熒光染料的優(yōu)點：
產(chǎn)品僅用于科研使用簡便；
可以與任何PCR產(chǎn)物結(jié)合；
價格便宜；
熒光染料的缺點：
不能區(qū)分不同的雙鏈DNA
引物二聚體會影響檢測的敏感性
非特異性產(chǎn)物會影響結(jié)果的敏感性
引物二聚體和非特異性擴增問題可以通過熔解曲線 (Melting curve) 進行識別，進而通過PCR引物的設(shè)計和反應(yīng)條件的優(yōu)化得以解決?？偟膩碚f，SYBR Green I方法是一種基礎(chǔ)也的Real-time qPCR實驗手段。
特別提示：本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

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熒光探針：
Real-e qPCR中的熒光探針為TaqMan探針，其基本原理是依據(jù)目的基因設(shè)計合成一個能夠與之特異性雜交的探針，該探針的5'端標記熒光基團，3'端標記淬滅基團。
正常情況下兩個基團的空間距離很近，熒光基因因淬滅而不能發(fā)出熒光。PCR擴增時，引物與該探針同時結(jié)合到模板上，探針的結(jié)合位置位于上下游引物之間。
當(dāng)擴增延伸到探針結(jié)合的位置時，Taq酶利用5'外切酶活性，將探針5'端連接的熒光分子從探針上切割下來，從而使其發(fā)出熒光。檢測到的熒光分子數(shù)與PCR產(chǎn)物的數(shù)量成正比，因此，根據(jù)PCR反應(yīng)體系中的熒光強度即可計算出初始DNA模板的數(shù)量。
TaqMan探針技術(shù)解決了熒光染料與非特異性擴增結(jié)合的問題，反應(yīng)結(jié)束后無需通過熔解曲線檢測，縮短了實驗時間。
TaqMan探針技術(shù)的優(yōu)點：
熒光背景低；
敏感性高；
雜交穩(wěn)定性高；
熒光光譜分辨率好；
特異性高。
TaqMan探針技術(shù)的缺點：
成本高；
設(shè)計難度大；
只能用于檢測產(chǎn)物長度低于150bp的反應(yīng)。
由于TaqMan探針的高特異性，可用于等位基因的辨別，特別適用于人類基因多態(tài)性以及根據(jù)SNP區(qū)別和定量菌株。
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熒光定量PCR原理：
產(chǎn)品僅用于科研熒光定量PCR早稱TaqMan PCR，后來也叫Real-Time PCR，是美國PE（Perkin Elmer）公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術(shù)。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標記探針或相應(yīng)的熒光染料來實現(xiàn)其定量功能的。其原理：隨著PCR反應(yīng)的進行，PCR反應(yīng)產(chǎn)物不斷累計，熒光信號強度也等比例增加。每經(jīng)過一個循環(huán)，收集一個熒光強度信號，這樣我們就可以通過熒光強度變化監(jiān)測產(chǎn)物量的變化，從而得到一條熒光擴增曲線圖。
一般而言，熒光擴增曲線可以分成三個階段：熒光背景信號階段，熒光信號指數(shù)擴增階段和平臺期。在熒光背景信號階段，擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺期，擴增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加，PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒有線性關(guān)系，根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號指數(shù)擴增階段， PCR產(chǎn)物量的對數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系，我們可以選擇在這個階段進行定量分析。為了定量和比較的方便，在實時熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個非常重要的概念：熒光閾值和 CT值。
細胞程序性死亡蛋白1配體1(PDCD1LG1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　98%　相思根瘤菌　5g

同種異體移植炎癥因子1(AIF1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　97%　核盤菌　5g

蛋白酶3(PR3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　99%　巨獸芽孢桿菌　1g

脫氫酶(XDH)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　99%　尖孢鐮孢　5g

鈷胺傳遞蛋白Ⅱ(TCN2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　≥97%　硝基還原假單胞菌　1g

血小板反應(yīng)蛋白4(THBS4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　≥97%　浙江芽孢桿菌　250mg

血小板反應(yīng)蛋白3(THBS3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　97%　紫芝(紫靈芝，中華靈芝)　1g

外周鞘脂蛋白22(PMP22)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　97%　黃曲霉　250mg

外周鞘脂蛋白22(PMP22)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　98%　淡紫擬青霉　1g

1號染色體開放閱讀框85(C1orf85)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　98%　猴頭菌　250mg

醌NADH脫氫酶1(NQO1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　98%　冬蟲夏草　5g

葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白4(GLUT4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　>98.0%(GC)　粉擬青霉　1g

脂素1(LPIN1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　>98.0%(GC)　相思根瘤菌　5g

卵泡抑素樣蛋白3(FSTL3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　97%　大豆慢生根瘤菌　1g

甲硫氨酰氨肽酶2(METAP2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　97%　密旋鏈霉菌　5g

神經(jīng)肽Y受體Y2(NPY2R)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　99%　黃桿菌　25g

神經(jīng)肽Y受體Y1(NPY1R)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　99%　賴氨酸芽胞桿菌屬　5g

Anoctamin 6蛋白(ANO6)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　98%　嗜鹽四聯(lián)球菌　100g
肺孢子蟲通用探針法熒光PCR檢測試劑盒細胞周期檢測點激酶2抗體CKR-L2( G proin-coupled receptor-2 )  G蛋白偶聯(lián)受體-2(抗原)100 ul

周期素依賴性激酶9抗體GSK-3 Beta, (Glycogen Synthase Kinase-3)  葡萄糖合成激酶-3（抗原）100 ul

細胞分裂周期蛋白6抗體GTP-CH-1  三酸鳥苷環(huán)水解酶（抗原）100 ul

細胞周期調(diào)控因子34H5N1-M2(Avian influenza Matrix Proin-2)  H5N1流感病毒M2型（抗原）100 ul

轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子C/EBP β抗體HCV-Core  丙型肝炎病毒-C區(qū)（多肽）100 ug

CREB結(jié)合蛋白抗體HCV-NS1  丙型肝炎病毒-NS1（抗原）100 ul

嗜酸粒細胞趨化蛋白抗體HCV-NS3  丙型肝炎病毒-NS3（抗原）100µl

黑色素瘤細胞粘附分子CD146抗體HCV-NS4a  丙型肝炎病毒-NS4a（抗原）100 ul

酸化周期素E抗體HEV  戊型肝炎病毒（抗原）100 ul
PCR技術(shù)的定量原理：
擴增曲線
在Real- qPCR中，對整個PCR反應(yīng)擴增過程進行了實時的檢測并記錄其熒光信號，隨著反應(yīng)的進行，監(jiān)測到的熒光信號可以繪制成一條曲線，即為擴增曲線。熒光擴增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺期。
在Real-time qPCR擴增早期，擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化，此時即為基線期。
PCR反應(yīng)過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的，隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加，終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板，從而進入“平臺期”。在該時期，擴增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加，PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關(guān)系，所以根據(jù)終的PCR產(chǎn)物量不能計算出初始模板量。