產(chǎn)品名稱(chēng):葡萄糖-6-磷酸酶(G6Pase)試劑盒規(guī)格 規(guī)格:48樣、96樣、 貨號(hào):GOY-016527 檢測(cè)方法:可見(jiàn)分光光度法、微板法 產(chǎn)品分類(lèi):碳水化合物代謝系列 公司產(chǎn)品僅用于科研貯存溫度:2~8℃。 本試劑盒保質(zhì)期:6個(gè)月 【實(shí)驗(yàn)前溶液配制】 配液1、將2X濃縮復(fù)溶液用去離子水按照1:1稀釋(1 份濃縮復(fù) 溶液+1份去離子水)用于樣本的復(fù)溶。 配液2、將40ml濃縮洗滌液(20倍濃縮)用去離子水按照1:19 稀釋(1份濃縮洗滌液+19份去離子水),或按 所需用量 配制洗滌液。 配液3、將30X濃縮樣品提取液用去離子水按照1:29稀釋(1份 濃縮洗滌液+29份去離子水),或按所需用量配制洗滌液。 【所用儀器、試劑】 儀 器:微孔板酶標(biāo)儀450nm/630nm、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀/氮?dú)獯蹈裳b 置、均質(zhì)器、振蕩器、離心機(jī)、刻度移液管、天平(感量0.01g ) 微量移液器:單道 20μl~200μl、100μl~1000μl、多道 250μl 試 劑:乙腈、中性氧化鋁
測(cè)定步驟: 1、 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至450nm。 2、 試劑三的稀釋?zhuān)簩⒃噭┤谜麴s水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。 3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測(cè)定樣本較少,可按照實(shí)際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制) 4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內(nèi)用完)。 5、 樣本測(cè)定(在96孔板中依次加入下列試劑) 選擇抗凝的注意點(diǎn): ①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致; ②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固; ③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿); ④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后用于測(cè)定。 紅色紅曲血液尿激(UROKINASE)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒人膜輔(MCP/CD46)試劑盒 Erwinia aphidicola 體液尿激(UROKINASE)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒人延伸A(EloA)試劑盒 燕麥狀曲霉細(xì)胞肌激(CK)總活性比色法定量檢測(cè)試劑盒人化激(ASP)試劑盒 間胞囊菌組織肌激(CK)總活性比色法定量檢測(cè)試劑盒人殺菌性/通透性增加(BPI)試劑盒 白蘑菇體液肌激(CK)總活性比色法定量檢測(cè)試劑盒人外基質(zhì)糖(MEPE)試劑盒 白地霉細(xì)胞肌激(CK)總活性連續(xù)循環(huán)比色法人復(fù)制A(RPA-70)試劑盒 冬菇定量檢測(cè)試劑盒人軟骨寡聚基質(zhì)(COMP)試劑盒 白色鹽多孢菌組織肌激(CK)總活性連續(xù)循環(huán)比色法人抗原提呈相關(guān)轉(zhuǎn)運(yùn)/T活化(TAP)試劑盒 紫色團(tuán)胞鏈霉菌定量檢測(cè)試劑盒人免疫抑制性(IAP)試劑盒 運(yùn)動(dòng)節(jié)桿菌體液肌激(CK)總活性連續(xù)循環(huán)比色法人麥角IgA(Gliadin-IgA)試劑盒 粘孢白僵菌定量檢測(cè)試劑盒人發(fā)動(dòng)2(DNM2)試劑盒 釀酒酵母細(xì)胞肌激同工肌肉型(CK-MM)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒人著絲粒B(CENP-B)試劑盒 運(yùn)動(dòng)節(jié)桿菌組織肌激同工肌肉型(CK-MM)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒人巨噬激(MSP)試劑盒 產(chǎn)黃青霉體液肌激同工肌肉型(CK-MM)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒人雷帕霉靶(mTOR)試劑盒 藍(lán)伏革菌細(xì)胞肌激同工肌肉型(CK-MM)活性連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測(cè)試劑盒人核基質(zhì)22(NMP-22)試劑盒 畢赤酵母組織肌激同工肌肉型(CK-MM)活性連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測(cè)試劑盒人軟骨寡聚(COMP)試劑盒 枯草芽孢桿菌體液肌激同工肌肉型(CK-MM)活性連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測(cè)試劑盒人多藥耐藥相關(guān)(MRP)試劑盒 貝倫格葡萄座腔菌梨生專(zhuān)化型細(xì)胞肌激同工腦型(CK--BB)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒人高速泳動(dòng)17(HMG-17)試劑盒 Rhizobium nepotum組織肌激同工腦型(CK--BB)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒人空泡相關(guān)A(VacA)試劑盒 冷生明串珠菌體液肌激同工腦型(CK--BB)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒人玻連/體外粘連(VN/CD51+CD61)試劑盒 葡萄糖-6-磷酸酶(G6Pase)試劑盒規(guī)格內(nèi)切-α-甘露聚糖檢測(cè)試劑盒整合α6抗體 α-甘露糖檢測(cè)試劑盒擬南芥IKI3抗體 維生P檢測(cè)試劑盒白介5抗體 超氧化物歧化檢測(cè)試劑盒白介-1受體相關(guān)激1抗體 中性檢測(cè)試劑盒整合α5抗體Integrin α5 抗壞血氧化檢測(cè)試劑盒整合β1/Integrin β1抗體 D-半乳糖酯還原檢測(cè)試劑盒整合αVβ3抗體 肌加氧檢測(cè)試劑盒胰島樣生長(zhǎng)因子2 mRNA 結(jié)合3抗體 操作步驟: 實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量,如樣品濃度過(guò)高時(shí),應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋?zhuān)允瓜♂尯蟮臉悠贩显噭┖械臋z測(cè)范圍,計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。 1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?/span>100μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。 2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl(在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。 3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。 4. 每孔加檢測(cè)溶液B工作液(同檢測(cè)A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。 5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。 6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見(jiàn)標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。 7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。 8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后立即進(jìn)行檢測(cè)。
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