產(chǎn)品名稱:尼氏單孢子蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū) 英文名稱:Haplosporidium nelsoniPCR 編號(hào):HE31061-R 類別:PCR檢測(cè)試劑盒 儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。 運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門(mén)。 產(chǎn)品僅用于科研注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。 ? 反應(yīng)五要素: 參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則: ①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。 ②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。 ③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。 ④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。 ⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。 ⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。 ⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。 引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。 技術(shù)原理: DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動(dòng)子的參與下,根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。 在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時(shí)也可以發(fā)生變性解鏈,當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此,通過(guò)溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性,并設(shè)計(jì)引物做啟動(dòng)子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。( DNA高溫變性低溫復(fù)性) 產(chǎn)品僅用于科研發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對(duì)于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個(gè)循環(huán)加酶,使PCR技術(shù)變得非常簡(jiǎn)捷、同時(shí)也大大降低了成本,PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用,并逐步應(yīng)用于臨床。 儲(chǔ)需要自備的器材: 1.儀器:分析天平、離心機(jī)、熒光 PCR 擴(kuò)增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器(2 µL、20 µL、200 µL、1000 µL)。 2.耗材:熒光 PCR 反應(yīng)管、眼科剪、眼科鑷、鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯(DEPC)水 處理的滅菌離心管、吸頭(10 µL、200 µL、1000 µL)、滅菌雙蒸水。 特點(diǎn): 1.即開(kāi)即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡(jiǎn)單,定量準(zhǔn)確快速。 2. 引物經(jīng)過(guò)優(yōu)化,特異性強(qiáng)。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長(zhǎng)度為 560 bp。 3. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。 4. 提供陽(yáng)性對(duì)照,便于分析試驗(yàn)結(jié)果。 保存條件: 僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法 1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。 2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。 3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。 4. 組織勻漿:將組織加入適量鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。 5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。 氫氧化銫/氫氧化銫一合物/Cesium hydroxide monohydrate 包裝;500g 1,1,2,2-四溴乙烷/對(duì)稱四溴乙烷/對(duì)稱四溴化乙炔/四溴化乙炔/四溴乙烷/均四溴乙烷/四溴乙烷ZC-4/Acetylene tetrabromide 包裝;5g 3,5-二氯楊酸/3,5-二氯鄰羥基苯甲酸/3,5-二氯鄰羥基苯甲酸/3,5-Dichlorosalicylic acid 包裝;25g 對(duì)苯醌/2,5-環(huán)己二烯-1,4-二酮/苯醌/對(duì)苯二酮/對(duì)醌/1,4-苯醌/1,4-苯二酮/p-Benzoquinone 包裝;5g β-巰基乙胺/半胱胺/巰乙胺/巰基乙胺/2-氨基乙硫醇/2-巰基乙胺/硫化乙醇胺/2-氨基乙硫/Cysteamine 包裝;5MG β-巰基乙胺鹽酸鹽/2-氨基乙硫醇鹽酸鹽/半胱胺鹽酸鹽/鹽酸半胱氨/Cysteamine hydrochloride 包裝;10mg 代硫代乙酰膽堿/2-(乙酰硫代)-N,N,N-*基乙銨化物/化硫代乙酰膽堿/化乙酰硫代膽堿/化-S-乙酰硫代膽堿/乙酸-N-(2-巰基乙基)*基化銨/S-乙酰硫代膽堿化物/Acetylthiocholine iodide 包裝;25ml 亞硝基二乙基胺/N-亞硝基二乙胺/N-二乙基亞硝胺/N-亞硝基二乙基胺/二乙基亞硝胺/N-Nitrosodiethylamine 包裝;50ml ??略碥赵?海柯吉寧/??略磉霸?