產(chǎn)品僅用于科研注意事項(xiàng)：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時(shí)間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué)；8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
產(chǎn)品名稱：螺桿菌通用PCR檢測(cè)試劑盒說明書
英文名稱：Helicobacter spp.PCR
編號(hào)：HE31065-R
類別:PCR檢測(cè)試劑盒
儲(chǔ)存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸：低溫、避光，快遞免費(fèi)送貨上門。
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儲(chǔ)需要自備的器材：
1．儀器：分析天平、離心機(jī)、熒光 PCR 擴(kuò)增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器（2 µL、20
µL、200 µL、1000 µL）。
2．耗材：熒光 PCR 反應(yīng)管、眼科剪、眼科鑷、鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯（DEPC）水
處理的滅菌離心管、吸頭（10 µL、200 µL、1000 µL）、滅菌雙蒸水。
特點(diǎn)：
1.即開即用，用戶只需要提供樣品 DNA 模板，操作簡(jiǎn)單，定量準(zhǔn)確快速。
2. 引物經(jīng)過優(yōu)化，特異性強(qiáng)。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長(zhǎng)度為 560 bp。
3. PCR mix 中含上樣染料，PCR 后可以直接上樣電泳。
4. 提供陽(yáng)性對(duì)照，便于分析試驗(yàn)結(jié)果。
保存條件：
僅用于科研14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè)，請(qǐng)按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
氨基甲酸甲酯/氨基甲酸甲脂/甲基烏來坦/尿基烷/胺甲酸甲酯/甲烏來坦/氨基脲烷/Urethylane 包裝;1g

迭氮*基硅烷/*基甲硅烷基疊氮的化合物/疊氮*基硅烷/*基疊氮化硅/疊氮化*基硅烷/疊氮基*基硅烷/Azidotrimethylsilane 包裝;1g

對(duì)羥基苯/4’-羥基苯/對(duì)丙?；椒?對(duì)甲氧苯乙酮/4′-Hydroxypropiophenone 包裝;5g

對(duì)苯二甲酰氯/1,4-苯二碳酰二氯/對(duì)酞酰氯/對(duì)苯二酰二氯/對(duì)苯二酰氯/氯化對(duì)苯二甲酰/對(duì)苯二甲酰二氯/對(duì)酞酰二氯/TCI/TPC 包裝;1g

4-氟-3-氯/氟氯/3-氯-4-氟/3-氨基-6-氟氯苯/3-Chloro-4-fluoroaniline 包裝;5g

乙酸甲脒/甲脒醋酸/甲脒乙酸酯/醋酸甲脒/甲脒乙酸鹽/醋酸甲醚/乙酸甲醚/Formamidinium acetate 包裝;1g

異香蘭酸/3-羥基-4-甲氧基苯甲酸/異香草酸/原兒茶酸-4-甲基醚/原兒茶酸-4-甲醚/Isovanillic acid 包裝;1g

焦磷酸四芐酯/焦磷酸四芐基酯/Tetrabenzyl pyrophosphate 包裝;250mg

3-吲哚甲醛/吲哚-3-甲醛/3-醛基吲哚/1H-吲哚-3-甲醛/3-甲醛吲哚/Indole-3-carboxaldehyde 包裝;5g

甲基異丙/3-甲基-2-丁酮/3-甲基丁酮/1，1-二甲基/甲基異丙基酮/異丙基甲/3-甲-2-丁酮/MIPK 包裝;100mg

十九酸甲酯/正十九酸甲酯/十九烷酸甲酯/十九碳酸甲酯/十九烷基甲酯/Methyl nonadecanoate 包裝;25mg

4-甲基-3-戊烯-2-酮/甲基異甲酮/甲基戊烯酮/米基化氧/亞異丙基/異丙叉/異基/異丙亞基/Mesityl oxide 包裝;25g

嘧啶/間(二)氮苯/間二嗪/2-氨基-4-甲氧基嘧啶/2-甲硫基嘧啶/嘧啶堿/Pyrimidine 包裝;5g

3-氨基-1,2-丙二酮/3-氨基-1,2-/1-氨基-2,3-/3-氨基甘油/2,3-二羥基胺氨/2,3-二羥基丙胺/3-氨基-1,2-丙烷二醇/氨基/3-Ami,2-propanediol 包裝;100g

