實驗外包: 1.基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學(xué)分析 2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片、LncRNA芯片、表達譜芯片、RNA-seq 3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM 4.基因檢測:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR 5.蛋白質(zhì)檢測:Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA 6.病理檢測:HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細胞分選 7.代謝組學(xué):GC-MS、LC-MS、NMR 8.細胞及動物模型:原代細胞、細胞模型、動物模型構(gòu)建 服務(wù)流程: 接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。 ? 產(chǎn)品名稱 | 丹毒絲菌屬通用PCR檢測試劑盒說明書 | 英文名稱 | Erysipelothrix sppPCR | 貨號 | HE30969-R |
使用方法: 一、樣品 DNA 的制備 用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。 二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線(以 10-10E6 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。 1. 標(biāo)記 6 個離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號。 2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(用帶芯槍頭,下同)。 3. 產(chǎn)品僅用于科研先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。 4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。 5. 換槍頭,從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。 6. 換槍頭,從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中,重復(fù)上面的操作直到得到 6個稀釋度的陽性對照。7. NC 管中不加任何陽性對照。 8. 從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進行定量 PCR(見下步),每個樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對數(shù)值為橫軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。 PCR實驗方法步驟: 方法 1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5 μl dNTP mix (2mM) 4 μl 引物1(10pM) 2 μl 引物2(10pM) 2 μl Taq酶 (2U/μl) 1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。 2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。 3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。 特點優(yōu)勢: 1. 特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過TIANDZ及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。 2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。 3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。 4. 實用性:產(chǎn)品僅用于科研檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。 5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除TIANDZ公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。 6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。 N-羥乙基乙二胺-N,N′,N′-三乙酸三鈉/氨乙基乙醇胺三乙酸三鈉/N-羥乙基乙二胺三乙酸三鈉/N-(2-羥乙基)乙二胺三乙酸三鈉/N-(2-羥乙基)乙二胺-N,N',N'-三乙酸三鈉/羥乙基乙烯二胺三乙酸三鈉/N-二-羥乙基-亞乙基二胺三乙酸三鈉/N-[2-[雙(羧甲基)氨基]乙基]-N-(2-羥乙基)-甘氨酸三鈉鹽/HEDTA-Na3 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC) 包裝;100g 乙二胺四乙酸二鈉鹽/四乙酸二氨基乙烯二鈉鹽/托立龍B/氨羧絡(luò)合劑III/螯合劑III/絡(luò)合酮II/ EDTA二鈉/N,N’-1,2-乙二基雙(N-羧基甲基)氨基乙酸二鈉鹽二合物/絡(luò)合劑EDTA二鈉/氨羧絡(luò)合亮劑Ⅲ/EDTA-2Na 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) 包裝;25g 乙二胺四乙酸二鈉鈣鹽/乙二胺四乙酸鈣二鈉/EDTA二鈉鈣/依地酸鈣二鈉二合物/依地酸鈉鈣/EDTA 鈣鈉鹽/EDTA-2NaCa 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) 包裝;500g 乙二胺四乙酸二鈉錳鹽/乙二胺四乙酸錳二鈉/EDTA二鈉錳/EDTA錳二鈉/EDTA錳鈉鹽/Ethylenediaminetetraacetic acid manganese disodium salt hydrate 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) 包裝;5g 乙二胺四乙酸二鈉鋅鹽/乙二胺四乙酸鋅二鈉/EDTA二鈉鋅/Disodium zinc ethylenediaminetetraacetate tetrahydrate 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)(T) 包裝;1g 乙二胺四乙酸二鈉銅鹽/乙二胺四乙酸銅二鈉/EDTA二鈉銅/乙二胺基四乙酸銅二鈉鹽/Ethylenediaminetetraacetic acid copper(II) disodium salt 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(T) 包裝;250mg 乙二胺四乙酸四鈉鹽/EDTA四鈉鹽/EDTA tetrasodium salt 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)(T) 包裝;50mg 乙二胺四乙酸二鉀鹽/乙二胺四乙酸鉀/EDTA二鉀鹽二合物/EDTA-2K 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(T) 包裝;25g 乙二胺四乙酸三鉀鹽/EDTA三鉀鹽二合物/EDTA-三鉀/EDTA-3K 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC) 包裝;5g 脂磷壁酸/Lipoteichoic acid 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) 包裝;25g 2-硫代巴比妥酸/4,6-二羥基-2-巰基嘧啶/丙二酰硫脲/2-硫代巴比土酸/4,6-二氧-2-巰基嘧啶/二氫-2-硫代-4,6(1H,5H)-嘧啶二酮/丙二烯縮硫脲/TBA 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) 包裝;5g 三/三氟醋酸/過/全氟醋酸/TFA 質(zhì)量規(guī)格:>96.0%(GC) 包裝;25g 三/三氯醋酸/TCA 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC) 包裝;5g 棕櫚酸/軟脂酸/十六酸/鯨蠟酸/正十六烷酸/鯨乙酸/十六烷酸/Palmitic acid 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(GC) 包裝;1g 檸檬酸/枸櫞酸/2-羥基丙羧酸/Citric acid 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) 包裝;250mg 無檸檬酸/枸櫞酸/2-羥基丙羧酸/Citric acid 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)(T) 包裝;5g α-酮戊二酸/2-酮戊二酸/2-氧代戊二酸/α-酮基戊二酸/2-氧代-1,5戊二酸/α-羰基戊二酸/2-氧代-1,5戊二酸/α-膠酮酸/α-Ketoglutaric acid 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(GC)(T) 包裝;100g 丹毒絲菌屬通用PCR檢測試劑盒說明書Trichosporon asahii 中文名稱:阿薩斯絲孢酵母種屬:Trichosporon asahii提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:YM 培養(yǎng)基:酵母提取物,3.0 g 麥芽提取物,3.0 g 葡萄糖,10.0 g 蛋白棟,5.0 g 瓊脂,20.0 g 蒸餾1000 ml ,pH 6.2 +/- 0.2生長條件:25℃,好氧存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:98% Mucor flavus 中文名稱:黃色毛霉種屬:Mucor flavus提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:type of M. sciurinus培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:綜合PDA:馬鈴薯煮汁1000mL,磷酸二氫鉀 3g,硫酸鎂 1.5g,葡萄糖 20g,維生素B1 10mg,瓊脂 20g,pH自然。馬鈴薯煮液:200g馬鈴薯,去皮,切塊,放入蒸餾中煮沸30min,取濾液定容至1000mL,備用。121℃,15min。生長條件:25℃,好氧存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:≥97% (HPLC) Penicillium brasilianum 中文名稱:巴西青霉種屬:Penicillium brasilianum提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:綜合PDA:20%馬鈴薯汁1L,葡萄糖20g ,KH2PO4 3g, MgSO4.7H2O 1.5g,硫胺素微量,瓊脂 15g,pH 自然。生長條件:25-28℃,好氧存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:≥97% (HPLC) Streptomyces│fungicidicus 中文名稱:殺真菌素鏈霉菌種屬:Streptomyces│fungicidicus提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:yes應(yīng)用領(lǐng)域:Type strain; Produces fungicidin培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:38生長條件:28℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:試劑級 Pseudomonas│putida 中文名稱:惡臭假單孢菌種屬:Pseudomonas│putida提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:用于微生物驅(qū)油及含油污處理培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:33生長條件:37℃存儲條件:-80℃冰箱凍結(jié)法 純度:≥99% Lactobacillus│delbrueckii subsp.bulgaricus 中文名稱:德式乳桿菌保加利亞亞種種屬:Lactobacillus│delbrueckii subsp.bulgaricus提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:yes培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:6生長條件:37℃存儲條件:定期移植法 純度:≥99% Bosea│massiliensis 中文名稱:馬賽博斯氏菌種屬:Bosea│massiliensis分離基物:土壤提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:848生長條件:18℃存儲條件:真空冷凍干燥法 純度:98% Paenibacillus│pabuli 中文名稱:飼料類芽孢桿菌種屬:Paenibacillus│pabuli分離基物:綠色或發(fā)酵的飼料提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:yes培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:533生長條件:30℃存儲條件:真空冷凍干燥法 純度:98% |