產(chǎn)品名稱:茄病鐮刀菌PCR檢測試劑盒說明書 英文名稱:Fusarium solaniPCR 編號:HE31013-R 類別:PCR檢測試劑盒 儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。 運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。 產(chǎn)品僅用于科研注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產(chǎn)物;9.PCR反應體系與反應條件。 ? 反應五要素: 參加PCR反應的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則: ①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。 ②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。 ③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。 ④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。 ⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。 ⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。 ⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。 引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。 技術原理: DNA的半保留復制是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動子的參與下,根據(jù)堿基互補配對原則復制成同樣的兩分子挎貝。 在聚合酶鏈式反應實驗中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時也可以發(fā)生變性解鏈,當溫度降低后又可以復性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復性,并設計引物做啟動子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復制。( DNA高溫變性低溫復性) 產(chǎn)品僅用于科研發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個循環(huán)加酶,使PCR技術變得非常簡捷、同時也大大降低了成本,PCR技術得以大量應用,并逐步應用于臨床。 儲需要自備的器材: 1.儀器:分析天平、離心機、熒光 PCR 擴增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器(2 µL、20 µL、200 µL、1000 µL)。 2.耗材:熒光 PCR 反應管、眼科剪、眼科鑷、鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯(DEPC)水 處理的滅菌離心管、吸頭(10 µL、200 µL、1000 µL)、滅菌雙蒸水。 特點: 1.即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡單,定量準確快速。 2. 引物經(jīng)過優(yōu)化,特異性強。預期的 PCR 產(chǎn)物長度為 560 bp。 3. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。 4. 提供陽性對照,便于分析試驗結果。 保存條件: 僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法 1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000 轉離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。 2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉離心30 分鐘取上清。 3. 細胞上清液:3000 轉離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。 4. 組織勻漿:將組織加入適量鹽水搗碎。3000 轉離心10 分鐘取上清。 5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。 鈷粉/鈷/Cobalt 質(zhì)量規(guī)格:分析標準品,≥99.5%(GC) 包裝;100g 硝酸鈷/硝酸亞鈷/硝酸鈷/硝酸鈷(II)/Cobaltous nitrate hexahydrate 質(zhì)量規(guī)格:分析標準品 包裝;25g 硫酸鈷/硫酸亞鈷/七硫酸鈷/赤礬/硫酸鈷(II)七合物/Cobalt sulfate heptahydrate 質(zhì)量規(guī)格:分析標準品 包裝;5g 無硫酸鈷/無硫酸亞鈷/Cobaltous sulfate 質(zhì)量規(guī)格:分析標準品,>99.5%(GC) 包裝;1g 碳酸鈷/堿式碳酸鈷/碳酸亞鈷/碳酸鈷(II)/Coblltous carbonate 質(zhì)量規(guī)格:分析標準品,≥99.5%(GC) 包裝;5g 四氧化三鈷/氧化鈷/一氧化鈷合三氧化二鈷/四氧化三鈷(II,III)/Cobalt(II,III) oxide 質(zhì)量規(guī)格:分析標準品,≥99.8%(GC) 包裝;100g 三氧化二鈷/氧化高鈷/黑色氧化鈷/氧化鈷(Ⅲ)/Cobalt(III) oxide 質(zhì)量規(guī)格:分析標準品,≥99.5% (GC) 包裝;25g 乙酸鈷/乙酸亞鈷/醋酸亞鈷/醋酸鈷/四合乙酸鈷/乙酸鈷(II)四合物/Cobaltous acetate tetrahydrate 質(zhì)量規(guī)格:分析標準品,≥99.8%(GC) 包裝;5g 草酸鈷/乙二酸亞鈷/草酸亞鈷/Cobaltous oxalate dihydrate 質(zhì)量規(guī)格:分析標準品,>99.5%(GC) 包裝;1g 羥基脲/羥基尿素/氨基甲?;u胺/氨甲酰羥基胺/N-羥基脲/Hydroxyurea 質(zhì)量規(guī)格:Standard for GC,≥99.5%(GC) 包裝;25g 硫脲/硫代尿素/異硫脲/硫尿素/硫代碳酰二胺/Thiourea 