產(chǎn)品名稱：甜菜堿(Betaine)試劑盒品牌

規(guī)格：48樣、96樣、

貨號(hào)：GOY-016344

檢測(cè)方法：可見分光光度法、微板法

產(chǎn)品分類：氧化應(yīng)激系列

公司產(chǎn)品僅用于科研貯存溫度：2～8℃。

本試劑盒保質(zhì)期：6個(gè)月

【實(shí)驗(yàn)前溶液配制】

配液1、將2X濃縮復(fù)溶液用去離子水按照1:1稀釋(1 份濃縮復(fù)

溶液+1份去離子水)用于樣本的復(fù)溶。

配液2、將40ml濃縮洗滌液(20倍濃縮)用去離子水按照1:19

稀釋(1份濃縮洗滌液+19份去離子水),或按 所需用量

配制洗滌液。

配液3、將30X濃縮樣品提取液用去離子水按照1:29稀釋(1份

濃縮洗滌液+29份去離子水),或按所需用量配制洗滌液。

【所用儀器、試劑】

儀        器:微孔板酶標(biāo)儀450nm/630nm、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀/氮?dú)獯蹈裳b

置、均質(zhì)器、振蕩器、離心機(jī)、刻度移液管、天平(感量0.01g )

微量移液器:單道 20μl~200μl、100μl~1000μl、多道 250μl

試            劑:乙腈、中性氧化鋁

測(cè)定步驟：

1、 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長至450nm。

2、 試劑三的稀釋：將試劑三用蒸餾水稀釋50倍，用多少配多少。（試劑三和蒸餾水1：49稀釋。

3、 工作液配制：在試劑一加入100μl試劑二，充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。（若一次性測(cè)定樣本較少，可按照實(shí)際用量將試劑一和試劑二按照20ml：0.1ml的比例混勻配制）

4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解（溶解后一周內(nèi)用完）。

5、 樣本測(cè)定（在96孔板中依次加入下列試劑）

選擇抗凝的注意點(diǎn)：

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致，同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒，充分抗凝，防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多（1ml抗凝全血能分離出0.4～0.5ml血漿）;

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后，解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁，如有則需要離心去掉渾濁后用于測(cè)定。

膠柱頭孢霉屬APC（抗人；抗兔；抗小鼠；抗大鼠）人多聚血清(PHSA)試劑盒

Paenibacillus taichungensisCDK2（抗人；抗兔；抗小鼠；抗大鼠）人非元性烯化(NNE)試劑盒

植物乳桿菌CDK3（抗人；抗兔；抗小鼠；抗大鼠）人3特異性抗中性粒胞質(zhì)抗體(PR3-ANCA)試劑盒

大腸埃希氏菌CDK4（抗人；抗兔；抗小鼠；抗大鼠）人黑色激(MSH)試劑盒

深藍(lán)紫色桿菌CDK6（抗人；抗兔；抗小鼠；抗大鼠）人巨噬趨化因子(MCF)試劑盒

大腸埃希菌P16（抗人；抗兔；抗小鼠；抗大鼠）人葡萄球菌A(SPA)試劑盒

玉米黑粉菌P21（抗人；抗兔；抗小鼠；抗大鼠）人酪氨羥化(TH)試劑盒

香菇Cr04P27（抗人；抗兔；抗小鼠；抗大鼠）人葡萄糖氧化(GOD)試劑盒

大腸埃希氏桿菌P35（抗人；抗兔；抗小鼠；抗大鼠）人普通急性淋巴白血病抗原(CALLA)試劑盒

尖孢鐮孢P35/P25（抗人；抗兔；抗小鼠；抗大鼠）人膜攻擊復(fù)合物(MAC)試劑盒

彩色豆馬勃Annexin V（抗人；抗兔；抗小鼠；抗大鼠）人胎盤催乳(HPL)試劑盒

熒光假單胞菌PAR-1（抗人；抗兔；抗小鼠；抗大鼠）人胎盤(PP)試劑盒

尖孢鐮刀菌PAR-2（抗人；抗兔；抗小鼠；抗大鼠）人胎盤核糖核抑止劑(HPRI)試劑盒

扁柄側(cè)耳PAR-3（抗人；抗兔；抗小鼠；抗大鼠）人胃泌抗體(GCA)試劑盒

紅曲紅曲PARP（抗人；抗兔；抗小鼠；抗大鼠）人纖維連接相關(guān)抗原(FRA)試劑盒

褐囊蜜環(huán)菌AKT（抗人；抗兔；抗小鼠；抗大鼠）人乙酯(ChE)試劑盒

釀酒酵母P38（抗人；抗兔；抗小鼠；抗大鼠）人鞭毛(flagellin)試劑盒

枯草芽孢桿菌PDGF-A（抗人；抗兔；抗小鼠；抗大鼠）人α烯化(α-enolase)試劑盒

黑曲霉PDGF-B（抗人；抗兔；抗小鼠；抗大鼠）人不透光相關(guān)(OPAs)試劑盒

釀酒酵母VEGF（抗人；抗兔；抗小鼠；抗大鼠）人重去甲腎上腺(NE-B)試劑盒
甜菜堿(Betaine)試劑盒品牌幾丁質(zhì)檢測(cè)試劑盒A型病H9N1血凝型抗體

己糖激檢測(cè)試劑盒人類狀瘤病33抗體

交替氧化檢測(cè)試劑盒A型病H1N1抗體

精氨檢測(cè)試劑盒甲型肝炎病聚VP1抗體

抗壞血過氧化物檢測(cè)試劑盒造血干特異性抗體

可溶性質(zhì)檢測(cè)試劑盒轉(zhuǎn)化生長因子β1誘導(dǎo)轉(zhuǎn)錄因子1抗體

可溶性淀粉檢測(cè)試劑盒同源盒C6抗體

可溶性糖檢測(cè)試劑盒同源盒C4抗體

操作步驟:

實(shí)驗(yàn)開始前，各試劑均應(yīng)平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試劑或樣品稀釋時(shí)，均需混勻，混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量，如樣品濃度過高時(shí)，應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍，計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。

1.        加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔?？瞻卓准訕悠废♂屢?/span>100μl，余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜，37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性，每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

2.        棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl（在使用前一小時(shí)內(nèi)配制），酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。

3.        溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

4.        每孔加檢測(cè)溶液B工作液（同檢測(cè)A工作液） 100μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。

5.        溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

6.        依序每孔加底物溶液90μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內(nèi)，此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。

7.       依序每孔加終止溶液50μl，終止反應(yīng)，此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。

8.       用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測(cè)量各孔的光密度（OD值）。在加終止液后立即進(jìn)行檢測(cè)。