產(chǎn)品名稱:Na+k+—ATP酶試劑盒規(guī)格 規(guī)格:24樣、48樣、 貨號(hào):GOY-016647 檢測(cè)方法:可見分光光度法、微板法 產(chǎn)品分類:呼吸代謝途徑系列 公司產(chǎn)品僅用于科研貯存溫度:2~8℃。 本試劑盒保質(zhì)期:6個(gè)月 【實(shí)驗(yàn)前溶液配制】 配液1、將2X濃縮復(fù)溶液用去離子水按照1:1稀釋(1 份濃縮復(fù) 溶液+1份去離子水)用于樣本的復(fù)溶。 配液2、將40ml濃縮洗滌液(20倍濃縮)用去離子水按照1:19 稀釋(1份濃縮洗滌液+19份去離子水),或按 所需用量 配制洗滌液。 配液3、將30X濃縮樣品提取液用去離子水按照1:29稀釋(1份 濃縮洗滌液+29份去離子水),或按所需用量配制洗滌液。 【所用儀器、試劑】 儀 器:微孔板酶標(biāo)儀450nm/630nm、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀/氮?dú)獯蹈裳b 置、均質(zhì)器、振蕩器、離心機(jī)、刻度移液管、天平(感量0.01g ) 微量移液器:單道 20μl~200μl、100μl~1000μl、多道 250μl 試 劑:乙腈、中性氧化鋁
測(cè)定步驟: 1、 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至450nm。 2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。 3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測(cè)定樣本較少,可按照實(shí)際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制) 4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內(nèi)用完)。 5、 樣本測(cè)定(在96孔板中依次加入下列試劑) 選擇抗凝的注意點(diǎn): ①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致; ②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固; ③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿); ④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后用于測(cè)定。 PLCG 1/PLC gamma 1 酯Cγ1抗體α黑色激(α-MSH)ELISA試劑盒 Phospho-PLC gamma 1 (Tyr771) 化酯Cγ1抗體αS轉(zhuǎn)移(α-GST)ELISA試劑盒 Phospho-PLC gamma 1 (Ser1248) 化酯Cγ1抗體α干擾(IFN-α)ELISA試劑盒 Phospho-PLC gamma 1 (Tyr783) 化酯Cγ1抗體α輔肌動(dòng)4(ACTN-4)ELISA試劑盒 PKC gamma/SCA14 激C亞型G抗體α-輔肌動(dòng)3(ACTN-3)ELISA試劑盒 Phospho-PKC gamma (Thr514) 化激C亞型G抗體α輔肌動(dòng)3(ACTN-3)ELISA試劑盒 Phospho-PKC gamma (Thr674) 化激C亞型G抗體α輔肌動(dòng)1(ACTN-1)ELISA試劑盒 PKC delta 激C亞性D型抗體α防御4(NP-4)ELISA試劑盒 phospho-PKC delta (Tyr52) 化激C亞性D型抗體α淀粉(AMY1)ELISA試劑盒 phospho-PKC delta (Thr505) 化激C亞性D型抗體α淀粉(AMS/AMY)ELISA試劑盒 phospho-PKC delta (Tyr311) 化激C亞性D型抗體α半乳糖基抗體(Gal)ELISA試劑盒 PLAU/uPA 尿激型纖溶原激活因子抗體α半乳糖基(α-Gal)ELISA試劑盒 PLAUR 尿激型纖溶原激活因子受體抗體α半乳糖(αGAL)ELISA試劑盒 PLG 纖維溶原抗體αN已氨基葡糖(αNAG)ELISA試劑盒 Plexin A1 叢A1抗體αL巖藻糖(AFU)ELISA試劑盒醛RNA電泳上樣緩沖(RNA保護(hù))10毫升野鼠色因相關(guān)(AGRP)重組人阿黑皮原(POMC)ELISA試劑盒, 6倍蔗糖DNA電泳上樣緩沖20毫升一氧化氮合運(yùn)輸因子(NOSTRIN)重組人上皮特異性抗原(ESA)ELISA試劑盒, 6倍聚蔗糖DNA電泳上樣緩沖20毫升胰島(INS)重組A(IgA)ELISA試劑盒, 6倍三DNA電泳上樣緩沖20毫升胰島受體(ISR)重組小鼠胰(trypsin)ELISA試劑盒, 6倍性凝膠DNA電泳上樣緩沖10毫升胰島樣生長因子1(IGF1)重組大鼠超氧化物歧化(SOD)ELISA試劑盒, RNA電泳樣品處理5毫升胰島樣生長因子2(IGF2)重組大鼠脂α(Lp-α)ELISA試劑盒, 分子生物級(jí)溴化乙錠(Ethidium Bromide)染色100毫升胰島樣生長因子2-mRNA結(jié)合3(IGF2BP3)重組大鼠抑制B(INH-B)ELISA試劑盒, (1毫克/毫升)或(10毫克/毫升)胰島樣生長因子結(jié)合1(IGFBP1)重組猴Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)ELISA試劑盒, SYBR綠色熒光核染色試劑盒(配制25毫升/次)10次胰島樣生長因子結(jié)合2(IGFBP2)重組兔質(zhì)金屬1(MMP-1)ELISA試劑盒, SYBR綠色熒光核染色(20X)0.5毫升胰島樣生長因子結(jié)合3(IGFBP3)重組性成纖維生長因子9(bFGF-9)ELISA試劑盒--動(dòng)物,人 溴藍(lán)(BROMPHENOL BLUE)溶(100毫克/毫升)10毫升胰島樣生長因子結(jié)合4(IGFBP4)重組MR-VP培養(yǎng) DNA銀染試劑盒5次胰淀(IAPP)重組TMP瓊脂培養(yǎng) 報(bào)告因檢測(cè)試劑專題胰多肽(PP)重組M RS 瓊脂礎(chǔ)用于食品中乳菌總數(shù)測(cè)定 名稱規(guī)格胰高血糖(GC)重組L BS 瓊脂用于乳菌檢測(cè)和分離培養(yǎng) 細(xì)胞熒光活性化學(xué)發(fā)光法定量檢測(cè)試劑盒20次乙脫氫1(ADH1)重組BOC-L-蘇氨 Na+k+—ATP酶試劑盒規(guī)格嗜活化趨化因子3檢測(cè)試劑盒癌易感基因2相關(guān)抗體 嗜性粒趨化檢測(cè)試劑盒化癌易感基因1抗體 嗜性粒趨化檢測(cè)試劑盒化癌易感基因1抗體 嗜性粒陽離子檢測(cè)試劑盒化上皮鈣粘附分子抗體 嗜異性抗體檢測(cè)試劑盒化癌易感基因1抗體 受體TNFRSF結(jié)合絲氨蘇氨激2檢測(cè)試劑盒BRD2抗體 瘦檢測(cè)試劑盒BRD3抗體 瘦受體檢測(cè)試劑盒化酪氨激6/腫瘤激抗體 操作步驟: 實(shí)驗(yàn)開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量,如樣品濃度過高時(shí),應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍,計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。 1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?/span>100μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。 2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl(在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。 3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。 4. 每孔加檢測(cè)溶液B工作液(同檢測(cè)A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。 5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。 6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。 7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。 8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測(cè)量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后立即進(jìn)行檢測(cè)。
|