產(chǎn)品僅用于科研注意事項:1.基礎(chǔ)程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動力學;8.PCR擴增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。 產(chǎn)品名稱:嗜血桿菌通用PCR檢測試劑盒說明書 英文名稱:Haemophilus spp.PCR 編號:HE31053-R 類別:PCR檢測試劑盒 儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。 運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。 ? 儲需要自備的器材: 1.儀器:分析天平、離心機、熒光 PCR 擴增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器(2 µL、20 µL、200 µL、1000 µL)。 2.耗材:熒光 PCR 反應(yīng)管、眼科剪、眼科鑷、鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯(DEPC)水 處理的滅菌離心管、吸頭(10 µL、200 µL、1000 µL)、滅菌雙蒸水。 特點: 1.即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡單,定量準確快速。 2. 引物經(jīng)過優(yōu)化,特異性強。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長度為 560 bp。 3. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。 4. 提供陽性對照,便于分析試驗結(jié)果。 保存條件: 僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法 1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。 2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。 3. 細胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。 4. 組織勻漿:將組織加入適量鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。 5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。 人參皂苷Rg1/人參皂甙Rg1/Ginsenoside Rg1 質(zhì)量規(guī)格:≥3TIU/mg,進分,來源: 牛肺或牛胰 包裝;1g 人參皂苷Rg2/人參皂甙Rg2/Ginsenoside Rg2 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 包裝;25g 人參皂苷Rg3/人參皂甙Rg3/Ginsenoside Rg3 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 包裝;5g 人參皂苷Re/人參皂甙Re/Ginsenoside Re 質(zhì)量規(guī)格:BR,4000u/g 包裝;1g 人參皂苷Rc/人參皂甙Rc/Ginsenoside Rc 質(zhì)量規(guī)格:1500USP u/mg,豬源 包裝;25g 人參皂苷Rd/人參皂甙Rd/Ginsenoside Rd 質(zhì)量規(guī)格:95%,美國進口原裝 包裝;5g 人參皂苷Rf/人參皂甙Rf/Ginsenoside Rf 質(zhì)量規(guī)格:>45 U/mg,進分 包裝;25g 人參皂苷Rh1/人參皂甙Rh1/Ginsenoside Rh1 質(zhì)量規(guī)格:美國*7-15 units/mg,來源于地衣芽孢桿菌 包裝;5g 人參皂苷Rh2/人參皂甙Rh2/Ginsenoside Rh2 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 包裝;25g 柚皮苷/柚甙/橙皮甙/柚皮素-7-鼠李葡萄糖苷/柚苷/柑桔苷/柚皮甙/7-[[2-O-(6-脫氧-A-L-甘露吡喃基)-B-D-葡萄吡喃基]氧代]-2,3-二氫-5-羥基-2-(4-羥苯基)-4H-1-苯并吡喃-4-酮/Naringin 質(zhì)量規(guī)格:>98%,標準品 包裝;5g 川陳皮素/川皮亭/蜜橘黃素/陳黃皮酮/5,6,7,8,3'4'-六甲氧基黃酮/川皮苷/Nobiletin 質(zhì)量規(guī)格:>90%,羅氏分包 包裝;100g 煙堿/尼古丁/1-甲基-2-(3-吡啶基)吡咯烷/(-)-Nicotine 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 包裝;25g 丹參素鈉/3-(3',4'-二羥基苯基)乳酸鈉/Sodium Danshensu 質(zhì)量規(guī)格:30 units/mg 包裝;500g 葛根黃酮/葛根素/8-β-D-葡萄吡喃糖-4',7-二羥基異黃酮/黃豆甙元-8-葡萄糖甙/葛根提取物/Puerarin 質(zhì)量規(guī)格:20000U/g,BR 包裝;5g 柴胡皂苷A/柴胡皂甙A/Saikosaponin A 質(zhì)量規(guī)格:BR,6萬U/G 包裝;1g 柴胡皂苷B1/柴胡皂甙B1/Saikosaponin B1 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR,M.W:80萬-150萬 包裝;100g 柴胡皂苷C/柴胡皂甙C/Saikosaponin C 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR,M.W:3000 包裝;25g 嗜血桿菌通用PCR檢測試劑盒說明書Bacillus│sonorensis 中文名稱:索諾拉沙漠芽孢桿菌種屬:Bacillus│sonorensis分離基物:樣/表層海提供形式:凍干物模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:有機污染物降解菌/降解二苯并噻吩培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:472生長條件:28-50℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:98% Donghicola│eburneus 中文名稱:白棲東海菌種屬:Donghicola│eburneus分離基物:樣/表層海提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:有機污染物降解菌/石油烴類降解菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:821生長條件:25℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:≥98% Sphingobium│sp. 中文名稱:鞘氨醇菌種屬:Sphingobium│sp.分離基物:樣/深海底層樣提供形式:凍干物模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:潛在的有機污染物降解菌/分離自多環(huán)芳烴(PAHs)富集菌群培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471生長條件:25℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:95% Aquimonas│voraii 中文名稱:沃氏單胞菌種屬:Aquimonas│voraii分離基物:沉積物/表層沉積物提供形式:斜面培養(yǎng)物模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:潛在的有機污染物降解菌/分離自苯酚降解菌群培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:33生長條件:28℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:95% Tistrella│mobilis 中文名稱:運動替斯崔納菌種屬:Tistrella│mobilis分離基物:樣/深海底層樣提供形式:凍干物模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:潛在的有機污染物降解菌/分離自多環(huán)芳烴(PAHs)富集菌群培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471生長條件:25℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:95% Psychrobacter│submarinus 中文名稱:海底嗜冷桿菌種屬:Psychrobacter│submarinus分離基物:沉積物/表層沉積物提供形式:凍干物模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:微生物/低溫微生物培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471生長條件:15-20℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:98% Brochothrix│thermosphacta 中文名稱:熱殺索絲菌種屬:Brochothrix│thermosphacta分離基物:土壤/南極土壤提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:待定培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:33生長條件:20-25℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:98% Hafnia│paralvei 中文名稱:哈夫尼菌種屬:Hafnia│paralvei分離基物:土壤/南極土壤提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:極地細菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:33生長條件:20-25℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:98% 反應(yīng)五要素: 參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則: ①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。 ②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。 ③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。 ④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。 ⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個堿基,應(yīng)嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。 ⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。 ⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。 引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。 技術(shù)原理: DNA的半保留復(fù)制是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動子的參與下,根據(jù)堿基互補配對原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。 在聚合酶鏈式反應(yīng)實驗中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時也可以發(fā)生變性解鏈,當溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性,并設(shè)計引物做啟動子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。( DNA高溫變性低溫復(fù)性) 產(chǎn)品僅用于科研發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個循環(huán)加酶,使PCR技術(shù)變得非常簡捷、同時也大大降低了成本,PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用,并逐步應(yīng)用于臨床。 |