產(chǎn)品僅用于科研注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。 產(chǎn)品名稱:豌豆內(nèi)源基因PCR檢測試劑盒 規(guī)格:50T 編號:HE32067-R 類別:PCR檢測試劑盒 儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。 運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。 ? 儲需要自備的器材: 1.儀器:分析天平、離心機(jī)、熒光 PCR 擴(kuò)增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器(2 µL、20 µL、200 µL、1000 µL)。 2.耗材:熒光 PCR 反應(yīng)管、眼科剪、眼科鑷、鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯(DEPC)水 處理的滅菌離心管、吸頭(10 µL、200 µL、1000 µL)、滅菌雙蒸水。 特點(diǎn): 1.即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡單,定量準(zhǔn)確快速。 2. 引物經(jīng)過優(yōu)化,特異性強(qiáng)。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長度為 560 bp。 3. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。 4. 提供陽性對照,便于分析試驗(yàn)結(jié)果。 保存條件: 僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法 1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。 2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。 3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。 4. 組織勻漿:將組織加入適量鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。 5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。 溴螨酯溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) 1mL Akabane Disease Virus(AKAV)牛赤羽病毒染料法熒光定量RT-PCR試劑盒 克菌丹溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) 1mL Akabane Disease Virus(AKAV)牛赤羽病毒探針法熒光定量RT-PCR試劑盒 丙草胺溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) 1mL Alastrim Virus類天花病毒PCR試劑盒 液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) 1mL Alastrim Virus類天花病毒染料法熒光定量PCR試劑盒 準(zhǔn)物質(zhì) 1mL Alastrim Virus類天花病毒探針法熒光定量PCR試劑盒 標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) 1mL Alcaligenes faecalis糞產(chǎn)堿桿菌PCR試劑盒 敵稗溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) 1mL Alcaligenes faecalis糞產(chǎn)堿桿菌染料法熒光定量PCR試劑盒 七氯溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) 1mL Alcaligenes faecalis糞產(chǎn)堿桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒 液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) 1mL Alcelephine Herpesvirus 1(AlHV-1狷羚皰疹病毒1型PCR試劑盒 狄試劑溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) 1mL Alcelephine Herpesvirus 1(AlHV-1狷羚皰疹病毒1型染料法熒光定量PCR試劑盒 準(zhǔn)物質(zhì) 1mL Alcelephine Herpesvirus 1(AlHV-1狷羚皰疹病毒1型探針法熒光定量PCR試劑盒 氯胺靈溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) 1mL Aleutian Disease Virus(ADV)阿留申病病毒PCR試劑盒 殺蟲畏溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) 1mL Aleutian Disease Virus(ADV)阿留申病病毒染料法熒光定量PCR試劑盒 蚜滅多溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) 1mL Aleutian Disease Virus(ADV)阿留申病病毒探針法熒光定量PCR試劑盒 克螨特溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) 1mL Allpaahuayo virus(ALLV)奧爾帕瓦約病毒RT-PCR試劑盒 尿嘧啶/2,4-二羥基嘧啶/2,4-(1H,3H)-嘧啶二酮/由雪/2,6-二羥基/1,3-二氮雜/Uracil高純,98%25克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,66-22-8RT 100克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌, 500克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌, 中文名稱: 尿嘧啶 其他名稱: 2,4-二羥基嘧啶;2,4-(1,3)-嘧啶二酮;由雪;2,6-二羥基;1,3-二氮雜;滅胞素;殺枯定;殺胞素;葉枯散 英文名稱: Uracil 其他名稱: 2,6-Dihydroxypyrimidine;2,4-(1H,3H)-Pyrimidinedione ;2,4-Dihydroxypyr-imidine;2,4-Dioxopyrimidine;2,4-Pyrimidinediol 產(chǎn)品規(guī)格: 高純,98% 包 裝: 5克/25克/100克 CAS號:66-22-8 C4H4N2O2=112.09 級別:High putiry grade 含量:≥98.0% 熔點(diǎn):>300℃ 干燥失重:≤1.0% 重金屬:≤20ppm 性狀:淺黃色結(jié)晶。100份25℃的水溶解本品0.358 份。易溶于熱水,溶于氫氧化銨和其他堿類,微溶于冷水,幾乎不溶于乙醇。大吸收波長(pH 7.0) 202.5、259.5nm(ε×10-3 9.2、8.2)。 用途:生化研究。有機(jī)合成 保存:RT 豌豆內(nèi)源基因PCR檢測試劑盒磷化谷氨受體1抗體2-Benzothiazolyl diethyldithiocarbama別名: 分子式: C12H14N2S3性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞: G蛋白修補(bǔ)結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體m-Anisic acid別名: 分子式: C8H8O3性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞: 磷化G蛋白偶聯(lián)受體激酶相互作用蛋白1抗體p-Anisoin別名: 分子式: C16H16O4性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞: 磷化G蛋白偶聯(lián)受體激酶相互作用蛋白17-Anilino-4-hydroxy-2-naphthalenesulfonic acid別名: 分子式: C16H13NO4S性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞: 葡萄糖激酶調(diào)節(jié)蛋白抗體Benzanilide別名: 分子式: C13H11NO性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞: GTP結(jié)合蛋白10抗體3-Benzalphthalide別名: 分子式: C15H10O2性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞: 磷化Ras GTP酶活化蛋白結(jié)合蛋白1抗體L-Aspartic acid別名: 分子式: C4H7NO4性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞: Ras GTP酶活化蛋白結(jié)合蛋白1抗體Benzoin別名: 分子式: C14H12O2性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞: 反應(yīng)五要素: 參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則: ①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。 ②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。 ③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。 ④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。 ⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。 ⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn), 這對酶切分析或分子克隆很有好處。 ⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。 引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。 技術(shù)原理: DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動子的參與下,根據(jù)堿基互補(bǔ)配對原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。 在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時也可以發(fā)生變性解鏈,當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性,并設(shè)計引物做啟動子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。( DNA高溫變性低溫復(fù)性) 產(chǎn)品僅用于科研發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個循環(huán)加酶,使PCR技術(shù)變得非常簡捷、同時也大大降低了成本,PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用,并逐步應(yīng)用于臨床。 |