特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途! 產(chǎn)品名稱 | 犬小孢子菌探針法熒光PCR檢測試劑盒 | 英文名稱 | Microsporum canis | 貨號 | YSP96917 |
熒光染料的優(yōu)點: 產(chǎn)品僅用于科研使用簡便; 可以與任何PCR產(chǎn)物結(jié)合; 價格便宜; 熒光染料的缺點: 不能區(qū)分不同的雙鏈DNA 引物二聚體會影響檢測的敏感性 非特異性產(chǎn)物會影響結(jié)果的敏感性 引物二聚體和非特異性擴增問題可以通過熔解曲線 (Melting curve) 進行識別,進而通過PCR引物的設(shè)計和反應(yīng)條件的優(yōu)化得以解決??偟膩碚f,SYBR Green I方法是一種基礎(chǔ)也的Real-time qPCR實驗手段。 ? 熒光探針: Real-e qPCR中的熒光探針為TaqMan探針,其基本原理是依據(jù)目的基因設(shè)計合成一個能夠與之特異性雜交的探針,該探針的5'端標記熒光基團,3'端標記淬滅基團。 正常情況下兩個基團的空間距離很近,熒光基因因淬滅而不能發(fā)出熒光。PCR擴增時,引物與該探針同時結(jié)合到模板上,探針的結(jié)合位置位于上下游引物之間。 當擴增延伸到探針結(jié)合的位置時,Taq酶利用5'外切酶活性,將探針5'端連接的熒光分子從探針上切割下來,從而使其發(fā)出熒光。檢測到的熒光分子數(shù)與PCR產(chǎn)物的數(shù)量成正比,因此,根據(jù)PCR反應(yīng)體系中的熒光強度即可計算出初始DNA模板的數(shù)量。 TaqMan探針技術(shù)解決了熒光染料與非特異性擴增結(jié)合的問題,反應(yīng)結(jié)束后無需通過熔解曲線檢測,縮短了實驗時間。 TaqMan探針技術(shù)的優(yōu)點: 熒光背景低; 敏感性高; 雜交穩(wěn)定性高; 熒光光譜分辨率好; 特異性高。 TaqMan探針技術(shù)的缺點: 成本高; 設(shè)計難度大; 只能用于檢測產(chǎn)物長度低于150bp的反應(yīng)。 由于TaqMan探針的高特異性,可用于等位基因的辨別,特別適用于人類基因多態(tài)性以及根據(jù)SNP區(qū)別和定量菌株。 PCR技術(shù)的定量原理: 擴增曲線 在Real- qPCR中,對整個PCR反應(yīng)擴增過程進行了實時的檢測并記錄其熒光信號,隨著反應(yīng)的進行,監(jiān)測到的熒光信號可以繪制成一條曲線,即為擴增曲線。熒光擴增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺期。 在Real-time qPCR擴增早期,擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋,無法判斷產(chǎn)物量的變化,此時即為基線期。 PCR反應(yīng)過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的,隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加,終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板,從而進入“平臺期”。在該時期,擴增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加,PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關(guān)系,所以根據(jù)終的PCR產(chǎn)物量不能計算出初始模板量。 ? 熒光定量PCR原理: 產(chǎn)品僅用于科研熒光定量PCR早稱TaqMan PCR,后來也叫Real-Time PCR,是美國PE(Perkin Elmer)公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術(shù)。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標記探針或相應(yīng)的熒光染料來實現(xiàn)其定量功能的。其原理:隨著PCR反應(yīng)的進行,PCR反應(yīng)產(chǎn)物不斷累計,熒光信號強度也等比例增加。每經(jīng)過一個循環(huán),收集一個熒光強度信號,這樣我們就可以通過熒光強度變化監(jiān)測產(chǎn)物量的變化,從而得到一條熒光擴增曲線圖。 一般而言,熒光擴增曲線可以分成三個階段:熒光背景信號階段,熒光信號指數(shù)擴增階段和平臺期。