熒光染料的優(yōu)點(diǎn)：
產(chǎn)品僅用于科研使用簡便；
可以與任何PCR產(chǎn)物結(jié)合；
價(jià)格便宜；
熒光染料的缺點(diǎn)：
不能區(qū)分不同的雙鏈DNA
引物二聚體會影響檢測的敏感性
非特異性產(chǎn)物會影響結(jié)果的敏感性
引物二聚體和非特異性擴(kuò)增問題可以通過熔解曲線 (Melting curve) 進(jìn)行識別，進(jìn)而通過PCR引物的設(shè)計(jì)和反應(yīng)條件的優(yōu)化得以解決?？偟膩碚f，SYBR Green I方法是一種基礎(chǔ)也的Real-time qPCR實(shí)驗(yàn)手段。
特別提示：本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

?
熒光探針：
Real-e qPCR中的熒光探針為TaqMan探針，其基本原理是依據(jù)目的基因設(shè)計(jì)合成一個(gè)能夠與之特異性雜交的探針，該探針的5'端標(biāo)記熒光基團(tuán)，3'端標(biāo)記淬滅基團(tuán)。
正常情況下兩個(gè)基團(tuán)的空間距離很近，熒光基因因淬滅而不能發(fā)出熒光。PCR擴(kuò)增時(shí)，引物與該探針同時(shí)結(jié)合到模板上，探針的結(jié)合位置位于上下游引物之間。
當(dāng)擴(kuò)增延伸到探針結(jié)合的位置時(shí)，Taq酶利用5'外切酶活性，將探針5'端連接的熒光分子從探針上切割下來，從而使其發(fā)出熒光。檢測到的熒光分子數(shù)與PCR產(chǎn)物的數(shù)量成正比，因此，根據(jù)PCR反應(yīng)體系中的熒光強(qiáng)度即可計(jì)算出初始DNA模板的數(shù)量。
TaqMan探針技術(shù)解決了熒光染料與非特異性擴(kuò)增結(jié)合的問題，反應(yīng)結(jié)束后無需通過熔解曲線檢測，縮短了實(shí)驗(yàn)時(shí)間。
TaqMan探針技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)：
熒光背景低；
敏感性高；
雜交穩(wěn)定性高；
熒光光譜分辨率好；
特異性高。
TaqMan探針技術(shù)的缺點(diǎn)：
成本高；
設(shè)計(jì)難度大；
只能用于檢測產(chǎn)物長度低于150bp的反應(yīng)。
由于TaqMan探針的高特異性，可用于等位基因的辨別，特別適用于人類基因多態(tài)性以及根據(jù)SNP區(qū)別和定量菌株。
?
熒光定量PCR原理：
產(chǎn)品僅用于科研熒光定量PCR早稱TaqMan PCR，后來也叫Real-Time PCR，是美國PE（Perkin Elmer）公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術(shù)。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標(biāo)記探針或相應(yīng)的熒光染料來實(shí)現(xiàn)其定量功能的。其原理：隨著PCR反應(yīng)的進(jìn)行，PCR反應(yīng)產(chǎn)物不斷累計(jì)，熒光信號強(qiáng)度也等比例增加。每經(jīng)過一個(gè)循環(huán)，收集一個(gè)熒光強(qiáng)度信號，這樣我們就可以通過熒光強(qiáng)度變化監(jiān)測產(chǎn)物量的變化，從而得到一條熒光擴(kuò)增曲線圖。
一般而言，熒光擴(kuò)增曲線可以分成三個(gè)階段：熒光背景信號階段，熒光信號指數(shù)擴(kuò)增階段和平臺期。在熒光背景信號階段，擴(kuò)增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺期，擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加，PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒有線性關(guān)系，根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計(jì)算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號指數(shù)擴(kuò)增階段， PCR產(chǎn)物量的對數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系，我們可以選擇在這個(gè)階段進(jìn)行定量分析。為了定量和比較的方便，在實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個(gè)非常重要的概念：熒光閾值和 CT值。
馬來酸溴那敏(標(biāo)準(zhǔn)品)Phospho-Mre11 (Ser676) Antibody叔丁基三氯乙酰亞酯

