產(chǎn)品名稱:隱孢子蟲通用PCR檢測(cè)試劑盒規(guī)格 英文名稱:Cryptosporidium spp.PCR 編號(hào):HE30868-R 類別:PCR檢測(cè)試劑盒 儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。 運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。 產(chǎn)品僅用于科研注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。 ? 反應(yīng)五要素: 參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則: ①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。 ②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。 ③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。 ④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。 ⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。 ⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。 ⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無明顯同源性。 引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。 技術(shù)原理: DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動(dòng)子的參與下,根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。 在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時(shí)也可以發(fā)生變性解鏈,當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性,并設(shè)計(jì)引物做啟動(dòng)子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。( DNA高溫變性低溫復(fù)性) 產(chǎn)品僅用于科研發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對(duì)于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個(gè)循環(huán)加酶,使PCR技術(shù)變得非常簡(jiǎn)捷、同時(shí)也大大降低了成本,PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用,并逐步應(yīng)用于臨床。 儲(chǔ)需要自備的器材: 1.儀器:分析天平、離心機(jī)、熒光 PCR 擴(kuò)增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器(2 µL、20 µL、200 µL、1000 µL)。 2.耗材:熒光 PCR 反應(yīng)管、眼科剪、眼科鑷、鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯(DEPC)水 處理的滅菌離心管、吸頭(10 µL、200 µL、1000 µL)、滅菌雙蒸水。 特點(diǎn): 1.即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡(jiǎn)單,定量準(zhǔn)確快速。 2. 引物經(jīng)過優(yōu)化,特異性強(qiáng)。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長(zhǎng)度為 560 bp。 3. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。 4. 提供陽(yáng)性對(duì)照,便于分析試驗(yàn)結(jié)果。 保存條件: 僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法 1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。 2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。 3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。 4. 組織勻漿:將組織加入適量鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。 5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。 2-氨基-1-苯乙醇/2-氨基-1-苯基乙醇/苯基乙醇胺/S/R-苯甘氨醇/2-Ami-phenylethanol 質(zhì)量規(guī)格:>85%,BR 包裝;1g 順式-D-羥脯氨酸/順式-4-羥基-D-脯氨酸/4-羥基脯胺基乙酸/別羥基-D-脯氨酸/順式-D-別羥脯氨酸/4-羥基脯氨酸/順-4-羥基-D-脯氨酸/cis-4-Hydroxy-D-proline 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;25g 6-重氮-5-氧代-L-正白氨酸/6-重氮-5-氧代-L-正亮氨酸/DON 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;5g L(+)硒代蛋氨酸/硒代蛋氨酸/L-(+)-硒代甲硫氨酸/(S)-(+)-2-氨基-4-(甲基硒)丁酸/硒基-L-甲硫氨酸/L-(+)-Selenomethionine 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;25g DL-硒代蛋氨酸/甲硒丁氨酸/硒代蛋氨酸/DL-硒代甲硫氨酸/硒基-DL-甲硫氨酸/Selenomethionine 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;5g S-腺甘基蛋氨酸/S-腺苷甲硫氨酸對(duì)甲苯磺酸鹽/S-腺甙甲硫氨酸對(duì)甲苯磺酸鹽/S-腺苷蛋氨酸對(duì)甲苯磺酸鹽/S-腺苷L-蛋氨酸對(duì)甲苯磺酸鹽/AdoMet 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥97%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;100MG S-腺甘蛋氨酸/腺苷蛋氨酸/S-腺苷甲硫胺酸/S-腺苷-L-蛋氨酸/S-腺苷甲硫氨酸/思美泰/硫腺苷蛋氨酸/腺苷甲硫氨酸/S-(5'-脫氧腺嘌呤核苷-5'-基)蛋氨酸/SAM 