PCR技術(shù)的定量原理：
擴增曲線
在Real- qPCR中，對整個PCR反應擴增過程進行了實時的檢測并記錄其熒光信號，隨著反應的進行，監(jiān)測到的熒光信號可以繪制成一條曲線，即為擴增曲線。熒光擴增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺期。
在Real-time qPCR擴增早期，擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化，此時即為基線期。
PCR反應過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的，隨著反應循環(huán)數(shù)的增加，終PCR反應不再以指數(shù)形式生成模板，從而進入“平臺期”。在該時期，擴增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加，PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關(guān)系，所以根據(jù)終的PCR產(chǎn)物量不能計算出初始模板量。
熒光染料的優(yōu)點：
產(chǎn)品僅用于科研使用簡便；
可以與任何PCR產(chǎn)物結(jié)合；
價格便宜；
熒光染料的缺點：
不能區(qū)分不同的雙鏈DNA
引物二聚體會影響檢測的敏感性
非特異性產(chǎn)物會影響結(jié)果的敏感性
引物二聚體和非特異性擴增問題可以通過熔解曲線 (Melting curve) 進行識別，進而通過PCR引物的設(shè)計和反應條件的優(yōu)化得以解決?？偟膩碚f，SYBR Green I方法是一種基礎(chǔ)也的Real-time qPCR實驗手段。

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熒光探針：
Real-e qPCR中的熒光探針為TaqMan探針，其基本原理是依據(jù)目的基因設(shè)計合成一個能夠與之特異性雜交的探針，該探針的5'端標記熒光基團，3'端標記淬滅基團。
正常情況下兩個基團的空間距離很近，熒光基因因淬滅而不能發(fā)出熒光。PCR擴增時，引物與該探針同時結(jié)合到模板上，探針的結(jié)合位置位于上下游引物之間。
當擴增延伸到探針結(jié)合的位置時，Taq酶利用5'外切酶活性，將探針5'端連接的熒光分子從探針上切割下來，從而使其發(fā)出熒光。檢測到的熒光分子數(shù)與PCR產(chǎn)物的數(shù)量成正比，因此，根據(jù)PCR反應體系中的熒光強度即可計算出初始DNA模板的數(shù)量。
TaqMan探針技術(shù)解決了熒光染料與非特異性擴增結(jié)合的問題，反應結(jié)束后無需通過熔解曲線檢測，縮短了實驗時間。
TaqMan探針技術(shù)的優(yōu)點：
熒光背景低；
敏感性高；
雜交穩(wěn)定性高；
熒光光譜分辨率好；
特異性高。
TaqMan探針技術(shù)的缺點：
成本高；
設(shè)計難度大；
只能用于檢測產(chǎn)物長度低于150bp的反應。
由于TaqMan探針的高特異性，可用于等位基因的辨別，特別適用于人類基因多態(tài)性以及根據(jù)SNP區(qū)別和定量菌株。
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熒光定量PCR原理：
產(chǎn)品僅用于科研熒光定量PCR早稱TaqMan PCR，后來也叫Real-Time PCR，是美國PE（Perkin Elmer）公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術(shù)。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標記探針或相應的熒光染料來實現(xiàn)其定量功能的。其原理：隨著PCR反應的進行，PCR反應產(chǎn)物不斷累計，熒光信號強度也等比例增加。每經(jīng)過一個循環(huán)，收集一個熒光強度信號，這樣我們就可以通過熒光強度變化監(jiān)測產(chǎn)物量的變化，從而得到一條熒光擴增曲線圖。
一般而言，熒光擴增曲線可以分成三個階段：熒光背景信號階段，熒光信號指數(shù)擴增階段和平臺期。在熒光背景信號階段，擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺期，擴增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加，PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒有線性關(guān)系，根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號指數(shù)擴增階段， PCR產(chǎn)物量的對數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系，我們可以選擇在這個階段進行定量分析。為了定量和比較的方便，在實時熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個非常重要的概念：熒光閾值和 CT值。
特別提示：本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！
對氨基甲酸(AR)Vorinostat (SAHA)6-羥基并噻唑

對氨基甲酸(標準品)Mono-Methyl-Histone H3 (Lys79) (D5X1S) Rabbit mAb1-Boc-吡咯-2-酸

硅酸鎂（高純）SignalSilence® γ-Canin siRNA I (Mouse Specific)Boc-氨甲基哌啶

L-抗壞血酸鈉CBARA1/MICU1 (D4P8Q) Rabbit mAb2,二氯-5-嘧啶

焦酸鈉(AR)10X Wash Buffer氟-甲

碳酸氫銨(AR)APC3 (D3I1V) Rabbit mAb基甲酸甲酯

氯化銨(AR)SimpleChIP® Human CCND1 Promor Primers溴-6-氯咪唑并[1,2-b]噠

水楊酸(AR)Siva-1 Antibody(1-甲基-1H-1,2,三唑-基)甲

甲殼素；幾丁質(zhì)Smad5 (D4G2) Rabbit mAb納斯特試劑

輔酶 AEVL Antibody七鉬酸銨

多效唑SAM68 Antibody1-(2-甲氧基)哌

酸鈉十水(AR)Tris-Glycine Transfer Buffer (10X)2-甲基四氫噻吩

硫酸聯(lián)氨(AR)NF-κB1 p105/p50 (D7H5M) Rabbit mAb叔丁鎂

多酚氧化酶Sharpin (D4P5B) Rabbit mAb2,二氯甲

硫酸銅五水(AR)PathScan® Total YB1 Sandwich ELISA Kit甲氧基硫酚

N-乙酰-D-氨基葡萄糖MetAP2 (D3I1H) Rabbit mAb2-甲基-硝基吡啶

無水三氯化鐵(AR)EML4 (D5V6M) Rabbit mAb芐基-2-嗎琳羧酸鹽酸鹽

硫酸錳一水(AR)Phospho-HER2/ErbB2 (Tyr1221/1222) Blocking PeptideBoc-2-羥甲基啉
球孢白僵菌探針法熒光PCR檢測試劑盒豚鼠白介素17(IL-17)ELISA試劑盒eIF2 alpha  真核啟動因子2α抗體100 ul

豚鼠白介素13(IL-13)ELISA試劑盒Phospho-eIF2 alpha (Ser51)  酸化真核啟動因子2α抗體100 ul

豚鼠白介素12(IL-12/P70)ELISA試劑盒eIF4E  真核翻譯起始因子4E抗體100 ul

豚鼠白介素10(IL-10)ELISA試劑盒phospho-eIF4E(Ser209)  酸化真核翻譯起始因子4E抗體100 ul

豚鼠白介素1(IL-1)ELISA試劑盒ELK1  細胞轉(zhuǎn)錄因子ELK1抗體100 ul

豚鼠白蛋白ELISA試劑盒Phospho-ELk1 (Ser383)   酸化細胞轉(zhuǎn)錄因子ELK1抗體100 ul

豚鼠γ干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒Elastin  彈性蛋白抗體100 ul

豚鼠α干擾素(IFN-α)ELISA試劑盒ELAVL1/HuR  ELAVL1抗體100 ul

豚鼠P物質(zhì)(SP)ELISA試劑盒Emp1  表皮膜蛋白1抗體20 ul