產(chǎn)品僅用于科研注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產(chǎn)物;9.PCR反應體系與反應條件。 產(chǎn)品名稱:彎曲桿菌PCR檢測試劑盒說明書 英文名稱:Campylobacter spp.PCR 編號:HE30773-R 類別:PCR檢測試劑盒 儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。 運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。 ? 儲需要自備的器材: 1.儀器:分析天平、離心機、熒光 PCR 擴增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器(2 µL、20 µL、200 µL、1000 µL)。 2.耗材:熒光 PCR 反應管、眼科剪、眼科鑷、鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯(DEPC)水 處理的滅菌離心管、吸頭(10 µL、200 µL、1000 µL)、滅菌雙蒸水。 特點: 1.即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡單,定量準確快速。 2. 引物經(jīng)過優(yōu)化,特異性強。預期的 PCR 產(chǎn)物長度為 560 bp。 3. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。 4. 提供陽性對照,便于分析試驗結(jié)果。 保存條件: 僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法 1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。 2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。 3. 細胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。 4. 組織勻漿:將組織加入適量鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。 5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。 沙苑子苷 COMPLANATUSIDE(P) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 包裝;5g 輔酶 Q10 COENZYME Q10(Synthetic)(P) 質(zhì)量規(guī)格:0.98 包裝;10g 輔酶 Q10 COENZYME Q10(Synthetic)(P) 質(zhì)量規(guī)格:0.98 包裝;50g 輔酶 Q10 COENZYME Q10(Synthetic)(P) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 包裝;100g 秋仙素 COLCHICINE(RG) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 包裝;25g 秋仙素 COLCHICINE(RG) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 包裝;500g 輔酶 Q10 COENZYME Q10(Natural)(P) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 包裝;1g 輔酶 Q10 COENZYME Q10(Natural)(P) 質(zhì)量規(guī)格:0.98 包裝;25g 輔酶 Q10 COENZYME Q10(Natural)(P) 質(zhì)量規(guī)格:>98% 包裝;5g 苦毒漿果 COCCULIN(SEE PICROTOXIN)(RG) 質(zhì)量規(guī)格:0.98 包裝;100ml 輔酶 B12/腺苷鈷胺 ADENOSYLCOBALAMINE(COENZYME B12)(P) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 包裝;500ml 輔酶 B12/腺苷鈷胺 ADENOSYLCOBALAMINE(COENZYME B12)(P) 質(zhì)量規(guī)格:0.98 包裝;100g 輔酶 B12/腺苷鈷胺 ADENOSYLCOBALAMINE(COENZYME B12)(P) 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 包裝;25g 輔酶 B12/腺苷鈷胺 ADENOSYLCOBALAMINE(COENZYME B12)(P) 質(zhì)量規(guī)格:0.98 包裝;25g CONYRIN(RG) 質(zhì)量規(guī)格:0.98 包裝;5g 鈴蘭毒苷 CONVALLATOXIN(P) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 包裝;5MG 鈴蘭毒苷 CONVALLATOXIN(RG) 質(zhì)量規(guī)格:0.98 包裝;1g 彎曲桿菌PCR檢測試劑盒說明書Claviceps│purpurea (Fr.) Tul. 中文名稱:麥角種屬:Claviceps│purpurea (Fr.) Tul.提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長條件:25存儲條件:定期移植法 純度:97% Leucopaxillus│giganteus (Sowerby) Singer 中文名稱:*大白樁菇種屬:Leucopaxillus│giganteus (Sowerby) Singer提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長條件:25存儲條件:定期移植法 純度:97% Pleurotus│ostreatus (Jacq.) P. Kumm. 中文名稱:黑平185種屬:Pleurotus│ostreatus (Jacq.) P. Kumm.提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長條件:25存儲條件:定期移植法 純度:97% Trametes│robiniophila Murrill 中文名稱:槐栓菌種屬:Trametes│robiniophila Murrill提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長條件:25存儲條件:定期移植法 純度:99% Phoma exigua var. exigua Sacc. 中文名稱:小豆殼二胞種屬:Phoma exigua var. exigua Sacc.分離基物:菜豆。葉片寄主名稱:蕓豆。致病對象:植物。采集地:山東省萊陽市。提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:綜合PDA:馬鈴薯煮汁1000mL,磷酸二氫鉀 3g,硫酸鎂 1.5g,葡萄糖 20g,維生素B1 10mg,瓊脂 20g,pH自然。馬鈴薯煮液:200g馬鈴薯,去皮,切塊,放入蒸餾中煮沸30min,取濾液定容至1000mL,備用。121℃,15min。生長條件:26--30,好氧生長特斑生于葉上,近圓形,褐色,邊緣紅褐色,容易破裂,直徑5~35mm,具明顯輪紋,發(fā)生嚴重時葉片早期脫落,上輪生褐色小點(分生孢子器);分生孢子器葉面生,散生或聚生,初埋生,后突破表皮,孔口外露,球形,扁球形,直徑80~140um,高70~125um;器壁膜質(zhì),淺褐色,由數(shù)層細胞組成,壁厚9~11um,內(nèi)壁無色,形成產(chǎn)孢細胞,上生分生孢子;孔口圓形,薄壁加厚,深褐色,居中;產(chǎn)孢細胞瓶形,單胞,無色,5~7x1.5~2um;分生孢子圓柱形,兩端鈍圓,無色,初為單胞,后中央生一隔膜,無縊縮或稍縊縮,正直或微彎,存儲條件:定期移植法 純度:99% Bacillus│mucilaginosus Avakyan et al 1998 中文名稱:#膠質(zhì)芽孢桿菌種屬:Bacillus│mucilaginosus Avakyan et al 1998分離基物:杉木林土壤提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:63生長條件:30存儲條件:定期移植法 純度:99% Rhizoctonia│cerealis E. P. Hoeven 中文名稱:禾谷絲核菌種屬:Rhizoctonia│cerealis E. P. Hoeven分離基物:葉鞘提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長條件:24-27存儲條件:定期移植法 純度:99% Agaricus blazei Murrill 中文名稱:姬松茸(斜面)種屬:Agaricus blazei Murrill提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:綜合PDA:20%馬鈴薯汁1L,葡萄糖20g ,KH2PO4 3g, MgSO4.7H2O 1.5g,硫胺素微量,瓊脂 15g,pH 自然。生長條件:25-28℃,好氧。存儲條件:定期移植法 純度:99% 反應五要素: 參加PCR反應的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則: ①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。 ②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。 ③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。 ④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。 ⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。 ⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。 ⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。 引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。 技術原理: DNA的半保留復制是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動子的參與下,根據(jù)堿基互補配對原則復制成同樣的兩分子挎貝。 在聚合酶鏈式反應實驗中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時也可以發(fā)生變性解鏈,當溫度降低后又可以復性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復性,并設計引物做啟動子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復制。( DNA高溫變性低溫復性) 產(chǎn)品僅用于科研發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個循環(huán)加酶,使PCR技術變得非常簡捷、同時也大大降低了成本,PCR技術得以大量應用,并逐步應用于臨床。 |