扁蓄苷(標(biāo)準(zhǔn)品)WASP Antibody1-N-Boc-氧代-哌啶羧酸乙酯

匹莫丹KLC1 (D2T2R) Rabbit mAb2-吡啶甲酸

2-氨基-4'-氟二甲酮Phospho-Zyxin (Ser142/143) Antibody焦酸四芐酯

2-氨基-4'-氯二甲酮Phospho-Akt (Thr308) (D25E6) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 Conjuga)3,5-二羥基甲酸

原百部(標(biāo)準(zhǔn)品)PTP-PEST (AG10) Mouse mAb(吡啶基)甲

雪上一枝蒿甲素E2A Antibody硫代硫酸鈉

麥冬皂苷D' VDAC Antibody氯化亞錫,無水

糠,2-呋喃VDAC Antibody氨基磺酸銨

芐氟噻Phospho-DRP1 (Ser637) Antibody溴-氟甲

蘭雪醌,白花丹醌,白花丹素(標(biāo)準(zhǔn)品)EGF Receptor (D1D4J) XP® Rabbit mAb (Neutralizing) (PE Conjuga)羥基甲酸乙酯

黃鐘花醌;拉帕 (標(biāo)準(zhǔn)品)HSP40 Antibody鉬酸

β-乙HSP60 (D85) Antibody硫代硫酸銨

亮菌甲素CD4 (RPA-T4) Mouse mAb (FITC Conjuga)三氟化銻

17α-羥基酮HSP60 (D307) Antibody硝酸鋁九水合物

21-乙酰氧基孕酮HSP40 (C64B4) Rabbit mAb嗎啉羧酸

珊瑚菜內(nèi)酯，珊瑚菜素(標(biāo)準(zhǔn)品)HSP40 (C64B4) Rabbit mAb氟化氫

鞣花酸(標(biāo)準(zhǔn)品)HSP70 Antibody溴化鎂
胰闊圓盤吸蟲探針法熒光PCR檢測試劑盒犀牛皮質(zhì)酮(CORT)ELISA試劑盒AVPR2/FITC  熒光素標(biāo)記精氨酸加壓素受體2抗體IgG100 ul

田鼠睪酮(T)ELISA試劑盒Axin1/FITC  熒光素標(biāo)記軸蛋白1Axin proin 1抗體IgG20 ul

蘇丹紅ELISA試劑盒B7-DC/PDL2/CD273 /FITC  熒光素標(biāo)記程序性死亡配體2抗體IgG100 ul

絲裂原激活的蛋白激酶/MAP激酶(MAPK)ELISA試劑盒B7-H1/PDL1/CD274 /FITC  熒光素標(biāo)記程序性死亡配體1抗體IgG20 ul

雙特異性絲裂原活化蛋白激酶5(MAP2K5)ELISA試劑盒B7-H4/FITC  熒光素標(biāo)記B7H4抗體IgG100 ul

雙酚A(BPA)ELISA試劑盒BACE/ASP2 /FITC  熒光素標(biāo)記β分泌酶抗體IgG100 ul

食蟹猴胰高血糖素(GC)ELISA試劑盒Bad/FITC  熒光素標(biāo)記相關(guān)死亡促進(jìn)因子Bad抗體IgG100 ul

食蟹猴C肽(C-Peptide)ELISA試劑盒Bad/FITC  熒光素標(biāo)記相關(guān)死亡促進(jìn)因子Bad抗體IgG100 ul

石斑魚卵黃蛋白原(VTG)ELISA試劑盒Phospho-Bad(Ser112) /FITC  熒光素標(biāo)記兔抗、大、相關(guān)死亡促進(jìn)因子抗體IgG100 ul
PCR技術(shù)的定量原理：
擴(kuò)增曲線
在Real- qPCR中，對整個(gè)PCR反應(yīng)擴(kuò)增過程進(jìn)行了實(shí)時(shí)的檢測并記錄其熒光信號，隨著反應(yīng)的進(jìn)行，監(jiān)測到的熒光信號可以繪制成一條曲線，即為擴(kuò)增曲線。熒光擴(kuò)增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺期。
在Real-time qPCR擴(kuò)增早期，擴(kuò)增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化，此時(shí)即為基線期。
PCR反應(yīng)過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的，隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加，終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板，從而進(jìn)入“平臺期”。在該時(shí)期，擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加，PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關(guān)系，所以根據(jù)終的PCR產(chǎn)物量不能計(jì)算出初始模板量。