在熒光背景信號階段,擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋,無法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺期,擴增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加,PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒有線性關(guān)系,根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號指數(shù)擴增階段, PCR產(chǎn)物量的對數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系,我們可以選擇在這個階段進行定量分析。為了定量和比較的方便,在實時熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個非常重要的概念:熒光閾值和 CT值。 大鼠抗促甲狀腺素受體抗體(TRAb)ELISA試劑盒英文名稱:Rat thyroid stimulating hormone receptor antidoby,TRAb ELISA Kit進口/分裝 ER- Beta (Estrogen receptor-beta) peptide 雌激素受體β抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg 蛇毒巴曲酶抗體 Anti-Batroxobin 0.1ml Rhesus antibody Rh phospho-EGFR (Ser967) 酸化表皮生長因子受體抗體 規(guī)格 0.1ml M199 10×1L Gibco ZNF131 英文名稱: 鋅指蛋白131抗體 0.2ml Dnmt1 英文名稱: DNA甲基轉(zhuǎn)移酶1抗體 0.1ml BRAF35 英文名稱: 癌易感基因2相關(guān)蛋白抗體 0.2ml Anti-PSAP/PAP 前列腺酸性酸酶抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml NGF 大鼠神經(jīng)生長因子Multi-class antibodies規(guī)格: 48T Anti-EpCAM/CD326 上皮細胞粘附分子抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml Rhesus antibody Rh MuRF1/Trim63 肌肉細胞特異性泛素蛋白連接酶1抗體 規(guī)格 0.1ml EL(Human EuglobulinLysis) ELISA Kit 人優(yōu)球蛋白 96T SLC14A2 英文名稱: 尿素轉(zhuǎn)運型糖蛋白A2抗體 0.2ml 酸鹽葡萄糖蛋白胨水培養(yǎng)基250克Phosphate Glucose Peptone Water用于甲基紅試驗 KORSER氏檸檬酸鹽肉湯100克Korser Citrate Sodium Broth用于細菌的枸櫞酸鹽試驗 結(jié)晶紫中性紅膽鹽瓊脂250克VRBA用于大腸菌群的檢驗 SA瓊脂250克Salmonella Arizona Agar亞利桑那沙門氏菌的選擇性分離 疊氮鈉葡萄糖肉湯250克Azide Dextrose Broth鏈球菌、腸球菌、糞鏈球菌的增菌培養(yǎng) KF鏈球菌瓊脂100克KF Streptococcus Agar鏈球菌的選擇性分離和計數(shù) 犬小孢子菌探針法熒光PCR檢測試劑盒中心體蛋白135抗體Ntn1/FITC 熒光素標記軸突導(dǎo)向因子1抗體IgG20 ul 半胱酸蛋白酶蛋白-7抗體NT-3/FITC 熒光素標記神經(jīng)營養(yǎng)因子-3抗體IgG100 ul 鈣調(diào)節(jié)素抗體(鈣調(diào)蛋白/鈣調(diào)素)NT-4/NT-5 /FITC 熒光素標記神經(jīng)生長因子4/5抗體IgG100 ul 1號染色體開放閱讀框181抗體NTCP/FITC 熒光素標記鈉離子/?;悄懰峁厕D(zhuǎn)運蛋白IgG100 ul Ⅰ型補體受體抗體(C3b/C4b受體抗體)NTN/FITC 熒光素標記神經(jīng)生長因子抗體IgG100 ul 8型膠原/內(nèi)皮膠原蛋白抗體Nurr1/FITC 熒光素標記核受體相關(guān)因子-1抗體IgG100 ul 結(jié)合轉(zhuǎn)化激活因子CID1抗體Nur77/GFRP/FITC 熒光素標記孤兒核受體蛋白Nur77抗體IgG100 ul 細胞色素P450 2C9抗體Phospho-Nur77 (Ser351) /FITC 熒光素標記酸化孤兒核受體蛋白Nur77抗體IgG100 ul 細胞色素P450 2D6抗體OAS1/FITC 熒光素標記寡腺苷酸合成酶-1抗體IgG20 ul |