產(chǎn)品特點: 1. 提取過程十分簡便,勻漿離心即可,整個過程只需要十幾分鐘。 2. 采用*的溫和裂解成分,蛋白保持天然活性。 3.適用于各種動植物組織材料,包括新鮮或冰凍的材料。 4. 得到的提取物可以直接用于SDS-PAGE、2D電泳、Western印跡分析以及蛋白活性測定等下游實驗。 5.一次可以處理100mg左右的樣品,足夠進(jìn)行幾十次SDS-PAGE mini膠電泳檢測。 產(chǎn)品屬性: 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 檢測方法 | 細(xì)胞膜/胞漿/核膜蛋白分步提取試劑盒 | 50T/100T | WB,IP,co-IP,ELISA,EMSA等 |
使用方法: 使用前,最好請在溶液A中加入自備的1M DTT溶液50μL。 一:勻漿法 ?注意:對致密的實體組織(如肌肉),最好用Polytron 式勻漿機勻漿處理。 1. 稱取動物或植物組織樣品100mg,剪刀剪成黃豆大小,轉(zhuǎn)移到10-15mL的塑料離心管中。 2. 加入1ml溶液A,在冰上用Polytron 式勻漿機勻漿,直到?jīng)]有肉眼可見的組織塊。為了避免產(chǎn)熱,可以分多次勻漿,其間放冰上讓勻漿液冷卻。 3. 將勻漿液全部轉(zhuǎn)移到1.5mL的塑料離心管中。 4. 4℃ 12000 g離心10分鐘,組織殘渣碎片將形成沉淀。 5. 將上清液轉(zhuǎn)移至一新的1.5mL塑料離心管中即得到蛋白溶液,可置于-70℃冰箱保存或立即使用。如果要測定蛋白濃度,請使用BCA方法,不要使用Bradford方法(如果要使用,也需要把樣品稀釋10倍后再測定,否則溶液A中的成分會影響濃度側(cè)定)。如果要進(jìn)行SDS-PAGE電泳,可取部分到離心管中,加入5×SDS-PAGE上樣緩沖液(終濃度為1×),在沸水中處理5分鐘后立即上樣電泳。 *氨基酸補充溶液(10X)100毫升小鼠泛素蛋白(Ub)ELISA試劑盒, 青鏈霉素混合液100毫升小鼠內(nèi)素(ET)ELISA試劑盒, 精制胎牛血清500毫升小鼠神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)ELISA試劑盒, 新生牛血清500毫升白介素10(IL-10)ELISA試劑盒--動物,人 無激素胎牛血清(活性碳/葡聚糖處理)100毫升卵清蛋白特異性IgG(OVA sIgG)ELISA試劑盒--動物,人 血清活性碳/葡聚糖處理試劑盒5次(1升)丙型肝炎IgM(HCV-IgM)ELISA試劑盒--動物,人 胰蛋白酶中和液100毫升內(nèi)皮素1(ET-1)ELISA試劑盒--動物,人 細(xì)胞培養(yǎng)細(xì)菌污染定性熒光檢測試劑盒20次流行性乙型腦炎抗體IgG(JE IgG)ELISA試劑盒--動物,人 細(xì)胞培養(yǎng)病毒污染溶斑法結(jié)晶紫染色試劑盒20次軍團(tuán)菌抗體IgM(LP Ab-IgM )ELISA試劑盒--動物,人 細(xì)胞培養(yǎng)病毒污染溶斑法中性紅染色試劑盒20次C肽(C-Peptide)ELISA試劑盒--動物,人 通用型細(xì)胞培養(yǎng)污染性支原體屬鑒定16S rDNA20次小鼠過敏素/補體片斷4a(C4a)ELISA試劑盒, PCR擴增檢測試劑盒小鼠骨膠原交聯(lián)(Cr)ELISA試劑盒, 細(xì)胞培養(yǎng)污染性支原體熒光染色鑒定試劑盒20/100次水痘帶狀皰疹病IgG(VZV-IgG)ELISA試劑盒--動物,人 細(xì)胞培養(yǎng)污染性支原體M.fermentans鑒定16S rDNA20次免疫反應(yīng)性生長激素(irGH)ELISA試劑盒--動物,人 PCR擴增檢測試劑盒狀腺原氨酸(T3)ELISA試劑盒--動物,人 細(xì)胞膜/胞漿/核膜蛋白分步提取試劑盒4EBP1 eIF4E結(jié)合蛋白抗體抗壞血酸 分析標(biāo)準(zhǔn)品 phospho-4EBP1(Ser64) 磷酸化4E結(jié)合蛋白1抗體抗壞血酸 ≥99.9998% (metals basis) phospho-4EBP1(Thr37/46) 磷酸化4E結(jié)合蛋白1抗體苯甲 99.7%,無水級 phospho-4EBP1 (Ser65/Thr70) 磷酸化eIF4E結(jié)合蛋白抗體檸檬酸鉍銨 99% 5-HT 5-羥色抗體乙酰苯 99.95%,升華純化 5-HTR1A 5-羥色受體1A抗體對氨基偶氮苯 分析標(biāo)準(zhǔn)品 5-HTR1B 5-羥色受體1B抗體偶氮熒光桃紅 Dye content 90 % 5-HTR2B 5-羥色受體2B抗體全反式-β-阿林胡蘿卜 96% 注意事項: 1.如果4℃ 12000g離心10分鐘后得到的上清液中還有可見的沉淀,可以將上清轉(zhuǎn)移到一個新的離心管中后再4℃ 12000g離心10分鐘,以去除可見的小碎片。 2.植物組織中存在有大量的多酚、多糖、色素、次生代謝產(chǎn)物,如果需要除去植物蛋白樣品中殘存的色素等雜質(zhì),可以在最后得到的上清液中加入5倍體積的冷丙酮或冷甲醇,混勻后-20℃放置1小時或過夜,然后4℃,12000rpm離心10min,棄上清后室溫風(fēng)干,然后將樣品溶于自備的后續(xù)實驗緩沖液中即可。經(jīng)過此純化處理后,部分蛋白質(zhì)可能會發(fā)生變性,不能再用于活性檢測。
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