產(chǎn)品名稱:副流感病毒通用PCR檢測試劑盒規(guī)格 英文名稱:Parainfluenza Virus(PIV)RTPCR 編號:HE31348-R 類別:PCR檢測試劑盒 儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。 運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。 產(chǎn)品僅用于科研注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。 ? 反應(yīng)五要素: 參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則: ①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。 ②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。 ③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。 ④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。 ⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。 ⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn), 這對酶切分析或分子克隆很有好處。 ⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。 引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。 技術(shù)原理: DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動子的參與下,根據(jù)堿基互補(bǔ)配對原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。 在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時也可以發(fā)生變性解鏈,當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性,并設(shè)計引物做啟動子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。( DNA高溫變性低溫復(fù)性) 產(chǎn)品僅用于科研發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個循環(huán)加酶,使PCR技術(shù)變得非常簡捷、同時也大大降低了成本,PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用,并逐步應(yīng)用于臨床。 儲需要自備的器材: 1.儀器:分析天平、離心機(jī)、熒光 PCR 擴(kuò)增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器(2 µL、20 µL、200 µL、1000 µL)。 2.耗材:熒光 PCR 反應(yīng)管、眼科剪、眼科鑷、鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯(DEPC)水 處理的滅菌離心管、吸頭(10 µL、200 µL、1000 µL)、滅菌雙蒸水。 特點(diǎn): 1.即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡單,定量準(zhǔn)確快速。 2. 引物經(jīng)過優(yōu)化,特異性強(qiáng)。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長度為 560 bp。 3. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。 4. 提供陽性對照,便于分析試驗(yàn)結(jié)果。 保存條件: 僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法 1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。 2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。 3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。 4. 組織勻漿:將組織加入適量鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。 5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。 10%SDS溶液 100ml 別名 十二烷基硫酸鈉英文名稱 SDS,10%儲存條件 RT,有效期1年純度 10%外觀(性狀) 液體單位 瓶 Western blotting 蛋白Marker 10T 英文名稱 Western Blotting Marker儲存條件 -20℃,有效期2年。避免反復(fù)凍融,建議分裝保存。單位 瓶產(chǎn)品簡介 : 傳統(tǒng)的Western Blot試驗(yàn)需要使用預(yù)染蛋白Marker來跟蹤檢測陽性抗原信號和轉(zhuǎn)膜效率,但預(yù)染蛋白Marker無法在膠片上曝光,曝光信號需要根據(jù)膜上的預(yù)染蛋白Marker來判斷。Western Blot Marker是專門為Western Blot試驗(yàn)設(shè)計的分子量標(biāo)準(zhǔn),由9種發(fā)光蛋白和9種預(yù)染蛋白組成;9種發(fā)光蛋白分別為23、30、36、44、50、62、90、120 和160KDa,這些蛋白均可與抗體結(jié)合,因此能與抗原在同一張膜上曝出信號,陽性信號可以直接通過Western Marker 的位置來判斷;9種預(yù)染蛋白分別為15、25、35、40、55、70、100、130 和180KDa,其中70KDa為紅色,其他為藍(lán)色,轉(zhuǎn)膜完畢后在膜上肉眼可見?!∈褂谜f明: 1. 取出后于室溫放置融化; 2. 溫和地充分混勻,取 5μl 該 Western Blot Marker 至上樣孔中,進(jìn)行 SDS-PAGE 電泳?!?. 電泳完畢后轉(zhuǎn)至 PVDF 膜或 NC 膜,與一抗二抗孵育?!?. 孵育完畢,將 Western Blot Marker 與抗原一起通過 ECL 曝光至膠片。 