注意事項: 1.如果4℃ 12000g離心10分鐘后得到的上清液中還有可見的沉淀,可以將上清轉(zhuǎn)移到一個新的離心管中后再4℃ 12000g離心10分鐘,以去除可見的小碎片。 2.植物組織中存在有大量的多酚、多糖、色素、次生代謝產(chǎn)物,如果需要除去植物蛋白樣品中殘存的色素等雜質(zhì),可以在最后得到的上清液中加入5倍體積的冷丙酮或冷甲醇,混勻后-20℃放置1小時或過夜,然后4℃,12000rpm離心10min,棄上清后室溫風(fēng)干,然后將樣品溶于自備的后續(xù)實驗緩沖液中即可。經(jīng)過此純化處理后,部分蛋白質(zhì)可能會發(fā)生變性,不能再用于活性檢測。 產(chǎn)品屬性: 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 檢測方法 | 甲醛固定組織蛋白提取試劑盒 | 50T/100T | WB,IP等 |
使用方法: 使用前,最好請在溶液A中加入自備的1M DTT溶液50μL。 一:勻漿法 ?注意:對致密的實體組織(如肌肉),最好用Polytron 式勻漿機勻漿處理。 1. 稱取動物或植物組織樣品100mg,剪刀剪成黃豆大小,轉(zhuǎn)移到10-15mL的塑料離心管中。 2. 加入1ml溶液A,在冰上用Polytron 式勻漿機勻漿,直到?jīng)]有肉眼可見的組織塊。為了避免產(chǎn)熱,可以分多次勻漿,其間放冰上讓勻漿液冷卻。 3. 將勻漿液全部轉(zhuǎn)移到1.5mL的塑料離心管中。 4. 4℃ 12000 g離心10分鐘,組織殘渣碎片將形成沉淀。 5. 將上清液轉(zhuǎn)移至一新的1.5mL塑料離心管中即得到蛋白溶液,可置于-70℃冰箱保存或立即使用。如果要測定蛋白濃度,請使用BCA方法,不要使用Bradford方法(如果要使用,也需要把樣品稀釋10倍后再測定,否則溶液A中的成分會影響濃度側(cè)定)。如果要進行SDS-PAGE電泳,可取部分到離心管中,加入5×SDS-PAGE上樣緩沖液(終濃度為1×),在沸水中處理5分鐘后立即上樣電泳。 產(chǎn)品特點: 1. 提取過程十分簡便,勻漿離心即可,整個過程只需要十幾分鐘。 2. 采用*的溫和裂解成分,蛋白保持天然活性。 3.適用于各種動植物組織材料,包括新鮮或冰凍的材料。 4. 得到的提取物可以直接用于SDS-PAGE、2D電泳、Western印跡分析以及蛋白活性測定等下游實驗。 5.一次可以處理100mg左右的樣品,足夠進行幾十次SDS-PAGE mini膠電泳檢測。 冰凍切片組織VEGF蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20次大鼠FMS樣酪氨激酶3配體(Flt3L)ELISA試劑盒, 石蠟切片組織VEGF蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20次豬流感病A(FLU A)ELISA試劑盒, 載玻片細胞VEGF蛋白表達NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒10/20次豬血管緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISA試劑盒, 冰凍切片組織VEGF蛋白表達NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒10/20次雞熱休克蛋白60(Hsp-60)ELISA試劑盒, 石蠟切片組織VEGF蛋白表達NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒10/20次兔粒集落激因子(G-CSF)ELISA試劑盒, 細胞VEGF蛋白表達比色法定量檢測試劑盒10/50 次兔子可溶性血管內(nèi)皮蛋白C受體(sEPCR)ELISA試劑盒, 細胞VEGF蛋白表達熒光定量檢測試劑盒10/50 次可溶性粘附分子(Sam)ELISA試劑盒--動物,人 VEGF蛋白表達西方雜交分析試劑盒5次趨化因子(fractalkine/CX3CL1) ELISA試劑盒--動物,人 VEGF蛋白免疫共沉淀分析試劑盒5次低氧誘導(dǎo)因子1α(HIF-1α)ELISA試劑盒--動物,人 VEGF蛋白表達ELISA定量檢測試劑盒25次山梨醇麥康凱瓊脂礎(chǔ)(SMAC) 細胞BAD蛋白表達流式細胞儀檢測試劑盒10/20次濾膜腸球菌瓊脂 載玻片細胞BAD蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20次C .L.E.D 培養(yǎng)添加劑每支加入100ml C.L.E.D 培養(yǎng)中 冰凍切片組織BAD蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20次DL-高苯丙氨 石蠟切片組織BAD蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20次N-酰甘氨 載玻片細胞BAD蛋白表達NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒10/20次N-酰-L-丙氨 甲醛固定組織蛋白提取試劑盒C Peptide C-肽抗體鈀銨 Pd ≥29.5% CPT1A 肉棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶1A抗體亞鈀銨 Pd ≥36.5% CPSF4/CPSF30 剪切和多聚腺苷化特異性因子4抗體銠銨 Rh 27.5% Calretinin 鈣結(jié)合蛋白抗體二(苯)二化鈀 Pd 27.7% Crk p38 /CrkII Crk p38抗體二亞硝二氨鉑 59.0% phospho-Crk p38 (Tyr221) 化Crk p38抗體銥 Ir 35% in HCl SLAMF6 SLAMF6抗體亞鉑 AR CRMP2 CRMP2抗體氧化鈀 Pd ≥85%
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