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;500MG L-類胱氨酸/L-同型胱氨酸/L-4,4'-二硫雙(2-氨基丁酸)/L-高胱氨酸/L-同型半胱氨酸/L-Homocystine 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;1g L-胱硫醚/(R)-S-(2-氨基-2-羧乙基)-L-半胱氨酸/L-Cystathionine 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;5g 半胱氨酰甘氨酸/H-半胱氨酸-甘氨酸-OH/半胱-甘氨酸/L-半胱氨酸-甘氨酸/Cys-Gly 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;25g ε-聚賴氨酸/聚賴氨酸/ε-PL 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;5g DL-高半胱氨酸硫酸內(nèi)酯鹽酸鹽/DL-高半胱氨酸硫內(nèi)脂鹽酸鹽/DL-高半胱氨酸硫內(nèi)酯鹽酸鹽/混旋-高胱氨酸硫羥乙酮/高半胱氨酸硫內(nèi)酯鹽酸鹽/DL-高半胱氨酸硫醇內(nèi)酯鹽酸鹽/DL-Homocysteine thiolactone hydrochloride 質(zhì)量規(guī)格:≥98%,BR 包裝;1g DL-高胱氨酸/DL-4,4ˊ-二硫雙(2-氨基丁酸)/DL-類胱氨酸/DL-同型胱氨酸/類硫氨酸/DL-4,4'-二硫二(2-氨基丁酸)/DL-Homocystine 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥99%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;5g 雙(2-氧代-3-惡唑烷基)次磷酰氯/雙(2-氧代'-3-惡唑烷基)次磷酰氯/二(2-氧代-3-唑烷基)次磷酰氯/BOP-CL 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;25g 叔丁氧羰基-甲苯磺?;?精氨酸/Nα-BOC-Nω-TOSYL-L-精氨酸/BOC-D-芐磺?;彼?N-叔丁氧羰基-N'-甲苯磺?;?L-精氨酸/BOC-D-甲苯磺酰基-精氨酸/BOC-甲苯磺?;?精氨酸/Nα-叔丁氧羰酰基NΩ-對(duì)甲苯磺?;鵏-精氨酸/Boc-Arg(Tos)-OH 質(zhì)量規(guī)格:≥98%,BR 包裝;5g N-芴甲氧羰基-N'-甲苯磺?;?L-精氨酸/Nα-FMOC-Nω-TOSYL-L-精氨酸/FMOC-對(duì)甲苯磺酰-精氨酸/N-芴甲氧羰基-甲苯磺酰基-精氨酸/FMOC-Nω-(4-甲基磺酰)-L-精氨酸/Nα-(9-芴甲氧羰基)-NΩ-甲苯磺?;?L-精氨酸/Fmoc-Arg(Tos)-OH 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;1g 胰凝乳蛋白酶(牛)/α-糜蛋白酶/α-胰凝乳蛋白酶/凝胰朊酶/凝胰蛋白酶/Chymotrypsin(bovine)/ α-Chymotrypsin(bovine) 質(zhì)量規(guī)格:>98% 包裝;25g 隱孢子蟲通用PCR檢測(cè)試劑盒規(guī)格 Rhizobium│sp. 中文名稱:根瘤菌(紅豆草)種屬:Rhizobium│sp.分離基物:紅豆草根瘤提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:與紅豆草共生固氮培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:53生長(zhǎng)條件:28-30℃存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法;定期移植法 純度:豐度:10atom%;化學(xué)純度:≥98.5% Rhizobium│sp. 中文名稱:根瘤菌(小冠花)種屬:Rhizobium│sp.分離基物:小冠花根瘤提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:與小冠花共生固氮培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:53生長(zhǎng)條件:28-30℃存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法;定期移植法 純度:豐度:10atom%;化學(xué)純度:≥98.5% Lipomyces│lipofer 中文名稱:產(chǎn)油油脂酵母種屬:Lipomyces│lipofer提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:yes培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:0181或0436生長(zhǎng)條件:25-28℃存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法;礦物油法 純度:97% Dekkera│bruxellensis 中文名稱:布魯塞爾德克酵母種屬:Dekkera│bruxellensis分離基物:茶-啤酒(tea-beer)提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:yes培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:436生長(zhǎng)條件:25-28℃存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法;礦物油法 純度:97% Mrakia│nivalis 中文名稱:雪地木拉克酵母種屬:Mrakia│nivalis提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:181生長(zhǎng)條件:20℃存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法;礦物油法 純度:97% Alternaria│bokurai 中文名稱:束梗鏈格孢(犁黑斑病菌)種屬:Alternaria│bokurai提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長(zhǎng)條件:24-28℃ 純度:98% Aspergillus│pullulans 中文名稱:出芽短梗霉=出芽茁霉(黑酵母)種屬:Aspergillus│pullulans提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長(zhǎng)條件:25-28℃ 純度:98% Aspergillus ficuum 中文名稱:無花果曲霉種屬:Aspergillus ficuum提供形式:凍干粉安全等級(jí):1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CPDA生長(zhǎng)條件:28-30℃,好氧,4d 純度:for fluorescence, ≥98% |