產(chǎn)品僅用于科研注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。 產(chǎn)品名稱:雞馬立克病毒(MDV)核酸試劑盒 規(guī)格:48T/盒 編號(hào):HE32175-R 類(lèi)別:PCR檢測(cè)試劑盒 儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。 運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門(mén)。 ? 儲(chǔ)需要自備的器材: 1.儀器:分析天平、離心機(jī)、熒光 PCR 擴(kuò)增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器(2 µL、20 µL、200 µL、1000 µL)。 2.耗材:熒光 PCR 反應(yīng)管、眼科剪、眼科鑷、鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯(DEPC)水 處理的滅菌離心管、吸頭(10 µL、200 µL、1000 µL)、滅菌雙蒸水。 特點(diǎn): 1.即開(kāi)即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡(jiǎn)單,定量準(zhǔn)確快速。 2. 引物經(jīng)過(guò)優(yōu)化,特異性強(qiáng)。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長(zhǎng)度為 560 bp。 3. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。 4. 提供陽(yáng)性對(duì)照,便于分析試驗(yàn)結(jié)果。 保存條件: 僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法 1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。 2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。 3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。 4. 組織勻漿:將組織加入適量鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。 5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。 螺螨酯溶液標(biāo)準(zhǔn)樣品 1ml Aspergillus nidulans構(gòu)巢曲霉探針?lè)晒舛縋CR試劑盒 氟嗎啉溶液標(biāo)準(zhǔn)樣品 1mL Aspergillus ochraceus赭曲霉PCR試劑盒 猛殺威溶液標(biāo)準(zhǔn)樣品 1ml Aspergillus ochraceus赭曲霉染料法熒光定量PCR試劑盒 溶液標(biāo)準(zhǔn)樣品 1ml Aspergillus ochraceus赭曲霉探針?lè)晒舛縋CR試劑盒 土菌靈溶液標(biāo)準(zhǔn)樣品 1ml Aspergillus parasiticus寄生曲霉PCR試劑盒 吡螨胺溶液標(biāo)準(zhǔn)樣品 1ml Aspergillus parasiticus寄生曲霉染料法熒光定量PCR試劑盒 胺靈溶液標(biāo)準(zhǔn)樣品 1ml Aspergillus parasiticus寄生曲霉探針?lè)晒舛縋CR試劑盒 氟喹唑溶液標(biāo)準(zhǔn)樣品 1ml Aspergillus spp. 曲霉屬通用PCR試劑盒 乙氧氟草醚溶液標(biāo)準(zhǔn)樣品 1ml Aspergillus spp. 曲霉屬通用染料法熒光定量PCR試劑盒 咯菌溶液標(biāo)準(zhǔn)樣品 1ml Aspergillus spp. 曲霉屬通用探針?lè)晒舛縋CR試劑盒 抑菌靈溶液標(biāo)準(zhǔn)樣品 1ml Astrovirus(AV)星狀病毒RT-PCR試劑盒 雙氟脲溶液標(biāo)準(zhǔn)樣品(氟酰脲) 1ml Astrovirus(AV)星狀病毒染料法熒光定量RT-PCR試劑盒 微囊藻毒素RR溶液標(biāo)準(zhǔn)樣品 1ml Astrovirus(AV)星狀病毒探針?lè)晒舛縍T-PCR試劑盒 水中靛藍(lán)溶液標(biāo)準(zhǔn)樣品 5ml Aujeszky's Disease Virus(ADV)奧葉茲基氏病病毒PCR試劑盒 烯草酮溶液標(biāo)準(zhǔn)樣品 1ml Aujeszky's Disease Virus(ADV)奧葉茲基氏病病毒染料法熒光定量PCR試劑盒 維生素M/葉酸/蝶酰谷氨酸/蝶翅酸酰谷氨酸/維生素BC/N-[4-(2-氨基-4-氧代-6-蝶啶)甲氨基甲?;鵠-L-谷氨酸/VM/PGABR,97%25克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,59-30-32~8℃,避光 100克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌, 500克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌, 中文名稱: 維生素M 其他名稱: 葉酸;蝶酰谷氨酸;蝶翅酸酰谷氨酸;維生素BC;N-[4-(2-氨基-4-氧代-6-蝶啶)甲氨基甲?;鵠-L-谷氨酸 英文名稱: VM 其他名稱: Folic acid;N-4-[(2-Amido-4-oxo-1,4-dihydro-6-rene)methylamino]benzoyl-L-glutamic acid;Vitamin B;Vitamin B11;Vitamin BC;Vitamin M;L-Proylglutamic acid;PGA 產(chǎn)品規(guī)格: BR,97% 包裝:25克/100克/500克 CAS號(hào):59-30-3 C19H19N7O6=441.40 級(jí)別:BR 含量:≥97.0% 重金屬:≤20mg/㎏ A紫外吸收:合格 干燥失重:≤8.5% 性狀:黃色或橙色結(jié)晶粉末或薄片。無(wú)熔點(diǎn),約250℃色變深并炭化。溶于熱的稀鹽酸和硫酸,略溶于、酚、吡啶、氫氧化堿和碳酸堿溶液,少溶于乙醇和丁醇,微溶于甲醇,極微溶于冷水(25℃,0.0016mG/ml),沸水中約可溶1%,不溶于丙酮、和。1G葉酸于10ml水中的懸浮液,pH 4.0~4.8。與碳酸氫鈉制備的溶液pH6.5~6.8。大吸收波長(zhǎng)(pH 13):256、283、368nm(logε4.43、4.40、3.96)。比旋光度[α]25D +23°(c=0.5,0.1mol/L氫氧化鈉溶液中)。 用途:生化研究。 保存:2~8℃,避光,避免與金屬接觸 雞馬立克病毒(MDV)核酸試劑盒組織相容性復(fù)合體α抗體5-(2-Aminopropyl)-7-cyanoindolin-1-yl)propyl benzoa別名: 分子式: C22H25N3O2性狀: Oil純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子激活抑制蛋白2抗體1-Indanone別名: 分子式: C9H8O性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: HOMER2抗體2-(7-Methoxy-1-naphthyl)ethylamine hydrochloride別名: 分子式: C13H16ClNO性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 瘤病毒調(diào)控因子1抗體(鋅指蛋白395)7-Methoxy-1-tralinone別名: 分子式: C11H12O2性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 人類(lèi)狀瘤病毒18 E6單克隆抗體Silodosin別名: 分子式: C25H32F3N3O4性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 異質(zhì)核糖核蛋白F抗體Fingolimod別名: 分子式: C19H33NO2性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 異質(zhì)核糖核蛋白K抗體3-Nitro-1-(4-octylphenyl)-1-propanone別名: 分子式: C17H25NO3性狀: Yellow powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 異質(zhì)核糖核蛋白L抗體3-(Hydroxymethyl)-3-nitro-1-(4-octylphenyl)-1,4-butanediol別名: 分子式: C19H31NO5性狀: Yellow powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 反應(yīng)五要素: 參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則: ①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。 ②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。 ③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。 ④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。 ⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。 ⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。 ⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。 引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。 技術(shù)原理: DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動(dòng)子的參與下,根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。 在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時(shí)也可以發(fā)生變性解鏈,當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此,通過(guò)溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性,并設(shè)計(jì)引物做啟動(dòng)子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。( DNA高溫變性低溫復(fù)性) 產(chǎn)品僅用于科研發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對(duì)于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個(gè)循環(huán)加酶,使PCR技術(shù)變得非常簡(jiǎn)捷、同時(shí)也大大降低了成本,PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用,并逐步應(yīng)用于臨床。 |