(25R)-5α-螺甾(烷)-3β-醇-12-酮/(3β,5α,25R)-3-羥基螺甾(烷)-12-酮/海可吉寧/番麻皂素/Hecogenin 包裝;100g 正十二硫醇/正十二硫醇/月桂硫醇/正十二烷硫醇/1-十二硫醇/1-巰基代十二烷/十二烷基硫醇/正十二烷基硫醇/十二碳烷硫醇/月桂二醇/1-十二烷基硫醇/十二硫醇/1-Dodecanethiol 包裝;25g 乙酸桂酯/乙酸 3-苯基烯丙酯/N-肉桂酰-N-苯基羥胺/醋酸桂酯/醋酸肉桂酯/肉桂醇乙酸酯/3-苯基-2--1-醇乙酸酯/3-苯基-2-丙炔乙酯/Cinnamyl acetate 包裝;25g 2 4 6-三磺酸/三磺酸/苦基磺酸/TNBS 包裝;5g 聚酸/2-酸均聚物/酸類樹(shù)脂涂料/酸樹(shù)脂/酸單體聚合物/酸改性樹(shù)脂/酸樹(shù)脂乳液/聚羧乙烯/卡波沫/卡波姆樹(shù)脂/Poly(acrylic acid) 包裝;100g 1,3-二羥基萘/1,3-萘二酚/萘間二酚/間萘二酚/間二萘酚/1,3-Dihydroxynaphthalene 包裝;25g 硫代乳酸/β-巰基丙酸/硫代丙醇酸/巰基丙酸/3-巰基丙酸/β-硫代丙醇酸/β-硫氫基丙酸/3-硫代乳酸/3-Mercaptopropionic acid 包裝;1g 六氟異丙醇/1,1,1,3,3,3-六氟-2-丙醇/1,1,1,3,3,3-六氟代-2-丙醇/1,1,1,3,3,3-六氟異丙醇/HFIP 包裝;250mg 三氯化/Iodine trichloride 包裝;100g 尼氏單孢子蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)Achromobacter│ruhlandii 中文名稱:拉氏無(wú)色桿菌種屬:Achromobacter│ruhlandii分離基物:樣/污油處理池污提供形式:凍干物模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:有機(jī)污染物降解菌/石油,柴油等烷烴類物質(zhì)降解菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:33生長(zhǎng)條件:28℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:99% Kluyvera│georgiana 中文名稱:佐治亞克呂沃爾氏菌種屬:Kluyvera│georgiana分離基物:生物樣/野生鯔魚(yú)腸道內(nèi)容物提供形式:凍干物模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:共生微生物/野生鯔魚(yú)腸道共生菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:33生長(zhǎng)條件:28℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:99% Zobellella│denitrificans 中文名稱:脫氮卓貝爾氏菌種屬:Zobellella│denitrificans分離基物:沉積物/沉積物提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:yes應(yīng)用領(lǐng)域:模式菌株:培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471生長(zhǎng)條件:30-35℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:99% Bowmanella│denitrificans 中文名稱:脫氮鮑曼氏菌種屬:Bowmanella│denitrificans分離基物:樣/表層海提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:yes應(yīng)用領(lǐng)域:模式菌株:培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471生長(zhǎng)條件:30-35℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:99% Shewanella│baltica 中文名稱:波羅的海希瓦氏菌種屬:Shewanella│baltica分離基物:生物樣/比目魚(yú)腸道內(nèi)容物提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:共生微生物/比目魚(yú)腸道共生菌 產(chǎn)酶微生物/蛋白酶培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:33生長(zhǎng)條件:28℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:99% Corynebacterium│variabile 中文名稱:變異棒桿菌種屬:Corynebacterium│variabile分離基物:生物樣/比目魚(yú)腸道內(nèi)容物提供形式:凍干物模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:共生微生物/比目魚(yú)腸道共生菌 產(chǎn)酶微生物/脂酶(三丁酸甘油酯)培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:33生長(zhǎng)條件:28℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:95% Bacillus│hwajinpoensis 中文名稱:花津浦芽孢桿菌種屬:Bacillus│hwajinpoensis分離基物:生物樣/野生鯔魚(yú)腸道內(nèi)容物提供形式:凍干物模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:共生微生物/野生鯔魚(yú)腸道共生菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:33生長(zhǎng)條件:28℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:95% Bacillus│xiamenensis 中文名稱:廈門(mén)芽胞桿菌種屬:Bacillus│xiamenensis分離基物:生物樣/野生鯔魚(yú)腸道內(nèi)容物提供形式:凍干物模式菌株:yes應(yīng)用領(lǐng)域:模式菌株:;共生微生物/野生鯔魚(yú)腸道共生菌;產(chǎn)酶微生物/淀粉酶、蛋白酶、脂酶(三丁酸甘油酯);已測(cè)全基因組草圖(賴)培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:33生長(zhǎng)條件:28℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:≥99% |