鄰羥基芐醇/2-羥基苯甲醇/楊醇/鄰羥基苯甲醇/2-羥基芐醇/Salicyl alcohol 包裝;25g

1-苯基-1,2-丙二酮/甲基苯基乙二酮/1-苯-1,2-丙二酮/乙酸苯甲酸/Acetyl benzoyl 包裝;10g

氧化氘/重/Deuterium oxide 包裝;50g
螺桿菌通用PCR檢測(cè)試劑盒說明書Bacillus│timonensis 中文名稱：芽胞桿菌(加詞待譯)種屬:Bacillus│timonensis分離基物:樣/養(yǎng)豬場(chǎng)沼氣池沼液提供形式:斜面培養(yǎng)物模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:潛在的生物轉(zhuǎn)化微生物/未經(jīng)過單菌驗(yàn)證的反硝化菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:33生長(zhǎng)條件:28℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法 純度：98%

Bacillus│cohnii 中文名稱：科氏芽胞桿菌種屬:Bacillus│cohnii分離基物:沉積物/TVG表層沉積物提供形式:凍干物模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:潛在的有機(jī)污染物降解菌/分離自十溴聯(lián)苯醚富集菌群培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471生長(zhǎng)條件:28℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法 純度：98%

Erythrobacter│vulgaris 中文名稱：普通赤桿菌種屬:Erythrobacter│vulgaris分離基物:沉積物/硫化物提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471生長(zhǎng)條件:28℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法 純度：98%

Brachybacterium│sacelli 中文名稱：教堂小短桿菌種屬:Brachybacterium│sacelli分離基物:沉積物/箱式樣品提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:海洋放線菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471生長(zhǎng)條件:28℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法 純度：98%

Lentibacillus│sp. 中文名稱：慢生芽孢桿菌種屬:Lentibacillus│sp.分離基物:沉積物/重力活塞取樣提供形式:凍干物模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:潛在的新種培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471生長(zhǎng)條件:28℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法 純度：98%

Aquimarina│spongiae 中文名稱：海綿海桿菌種屬:Aquimarina│spongiae分離基物:生物樣/海綿提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:yes應(yīng)用領(lǐng)域:模式菌株:培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471生長(zhǎng)條件:30℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法 純度：99%

Aquimarina│gracilis 中文名稱：海桿菌(加詞待譯)種屬:Aquimarina│gracilis分離基物:生物樣/貽貝腸道內(nèi)容物提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:yes應(yīng)用領(lǐng)域:模式菌株:培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471生長(zhǎng)條件:25℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法 純度：99%

Pseudochrobactrum│kiredjianiae 中文名稱：克氏假蒼白桿菌種屬:Pseudochrobactrum│kiredjianiae分離基物:沉積物/表層沉積物提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:潛在的無機(jī)污染物抗性菌/分離自Cr富集菌群培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:1001生長(zhǎng)條件:28℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法 純度：97%,含0.1 % 對(duì)苯二酚 穩(wěn)定劑
反應(yīng)五要素：
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長(zhǎng)度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布，避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會(huì)形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì)，以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)， 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn)， 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
技術(shù)原理：
DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈，在DNA聚合酶與啟動(dòng)子的參與下，根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。
在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，DNA在高溫時(shí)也可以發(fā)生變性解鏈，當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此，通過溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性，并設(shè)計(jì)引物做啟動(dòng)子，加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。（ DNA高溫變性低溫復(fù)性）
產(chǎn)品僅用于科研發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對(duì)于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義，該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活，不需要每個(gè)循環(huán)加酶，使PCR技術(shù)變得非常簡(jiǎn)捷、同時(shí)也大大降低了成本，PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用，并逐步應(yīng)用于臨床。