1g 庚烷磺酸鈉/1-庚烷磺酸鈉/庚烷-1-磺酸鈉鹽/正庚基磺酸鈉鹽/正庚烷磺酸鈉/Sodium 1-heptanesulfonate 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) 包裝;5g 戊烷磺酸鈉/1-戊烷磺酸鈉/戊烷-1-磺酸鈉鹽/正戊烷磺酸鈉/戊基磺酸鈉/Sodium 1-pentanesulfonate 質(zhì)量規(guī)格:>96.0%(GC) 包裝;1g 己烷磺酸鈉/1-己烷磺酸鈉/己烷-1-磺酸鈉鹽/Sodium 1-hexanesulfonate 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(GC) 包裝;25g 辛烷磺酸鈉/1-辛烷磺酸鈉/1-辛基磺酸鈉/辛烷基磺酸鈉/正辛烷磺酸鈉/Sodium 1-octanesulfonate 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(T) 包裝;5g 丁烷磺酸鈉/1-丁烷磺酸鈉/丁烷-1-磺酸鈉鹽/1-丁基磺酸鈉/正丁烷磺酸鈉/Sodium 1-butanesulfonate 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(HPLC)(T) 包裝;25g 癸烷磺酸鈉/1-癸烷磺酸鈉/十烷磺酸鈉/十烷基磺酸鈉/正癸磺酸鈉鹽/正癸基磺酸鈉/Sodium 1-decanesulfonate 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)(T) 包裝;5g 1-氨基-8-萘酚-3,6-二磺酸鈉/H酸單鈉鹽/4-氨基-5-羥基-2,7-萘二磺酸一鈉/H酸一鈉鹽/1-氨基-8-萘酚-3,6-二磺酸單鈉鹽/H-酸鈉鹽/8-氨基-1-萘酚-3,6-二磺酸單鈉鹽/H acid monosodium salt 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) 包裝;1g 氨基磺酸鎳/磺酰胺酸鎳/Nickel sulfamate 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)(T) 包裝;25g 蒽醌-2-磺酸鈉/銀鹽/蒽喹啉-2-磺酸鈉鹽/9,10-蒽醌-2-磺酸鈉鹽/Anthraquinone-2-sulfonic acid sodium salt monohydrate 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)(T) 包裝;5g 3-磺酸鈉/間磺酸鈉/坊染鹽S/防染鹽S/M-磺酸鈉/3-Nitrobenzene sulfonic acid sodium salt 質(zhì)量規(guī)格:>93.0%(GC) 包裝;100g 苯亞磺酸鈉/Benzenesulfinic acid sodium salt 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)(T) 包裝;25g 羊闊盤吸蟲PCR檢測試劑盒規(guī)格 Staphylococcus epidermidis 中文名稱:表皮葡萄球菌種屬:Staphylococcus epidermidis提供形式:凍干管、試管斜面安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:研究;教學;分類。檢定慶大霉素效價,《GB 4789.28 培養(yǎng)基:和試劑的質(zhì)量要求》標準菌株。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:營養(yǎng)瓊脂: 3.0g,蛋白胨 10.0g,NaCl 5.0g,瓊脂 20.0g,蒸餾 1.0L,pH 7.0。121℃,15min滅菌。生長條件:37℃,好氧。生長特性革蘭氏染色陽性。細胞球狀,直徑0.5-1.5μm。單個、成對排列及具特征性的多于一個平面分裂,形成不規(guī)則的堆團。不運動。細胞壁含有兩種主要成分:肽聚糖和與它相的磷壁質(zhì)?;墚愷B(yǎng)菌,呼吸代謝和發(fā)酵代謝。產(chǎn)生觸酶。產(chǎn)生細胞外酶和毒素。兼性厭氧。適生長溫度為35-40℃。主要與皮膚、皮膚腺體和溫血動物的粘膜有,寄主范圍廣泛。潛在的致病菌。存儲條件:4℃,避光冷藏 純度:98%,含500ppm氫醌單甲醚MEHQ穩(wěn)定劑 Streptomyces│venezuelae 中文名稱:委內(nèi)瑞拉鏈霉菌種屬:Streptomyces│venezuelae提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:產(chǎn)生Chloramphenicol氯霉素培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0012生長條件:28C存儲條件:真空冷凍干燥 純度:98%,含500ppm氫醌單甲醚MEHQ穩(wěn)定劑 Micrococcus luteus 中文名稱:藤黃微球菌種屬:Micrococcus luteus提供形式:凍干管、試管斜面安全等級:2模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:研究;教學;分類??股匦r測定?!吨腥A人民共和國藥典》抗生素微生物檢定法。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:營養(yǎng)肉汁瓊脂:蛋白胨 5.0g,牛肉浸取物 3.0g,NaCl 5.0g,瓊脂 15.0g,蒸餾 1.0L,pH7.0。生長條件:37℃,好氧生長特性革蘭氏陽性;球狀,成堆或四聯(lián)排列,直徑1.0-2.0μm、不生芽孢;菌落呈黃色,不透明,有光澤,邊緣較圓整,表面光滑,化能異養(yǎng)菌,代謝為嚴格的呼吸型。產(chǎn)生觸媒。好氧。存儲條件:4℃,避光冷藏 純度:97% Streptomyces│lavendulae 中文名稱:淡紫灰鏈霉菌種屬:Streptomyces│lavendulae提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0039生長條件:28C存儲條件:真空冷凍干燥 純度:97% Campylobacter│jejuni 中文名稱:空腸彎曲桿菌種屬:Campylobacter│jejuni分離基物:雞盲腸提供形式:凍結(jié)物安全等級:2模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:科研教學培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:0生長條件:42存儲條件:真空冷凍干燥法; 純度:97% Micromonospora│inyoensis var. dengjiangensis 中文名稱:伊尼奧小單孢菌澄江變種種屬:Micromonospora│inyoensis var. dengjiangensis提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:產(chǎn)生Sisomicin(西梭米星)培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0012生長條件:35-37C存儲條件:真空冷凍干燥 純度:98% Micromonospora│inyoensis 中文名稱:伊紐小單孢菌種屬:Micromonospora│inyoensis提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:產(chǎn)生Sisomycin紫蘇霉素培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0271生長條件:28C存儲條件:真空冷凍干燥 純度:98% Streptomyces│paradoxus 中文名稱:意外鏈霉菌種屬:Streptomyces│paradoxus分離基物:土壤提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:抗草分枝桿菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0027生長條件:28C存儲條件:真空冷凍干燥 純度:97% 反應(yīng)五要素: 參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則: ①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。 ②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。 ③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。 ④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。 ⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個堿基,應(yīng)嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。 ⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。 ⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。 引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。 技術(shù)原理: DNA的半保留復制是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動子的參與下,根據(jù)堿基互補配對原則復制成同樣的兩分子挎貝。 在聚合酶鏈式反應(yīng)實驗中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時也可以發(fā)生變性解鏈,當溫度降低后又可以復性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復性,并設(shè)計引物做啟動子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復制。( DNA高溫變性低溫復性) 產(chǎn)品僅用于科研發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個循環(huán)加酶,使PCR技術(shù)變得非常簡捷、同時也大大降低了成本,PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用,并逐步應(yīng)用于臨床。 |