產(chǎn)品名稱:幾丁質(zhì)酶試劑盒品牌 規(guī)格:24樣、48樣、 貨號:GOY-016524 檢測方法:可見分光光度法、微板法 產(chǎn)品分類:碳水化合物代謝系列 公司產(chǎn)品僅用于科研貯存溫度:2~8℃。 本試劑盒保質(zhì)期:6個月 【實驗前溶液配制】 配液1、將2X濃縮復(fù)溶液用去離子水按照1:1稀釋(1 份濃縮復(fù) 溶液+1份去離子水)用于樣本的復(fù)溶。 配液2、將40ml濃縮洗滌液(20倍濃縮)用去離子水按照1:19 稀釋(1份濃縮洗滌液+19份去離子水),或按 所需用量 配制洗滌液。 配液3、將30X濃縮樣品提取液用去離子水按照1:29稀釋(1份 濃縮洗滌液+29份去離子水),或按所需用量配制洗滌液。 【所用儀器、試劑】 儀 器:微孔板酶標(biāo)儀450nm/630nm、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀/氮氣吹干裝 置、均質(zhì)器、振蕩器、離心機、刻度移液管、天平(感量0.01g ) 微量移液器:單道 20μl~200μl、100μl~1000μl、多道 250μl 試 劑:乙腈、中性氧化鋁
測定步驟: 1、 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至450nm。 2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。 3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測定樣本較少,可按照實際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制) 4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內(nèi)用完)。 5、 樣本測定(在96孔板中依次加入下列試劑) 選擇抗凝的注意點: ①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致; ②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固; ③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿); ④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后用于測定。 腸炎沙門氏菌通用型魚濾過性毒菌敗血癥(Viral Haemorrhagic Septicaemia)信號傳導(dǎo)轉(zhuǎn)錄激活因子4(STAT4)檢測試劑盒 大腸桿菌基因檢測試劑盒Toll樣受體2(TLR2)檢測試劑盒 弗氏志賀氏菌通用型魚傳染性造血壞疽?。?/span>Infectious Haematopoietic Necrosis;IHN)基因檢測試劑盒骨鈣(OC)檢測試劑盒 地衣芽胞桿菌通用型魚傳染性胰腺壞疽?。?/span>Infectious Pancreatic Necrosis;IPN)基因檢測試劑盒UDP葡萄糖葡萄糖基轉(zhuǎn)移(UGCG)檢測試劑盒 產(chǎn)色鏈霉菌通用型鯉魚春季病毒血癥(Spring Viraemia of Carp;SVC)胰島(INS)檢測試劑盒 黃曲霉基因檢測試劑盒胱天7(CASP7)檢測試劑盒 蠟狀芽孢桿菌通用型魚氣單細(xì)胞菌屬(Aeromonas salmonicida)胱天7(CASP7)檢測試劑盒 尖孢鐮刀菌基因檢測試劑盒胱天7(CASP7)檢測試劑盒 假單胞菌屬通用型魚細(xì)菌性腎病(Bacterial Kidney Disease)基因檢測試劑盒激肽釋放4(KLK4)檢測試劑盒 異常威克漢姆酵母通用型魚傳染性胰腺壞疽?。?/span>Infectious Pancreatic Necrosis)激肽釋放4(KLK4)檢測試劑盒 馬勃基因檢測試劑盒激肽釋放4(KLK4)檢測試劑盒 伊氏副球菌通用型羊進行性肺炎(Ovine progressive pneumonia)基質(zhì)金屬23B(MMP23B)檢測試劑盒 洋蔥伯克霍爾德氏菌基因檢測試劑盒髓觸發(fā)受體1(TREM1)檢測試劑盒 金針菇(毛柄金錢菌、冬菇)通用型羊布氏桿菌(Brucella abortus )基因檢測試劑盒窖(CAV1)檢測試劑盒 大腸埃希氏菌(大腸桿菌)通用型羊關(guān)節(jié)炎腦炎病毒(Arthritis Encephalitis Virus)Ⅰ型膠原α2(COL1α2)檢測試劑盒 棱蓋多孔菌基因檢測試劑盒Ⅰ型膠原α2(COL1α2)檢測試劑盒 梨黑斑鏈格孢通用型沙眼衣原體(Chlamydia)基因檢測試劑盒Ⅰ型膠原α2(COL1α2)檢測試劑盒 樟疫霉通用型羊口蹄疫(Foot-and-Mouth Disease;FMD)非元性烯化(NNE)檢測試劑盒 貝倫格勒座腔菌梨?;突驒z測試劑盒肌肽(CAR)檢測試劑盒 釀酒酵母通用型羊約尼氏病/副結(jié)核分枝桿菌(Mycobacterium paratuberculosis /Johne’s disease)基因檢測試劑盒防御β2(DEFβ2)檢測試劑盒 幾丁質(zhì)酶試劑盒品牌腦鈉;腦鈉尿肽檢測試劑盒化絲裂原活化的激p38β抗體 腦源性營養(yǎng)因子檢測試劑盒化自噬微管相關(guān)輕鏈3抗體 內(nèi)檢測試劑盒粘-5B抗體 內(nèi)皮檢測試劑盒粘-3抗體 內(nèi)皮1檢測試劑盒雞馬立克氏病火雞皰疹病抗體 內(nèi)皮型一氧化氮合檢測試劑盒多藥耐藥/P-糖抗體(C端) 內(nèi)皮脂肪檢測試劑盒抗體 內(nèi)源性分泌型糖基化終末產(chǎn)物受體檢測試劑盒黑色瘤相關(guān)抗原4抗體 操作步驟: 實驗開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。實驗前應(yīng)預(yù)測樣品含量,如樣品濃度過高時,應(yīng)對樣品進行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。 1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?/span>100μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實驗結(jié)果有效性,每次實驗請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。 2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。 3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。 4. 每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。 5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。 6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。 7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時藍色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時間到后應(yīng)盡快加入終止液。 8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后立即進行檢測。
|