Tris-Tricine-SDS-PAGE 凝膠制備試劑盒 25T 英文名稱 Tris-Tricine-SDS-PAGE儲存條件 2-8℃,避光,有效期1年單位 盒產(chǎn)品簡介:常規(guī)的Tris-SDS-PAGE電泳的只能分辨大分子蛋白,對于相對分子量小的,尤其是10 kD 以下的蛋白分辨率極低。而Tricine-SDS-PAGE可以很好的分離分子量在1-10 kD的蛋白及多肽,成為目前電泳法變性分離多肽的主要方法。本產(chǎn)品包括Tricine-SDS- PAGE 凝膠制備所需全套試劑,只需自備蒸餾水,即可制備高質(zhì)量各種濃度的凝膠,方便、快捷,電泳后可直接用于考染、銀染、Western雜交等實(shí)驗(yàn)。。 考馬斯亮藍(lán)快速染色液 500ml 別名 考馬斯亮藍(lán)染色液英文名稱 Coomassie Brilliant Blue Fast Staining solution儲存條件 2-8℃保存,有效期1年。單位 瓶貨號:P1300 規(guī)格:500ml 組成:溶液A 10ml、溶液B 500ml?!”4妫?-8℃保存,有效期1年。 產(chǎn)品簡介: 考馬斯亮藍(lán)蛋白膠快速染色液是一種即用型快速靈敏而且安全的染液,以考馬斯亮藍(lán)G-250為染料,可用于SDS-PAGE或者非變性電泳蛋白凝膠的快速染色,染色時間短,半小時內(nèi)即可檢測到蛋白電泳條帶?!∈褂梅椒ǎ? 工作液的配制,取100ml溶液B,加入2ml溶液A,混勻,此為工作液。此工作液配好后請?jiān)谝恢軆?nèi)使用完,過期效果會有一定的影響?!?. 將電泳后的 PAGE 膠(以8cm×10 cm大小為例)取下放入容器中,加入50 ml雙蒸水或去離子水,加熱至沸騰后停止,(可選:繼續(xù)在脫色搖床上搖動5 分鐘),棄去水溶液?!?. 加入25ml 快速染色工作液,加熱至沸騰后保持沸騰狀態(tài)30-60秒,停止加熱后繼續(xù)在脫色搖床上搖動 5-10 分鐘,棄去染色液(此時蛋白條帶應(yīng)已可見)?!?. 加入約50 ml水,加熱至沸騰后保持沸騰狀態(tài)30-60秒,停止加熱后繼續(xù)在脫色搖床上搖動5-10分鐘,換水即可完成脫色,觀察結(jié)果?!?/span> 低分子量蛋白質(zhì)Marker(14.4-97.4KDa) 20T 英文名稱 Protein Marker(14.4kD-97.4kD)儲存條件 -20℃,有效期1年本產(chǎn)品為包含6種蛋白質(zhì)混合物的凍干粉,分子量范圍為14.4kD-97.4kD,每種蛋白的含量約為20-30μg。 經(jīng)過SDS-PAGE(聚丙烯酰胺凝膠)電泳后,用考馬斯亮藍(lán)染色可以得到分布均勻密度相近的6條帶。可以用來判斷SDS-PAGE電泳后蛋白質(zhì)的分子量?!∈褂谜f明: 1. 開封后,溶于400µL體積的1×蛋白上樣緩沖液(含β-巰基乙醇),于沸水浴中加熱5分鐘,冷卻后可根據(jù)需要進(jìn)行小量分裝,每管20µL,-20℃貯存,每次取一管使用?!?. 如長期貯存后使用,使用前好取分裝后的小管沸水浴預(yù)熱3-5分鐘后再上樣電泳, 用考馬斯亮藍(lán)G-250染色后可見6條蛋(見下示意圖) 。 副流感病毒通用PCR檢測試劑盒規(guī)格 肌動蛋白結(jié)合蛋白LIM蛋白3抗體(Z)-1-Methyl-2-(undec-6-enyl)quinolin-4(1H)-one別名: 分子式: C21H29NO性狀: Oil純度: 特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞: 中藥對照品;中藥標(biāo)準(zhǔn)品;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫 性鈣調(diào)蛋白3抗體Ifflaiamine別名: 分子式: C15H17NO2性狀: Powder純度: 97.5%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞: 植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫 磷化CD156b抗體Laurine別名: 10-Methoxyliriodenine; Oxolaureline分子式: C18H11NO4性狀: Yellow powder純度: 特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞: 中藥對照品;中藥標(biāo)準(zhǔn)品;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫 乙脫氫酶5抗體10-Hydroxycamptothecin別名: 分子式: C20H16N2O5性狀: Yellow powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞: 中藥對照品;中藥標(biāo)準(zhǔn)品;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫 乙脫氫酶6抗體Zanthobungeanine別名: 8-Methoxy-N-methylflindersine分子式: C16H17NO3性狀: Solid純度: 特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞: 中藥對照品;中藥標(biāo)準(zhǔn)品;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫 溶血磷脂?;D(zhuǎn)移酶5抗體Robustine別名: 分子式: C12H9NO3性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞: 中藥對照品;中藥標(biāo)準(zhǔn)品;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫 遺傳性失明相關(guān)蛋白AIPL1抗體Ravenine別名: 分子式: C15H17NO2性狀: Powder純度: 特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞: 植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫 免疫調(diào)節(jié)蛋白AIRE抗體Preskimmianine別名: 分子式: C17H21NO4性狀: Powder純度: 99.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞: 中藥對照品;中藥標(biāo)準(zhǔn)品;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫 |