產(chǎn)品僅用于科研注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。 產(chǎn)品名稱:伯氏立克次氏體柯克斯體PCR檢測試劑盒 英文名稱:Coxiella burnetii ()PCR 編號:HE30859-R 類別:PCR檢測試劑盒 儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。 運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。 ? 儲(chǔ)需要自備的器材: 1.儀器:分析天平、離心機(jī)、熒光 PCR 擴(kuò)增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器(2 µL、20 µL、200 µL、1000 µL)。 2.耗材:熒光 PCR 反應(yīng)管、眼科剪、眼科鑷、鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯(DEPC)水 處理的滅菌離心管、吸頭(10 µL、200 µL、1000 µL)、滅菌雙蒸水。 特點(diǎn): 1.即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡單,定量準(zhǔn)確快速。 2. 引物經(jīng)過優(yōu)化,特異性強(qiáng)。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長度為 560 bp。 3. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。 4. 提供陽性對照,便于分析試驗(yàn)結(jié)果。 保存條件: 僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法 1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。 2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。 3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。 4. 組織勻漿:將組織加入適量鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。 5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。 N-乙酰-L-肉堿鹽酸鹽/鹽酸-3-O-乙酰左旋肉堿/O-乙?;?L-肉堿鹽酸鹽/2-乙酰氧基-3-*銨基丁酸氯化物/鹽酸乙?;罂嵬?鄰乙酰基左旋肉堿的氫氯化物/L-乙酰肉堿氯化物/ALC/ALCAR 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;500ml α-酮基纈氨酸鈣鹽/3-甲基-2-氧丁酸鈣鹽/3-甲基-2-氧代丁酸鈣鹽/酮纈氨酸鈣/Calcium alpha-ketovaline 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;25g 芴甲氧羰酰琥珀酰亞胺/9-芴甲基-N-琥珀酰亞胺基碳酸酯/9-芴甲基-N-琥珀酰亞氨基碳酸酯/N-(9氫-氟-2-甲氧基)琥珀酰胺/9-芴甲基-N-琥珀酰亞胺基碳酸酯/FMOC-OSU 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;5g 2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯/四甲基脲六氟磷酸酯/2-(7-偶氮苯丙三氮唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯/雙(二甲基氨基)甲叉-三唑[4,5-B]吡啶3-氧化物六氟磷酸鹽/2-(7-偶氮苯并三氮唑)-四甲基脲六氟磷酸酯/O-(7-氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯/2-(7-氮雜苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯/HATU 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,BR 包裝;1g CBZ-L-纈氨酸/N-芐氧羰基-L-纈氨酸/N-芐氧羰?;?L-纈氨酸/N-CBZ-L-Valine 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;1g D-異亮氨酸/D-異白氨酸/(2R,3R)-2-氨基-3-甲基戊酸/D-lsoleucine 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;250mg β-丙氨酸乙酯鹽酸鹽/β-丙胺酸乙酯鹽酸鹽/氨基乙酸乙酯/β-Alanine ethyl ester HC1 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;5g L-丙氨酰胺鹽酸鹽/L-丙胺酰胺鹽酸鹽/L-Alaninamide hydrochloride 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;100ml D-天冬酰胺一物/D-天冬素/D-天門冬酰胺一合物/D-Asparagine Monohydrate 質(zhì)量規(guī)格:TLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;25ml D-谷氨酰胺/D-谷氨酸-5-酰胺/D-氨羰基丁氨酸/D-麩氨酰胺/D-Glutamine 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;1g D-焦谷氨酸/(R)-2-吡咯烷酮-5-羧酸/D-Pyroglutamic acid 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;5g D-賴氨酸/D-Lysine 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥99%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;25g L-脯氨酰胺/L-Prolinamide 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥99%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;5g D-脯氨酰胺/D-Prolinamide 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;10g BOC-L-苯丙氨醇/(S)-(-)-2-叔丁氧羰基氨基-3-苯基-1-丙醇/N-Boc-L-苯丙氨醇/N-BOC-L-氨基丙醇/N-叔丁氧甲?;?L-苯丙氨醇/N-(叔丁氧羰基)-L-苯丙氨醇/Boc-L-Phenylalaninol 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;2.5g BOC-L-丙氨醇/N-叔丁氧羰基-L-丙氨醇/Boc-L-alaninol 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;1g BOC-L-脯氨醇/N-叔丁氧羰基-L-脯氨醇/(S)-(-)-1-叔丁氧羰基-2-吡咯烷甲醇/N-Boc-L-脯氨酸醇/BOC-L-Prolinol 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;25g 伯氏立克次氏體柯克斯體PCR檢測試劑盒Endomycopsis│fibuligera 中文名稱:扣囊擬內(nèi)孢霉=扣囊復(fù)膜孢酵母種屬:Endomycopsis│fibuligera提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:13生長條件:25-28℃ 純度:97% Colletotrichum│panacicola 中文名稱:人參刺盤孢(人參炭疽病菌)種屬:Colletotrichum│panacicola提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長條件:24-25℃ 純度:97% Gliocladium│roseum 中文名稱:粉紅粘帚霉種屬:Gliocladium│roseum提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長條件:25-28℃ 純度:99% Eurotium│herbariorum 中文名稱:蠟葉散囊菌種屬:Eurotium│herbariorum提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長條件:25℃ 純度:99% Bipolaris│sorokiniana 中文名稱:麥根腐平臍蠕孢種屬:Bipolaris│sorokiniana提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長條件:18-22℃ 純度:≥98% Cortinarius rufo-olivaceus 中文名稱:紫紅絲膜菌(斜面)種屬:Cortinarius rufo-olivaceus提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:綜合PDA:馬鈴薯煮汁1000mL,磷酸二氫鉀 3g,硫酸鎂 1.5g,葡萄糖 20g,維生素B1 10mg,瓊脂 20g,pH自然。馬鈴薯煮液:200g馬鈴薯,去皮,切塊,放入蒸餾中煮沸30min,取濾液定容至1000mL,備用。121℃,15min。生長條件:25℃,好氧存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;礦物油法;定期移植法 純度:≥98% Amphibacillus│sp. 中文名稱:雙芽胞桿菌種屬:Amphibacillus│sp.分離基物:土壤提供形式:斜面培養(yǎng)物模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:檢測培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:2生長條件:30-37℃存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:≥98% Pseudomonas│oryzihabitans 中文名稱:棲稻假單胞菌種屬:Pseudomonas│oryzihabitans分離基物:土壤提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:可以在含1000mg/l的芐磺隆的無機(jī)鹽培養(yǎng)基:中生長培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:33生長條件:30℃存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;定期移植法 純度:98% 反應(yīng)五要素: 參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則: ①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。 ②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。 ③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。 ④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。 ⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。 ⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn), 這對酶切分析或分子克隆很有好處。 ⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。 引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。 技術(shù)原理: DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動(dòng)子的參與下,根據(jù)堿基互補(bǔ)配對原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。 在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時(shí)也可以發(fā)生變性解鏈,當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性,并設(shè)計(jì)引物做啟動(dòng)子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。( DNA高溫變性低溫復(fù)性) 產(chǎn)品僅用于科研發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個(gè)循環(huán)加酶,使PCR技術(shù)變得非常簡捷、同時(shí)也大大降低了成本,PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用,并逐步應(yīng)用于臨床。 |