實(shí)驗(yàn)外包: 1.基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學(xué)分析 2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片、LncRNA芯片、表達(dá)譜芯片、RNA-seq 3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM 4.基因檢測:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR 5.蛋白質(zhì)檢測:Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA 6.病理檢測:HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細(xì)胞分選 7.代謝組學(xué):GC-MS、LC-MS、NMR 8.細(xì)胞及動(dòng)物模型:原代細(xì)胞、細(xì)胞模型、動(dòng)物模型構(gòu)建 服務(wù)流程: 接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。 ? 產(chǎn)品名稱 | 反芻獸考德里氏體PCR檢測試劑盒說明書 | 英文名稱 | Cowdria ruminantiumPCR | 貨號 | HE30857-R |
使用方法: 一、樣品 DNA 的制備 用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。 二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線(以 10-10E6 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。 1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號。 2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(用帶芯槍頭,下同)。 3. 產(chǎn)品僅用于科研先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。 4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。 5. 換槍頭,從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。 6. 換槍頭,從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中,重復(fù)上面的操作直到得到 6個(gè)稀釋度的陽性對照。7. NC 管中不加任何陽性對照。 8. 從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進(jìn)行定量 PCR(見下步),每個(gè)樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個(gè)陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對數(shù)值為橫軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。 PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟: 方法 1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5 μl dNTP mix (2mM) 4 μl 引物1(10pM) 2 μl 引物2(10pM) 2 μl Taq酶 (2U/μl) 1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。 2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。 3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。 特點(diǎn)優(yōu)勢: 1. 特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過TIANDZ及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達(dá)到100%。 2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。 3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。 4. 實(shí)用性:產(chǎn)品僅用于科研檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個(gè)檢測過程為3-4個(gè)小時(shí)。 5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除TIANDZ公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。 6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。 N-乙酰-DL-色氨酸/N-乙?;?DL-色氨酸/DL-α-N-乙酰基-β-吲哚丙氨酸/N-Acetyl-DL-tryp tophane 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 包裝;1g N-乙酰甘氨酸/N-乙酰氨基乙酸/N-乙酸基乙酰氨/N-Acetyl-glycine 質(zhì)量規(guī)格:>99%,可用于細(xì)胞培養(yǎng) 包裝;5g D-色氨酸甲酯鹽酸鹽/D-Tryptophan methyl ester hydrochloride 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 包裝;100g L-半胱氨酸甲酯鹽酸鹽/L-鹽酸半胱氨酸甲酯/L-半胱氨酸甲醇酯延酸鹽/L-Cysteine methyl ester hydrochloride 質(zhì)量規(guī)格:>98%,進(jìn)分 包裝;25g D-苯丙氨酸甲酯鹽酸鹽/D-Phenylalanine methyl ester hydrochloride 質(zhì)量規(guī)格:>98%,進(jìn)分 包裝;5g L-丙氨酸甲酯鹽酸鹽/鹽酸L-丙氨酸甲酯/丙氨酸甲脂鹽酸鹽/L-丙胺酸甲酯鹽酸鹽/L-Alanine methyl ester hydrochloride 質(zhì)量規(guī)格:>97%,BR 包裝;25g D-丙氨酸甲酯鹽酸鹽/鹽酸D-丙氨酸甲酯/D-Alanine Methyl Ester Hydrochloride 質(zhì)量規(guī)格:>97%,BR 包裝;5g D-脯氨酸甲酯鹽酸鹽/右旋脯氨酸甲酯氫氯化物/D-脯氨酸甲酯氫氯化物/D-Proline methyl ester hydrochloride 質(zhì)量規(guī)格:>97% 包裝;25g L-酪氨酸甲酯鹽酸鹽/鹽酸L-酪氨酸甲酯/L-酪胺酸甲脂/L-Tyrosine methyl ester hydrochloride 質(zhì)量規(guī)格:>97%,進(jìn)分 包裝;100g D-酪氨酸甲酯鹽酸鹽/鹽酸D-酪氨酸甲酯/D-Tyrosine Methyl ester hydrochloride 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 包裝;25g D-亮氨酸甲酯鹽酸鹽/D-Leucine methyl ester hydrochloride 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,AR 包裝;5g D-絲氨酸甲酯鹽酸鹽/D-Serine methyl ester hydrochloride 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;250mg D-纈氨酸甲酯鹽酸鹽/D-Valine methyl ester hydrochloride 質(zhì)量規(guī)格:>98%,進(jìn)分 包裝;50MG β-丙氨酸甲酯鹽酸鹽/3-氨基丙酸甲酯鹽酸鹽/β-Alanine methyl ester hydrochloride 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 包裝;1ml L-天冬氨酸二甲酯鹽酸鹽/L-天門冬氨酸二甲酯鹽酸鹽/L-Aspartic acid dimethyl ester hydrochloride 質(zhì)量規(guī)格:>98%,日本* 包裝;1g D-天冬氨酸二甲酯鹽酸鹽/D-天門冬氨酸二甲酯鹽酸鹽/D-Aspartic acid dimethyl ester hydrochloride 質(zhì)量規(guī)格:>98%,ROCK1(p160ROCK) 選擇性抑制劑 包裝;25g L-天冬氨酸-β-甲酯鹽酸鹽/β-甲酯-L-天冬氨酸鹽酸鹽/L-天門冬氨酸-β-甲酯鹽酸鹽/L-Aspartic acid β-methyl ester hydrochloride 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥95%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;5g 反芻獸考德里氏體PCR檢測試劑盒說明書Scedosporium apiospermum 中文名稱:單孢霉(斜面)種屬:Scedosporium apiospermum提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:綜合PDA:20%馬鈴薯汁1L,葡萄糖20g ,KH2PO4 3g, MgSO4.7H2O 1.5g,硫胺素微量,瓊脂 15g,pH 自然。生長條件:26℃,好氧 純度:>98.0%(GC) Alcaligenes│denitrificans 中文名稱:反硝化產(chǎn)堿菌種屬:Alcaligenes│denitrificans分離基物:土壤提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:分類、研究,可以用來農(nóng)田土壤及環(huán)境修復(fù)微生物制劑。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:2生長條件:28℃存儲條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法;礦物油法 純度:>98.0%(GC) Serratia│ureilytica 中文名稱:解脲沙雷氏菌種屬:Serratia│ureilytica提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:培養(yǎng)基:KNO3 2g;MgSO4.7H2PO 2g;K2HPO4 0.5g;鉀鈉 20g;瓊脂 20g培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:A3生長條件:37℃存儲條件:真空冷凍干燥法 純度:>98.0%(GC) Thiobacillus│thioparus 中文名稱:產(chǎn)硫硫桿菌(不提供)種屬:Thiobacillus│thioparus提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:33生長條件:26℃存儲條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法;定期移植法 純度:99% Duganella│violacenigra 中文名稱:紫黑杜搟氏菌種屬:Duganella│violacenigra提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:yes培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:33生長條件:25℃存儲條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法;礦物油法 純度:99% Streptomyces│albidoflavus 中文名稱:白鉤鏈霉菌(白丘鏈霉菌)種屬:Streptomyces│albidoflavus提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:產(chǎn)慶大霉素培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:12生長條件:28℃存儲條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:98% Lactobacillus sp. 中文名稱:乳桿菌種屬:Lactobacillus sp.提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:MRS生長條件:37℃,微好氧,2-3天,陽性桿菌,菌種純存儲條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法;礦物油法 純度:98% Fusarium oxysporum f. sp. vasinfectum 中文名稱:尖鐮孢萎蔫?;停ㄐ泵妫┓N屬:Fusarium oxysporum f. sp. vasinfectum提供形式:試管斜面安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:棉花枯萎病菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:綜合PDA:馬鈴薯煮汁1000mL,磷酸二氫鉀 3g,硫酸鎂 1.5g,葡萄糖 20g,維生素B1 10mg,瓊脂 20g,pH自然。馬鈴薯煮液:200g馬鈴薯,去皮,切塊,放入蒸餾中煮沸30min,取濾液定容至1000mL,備用。生長條件:24-28℃,好氧存儲條件:4℃,避光冷藏 純度:98% |