產(chǎn)品名稱:Caspase-3活性測(cè)定試劑盒價(jià)格 規(guī)格:24樣、48樣、 貨號(hào):GOY-016714 檢測(cè)方法:可見(jiàn)分光光度法、微板法 產(chǎn)品分類:醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)代謝指標(biāo) 公司產(chǎn)品僅用于科研貯存溫度:2~8℃。 本試劑盒保質(zhì)期:6個(gè)月 【實(shí)驗(yàn)前溶液配制】 配液1、將2X濃縮復(fù)溶液用去離子水按照1:1稀釋(1 份濃縮復(fù) 溶液+1份去離子水)用于樣本的復(fù)溶。 配液2、將40ml濃縮洗滌液(20倍濃縮)用去離子水按照1:19 稀釋(1份濃縮洗滌液+19份去離子水),或按 所需用量 配制洗滌液。 配液3、將30X濃縮樣品提取液用去離子水按照1:29稀釋(1份 濃縮洗滌液+29份去離子水),或按所需用量配制洗滌液。 【所用儀器、試劑】 儀 器:微孔板酶標(biāo)儀450nm/630nm、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀/氮?dú)獯蹈裳b 置、均質(zhì)器、振蕩器、離心機(jī)、刻度移液管、天平(感量0.01g ) 微量移液器:單道 20μl~200μl、100μl~1000μl、多道 250μl 試 劑:乙腈、中性氧化鋁
測(cè)定步驟: 1、 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至450nm。 2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。 3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測(cè)定樣本較少,可按照實(shí)際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制) 4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內(nèi)用完)。 5、 樣本測(cè)定(在96孔板中依次加入下列試劑) 選擇抗凝的注意點(diǎn): ①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致; ②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固; ③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿); ④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后用于測(cè)定。 格氏乳球菌NINHYDRIN質(zhì)濃度定量試劑盒兔可溶性凋亡相關(guān)因子(sFAS/Apo-1)試劑盒 脫皮毛球馬勃*NITRATION質(zhì)濃度定量試劑盒人可溶性因子受體(sCKR)試劑盒 金灰青霉FRUORESCAMINE質(zhì)濃度熒光定量試劑盒人可溶性凋亡相關(guān)因子配體(sFASL)試劑盒 香菇處理試劑專題人可溶性血纖單體復(fù)合物(SFMC)試劑盒 黑曲霉名稱人結(jié)腸癌抗原(CCA)試劑盒 蒼白桿菌屬活性穩(wěn)定液小鼠結(jié)腸癌抗原(CCA)試劑盒 灰黃鏈霉菌飽和溶液人可溶性腫瘤壞死因子α受體(sTNFαR)試劑盒 巴氏醋桿菌動(dòng)物細(xì)胞融解液人空腸彎曲菌黏附(PEB1)試劑盒 大腸埃希菌細(xì)菌融解液人可溶性轉(zhuǎn)鐵受體(sTfR)試劑盒 釀酒酵母儲(chǔ)存液人萊姆IgG(Lyme-IgG)試劑盒 木拉克酵母屬變性液人痢疾內(nèi)阿米巴抗原ELISA Kit,48T/96T )試劑盒 植物乳桿菌膜溶解緩沖液人抗脂抗體(Apl/APA)試劑盒 耐熱鹽土生古菌鹽析法大量濃縮沉淀試劑盒人發(fā)動(dòng)(DNM2)試劑盒 枯草芽孢桿菌枯草亞種三氯醋小量濃縮沉淀試劑盒人狼瘡抗凝抗體(LAC/LA)試劑盒 隆紋黑蛋巢定量樣品預(yù)處理試劑人抗流行性出血熱病抗體IgG (EHF)試劑盒 樟疫霉核-結(jié)合凝膠電泳定量分析(McKay)試劑專題人流行性腮腺炎(EP)試劑盒 釀酒酵母名稱人雄激結(jié)合(ABP)試劑盒 黑曲霉同位核-結(jié)合凝膠電泳定量分析(McKay)試劑盒人硫褪黑色(MS)試劑盒 灰孔多年臥孔菌5’末端DNA探針同位([γ32P]ATP)激標(biāo)記試劑盒人麻疹病(MV)試劑盒 漏斗狀側(cè)耳體復(fù)合物制備試劑盒人麥角IgA(Gliadin-IgA)試劑盒 Caspase-3活性測(cè)定試劑盒價(jià)格維生B3檢測(cè)試劑盒HOOK1抗體 維生B7檢測(cè)試劑盒人類免疫缺陷病2型/2型艾滋病病gp41+gp160抗體 鈣粘檢測(cè)試劑盒人類免疫缺陷病2型/2型艾滋病病gp41+gp160抗體 Va檢測(cè)試劑盒HCG3抗體 Ⅷa檢測(cè)試劑盒HER4抗體 順烏頭檢測(cè)試劑盒肝結(jié)合性表皮生長(zhǎng)因子抗體 化脾臟酪氨激檢測(cè)試劑盒肺癌相關(guān)8抗體 抗壞血過(guò)氧化物檢測(cè)試劑盒型肝炎病NS5A抗體 操作步驟: 實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量,如樣品濃度過(guò)高時(shí),應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍,計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。 1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?/span>100μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。 2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl(在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。 3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。 4. 每孔加檢測(cè)溶液B工作液(同檢測(cè)A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。 5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。 6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見(jiàn)標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。 7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。 8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后立即進(jìn)行檢測(cè)。
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