質(zhì)量規(guī)格:Standard for GC,≥99.5%(GC) 包裝;5g 四氧嘧啶/阿脲一合物/中草酸二酰脲/二酰脲/1,3-二氮四羰六環(huán)/2-氧代丙二酰脲/二氮-(1,3)六環(huán)四酮/1,3-二氮六環(huán)四酮/Alloxan monohydrate 質(zhì)量規(guī)格:Standard for GC,≥99%(GC) 包裝;1g 縮二脲/氨縮脲/氨基甲酰脲/亞氨基二碳酸二酰胺/雙縮脲/二縮脲/Biuret 質(zhì)量規(guī)格:Standard for GC, ≥98.5% (GC) 包裝;5g 烯丙基硫脲/丙基硫脲/1-烯丙基-2-硫脲/N-烯丙基硫脲/硫代芥子油/硫代芥子胺/基硫脲/基脲/阿利硫脲/Allyl thiourea 質(zhì)量規(guī)格:standard for GC,≥99%(GC) 包裝;1g 鹽酸-S-芐基異硫脲/芐基異硫脲鹽酸鹽/磺酸試劑/S-芐基異硫脲鹽酸鹽/S-芐基氯化異硫脲/ S-芐基硫脲鹽酸鹽/S-Benzylthiuronium chloride 質(zhì)量規(guī)格:standard for GC,≥99.5%(GC) 包裝;5g 對稱二苯硫脲/N,N-二苯基硫脲/S-二苯基硫脲/二苯硫脲/N,N'-對稱二苯基硫脲/二苯基硫脲/均二苯硫脲/促進劑CA/二基甲硫酮/硫化促進劑DPTU/硫代對稱二苯脲/Thiocarbanilide 質(zhì)量規(guī)格:Standard for GC ,≥99.5%(GC) 包裝;25g 2-萘基硫脲/β-萘硫脲/2-Naphthylthiourea 質(zhì)量規(guī)格:Standard for GC,≥99.5%(GC) 包裝;5g 茄病鐮刀菌PCR檢測試劑盒說明書Idiomarina│insulisalsae 中文名稱:鹽島海源菌種屬:Idiomarina│insulisalsae分離基物:土樣/鹽場土樣提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:yes應用領域:模式菌株:培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471生長條件:28℃存儲條件:液氮超低溫凍結法;-80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法 純度:99% Cohaesibacter│gelatinilyticus 中文名稱:解明膠粘聚桿菌種屬:Cohaesibacter│gelatinilyticus分離基物:樣/海提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:yes應用領域:模式菌株:培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471生長條件:28℃存儲條件:液氮超低溫凍結法;-80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法 純度:98% Serinicoccus│sp. 中文名稱:絲氨酸球菌種屬:Serinicoccus│sp.分離基物:沉積物/重力活塞上層取樣提供形式:凍干物模式菌株:no應用領域:海洋放線菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471生長條件:28℃存儲條件:液氮超低溫凍結法;-80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法 純度:98% Agromyces│indicus 中文名稱:農(nóng)霉菌(加詞待譯)種屬:Agromyces│indicus分離基物:沉積物/多管樣品提供形式:凍干物模式菌株:no應用領域:海洋放線菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471生長條件:28℃存儲條件:液氮超低溫凍結法;-80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法 純度:≥98% Microbacterium│lindanitolerans 中文名稱:耐林丹微桿菌種屬:Microbacterium│lindanitolerans分離基物:沉積物/重力活塞取樣提供形式:凍干物模式菌株:no應用領域:海洋放線菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471生長條件:28℃存儲條件:液氮超低溫凍結法;-80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法 純度:99.9% metals basis Brachybacterium│faecium 中文名稱:糞小短桿菌種屬:Brachybacterium│faecium分離基物:其他/家禽褥草(poultry deep litter )提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:yes應用領域:模式菌株:培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:221生長條件:28-30℃存儲條件:液氮超低溫凍結法;-80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法 純度:99.9% metals basis Nesterenkonia│halobia 中文名稱:喜鹽涅斯特連科氏菌種屬:Nesterenkonia│halobia分離基物:其他/未精煉的(unrefined)日曬鹽提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:yes應用領域:模式菌株:培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:221生長條件:28-30存儲條件:液氮超低溫凍結法;-80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法 純度:99.9% metals basis Janibacter│sp. 中文名稱:兩面神菌種屬:Janibacter│sp.分離基物:沉積物/TVG沉積物提供形式:凍干物模式菌株:no應用領域:海洋放線菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471生長條件:28℃-30&存儲條件:液氮超低溫凍結法;-80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法 純度:99% |