產(chǎn)品名稱(chēng):糖化酶試劑盒說(shuō)明書(shū) 規(guī)格:24樣、48樣、 貨號(hào):GOY-016545 檢測(cè)方法:可見(jiàn)分光光度法、微板法 產(chǎn)品分類(lèi):碳水化合物代謝系列 公司產(chǎn)品僅用于科研貯存溫度:2~8℃。 本試劑盒保質(zhì)期:6個(gè)月 【實(shí)驗(yàn)前溶液配制】 配液1、將2X濃縮復(fù)溶液用去離子水按照1:1稀釋(1 份濃縮復(fù) 溶液+1份去離子水)用于樣本的復(fù)溶。 配液2、將40ml濃縮洗滌液(20倍濃縮)用去離子水按照1:19 稀釋(1份濃縮洗滌液+19份去離子水),或按 所需用量 配制洗滌液。 配液3、將30X濃縮樣品提取液用去離子水按照1:29稀釋(1份 濃縮洗滌液+29份去離子水),或按所需用量配制洗滌液。 【所用儀器、試劑】 儀 器:微孔板酶標(biāo)儀450nm/630nm、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀/氮?dú)獯蹈裳b 置、均質(zhì)器、振蕩器、離心機(jī)、刻度移液管、天平(感量0.01g ) 微量移液器:單道 20μl~200μl、100μl~1000μl、多道 250μl 試 劑:乙腈、中性氧化鋁
測(cè)定步驟: 1、 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至450nm。 2、 試劑三的稀釋?zhuān)簩⒃噭┤谜麴s水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。 3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測(cè)定樣本較少,可按照實(shí)際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制) 4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內(nèi)用完)。 5、 樣本測(cè)定(在96孔板中依次加入下列試劑) 選擇抗凝的注意點(diǎn): ①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致; ②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固; ③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿); ④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后用于測(cè)定。 PCNA/FITC 熒光標(biāo)記增殖核抗原抗體IgG琥珀受體1(SUCNR1)ELISA試劑盒 PCNA/FITC 熒光標(biāo)記增殖核抗原抗體IgG骺聚糖(EPYC)ELISA試劑盒 PCX/FITC 熒光標(biāo)記足特異抗體紅藻氨離子能谷氨受體2(GRIK2)ELISA試劑盒 PD-1/FITC 熒光標(biāo)記程序性死亡1抗體IgG紅衍生核因子2樣2(NFE2L2)ELISA試劑盒 PDCD4/FITC 熒光標(biāo)記凋亡相關(guān)4抗體IgG紅膜7.2b(STOM)ELISA試劑盒 TFAR19/PDCD5 /FITC 熒光標(biāo)記凋亡相關(guān)TFAR19抗體IgG紅補(bǔ)體受體1(CR1)ELISA試劑盒 PDE4D/FITC 熒光標(biāo)記二酯4D抗體IgG亨廷頓關(guān)聯(lián)1(HAP1)ELISA試劑盒 PDEF/FITC 熒光標(biāo)記上皮特異性ETs轉(zhuǎn)錄因子抗體IgG亨廷頓(HTT)ELISA試劑盒 PDGF-A/FITC 熒光標(biāo)記血小板源性生長(zhǎng)因子-A抗體IgG黑轉(zhuǎn)鐵(MFI2)ELISA試劑盒 PDGF-B/FITC 熒光標(biāo)記血小板源性生長(zhǎng)因子-B抗體IgG黑曲菌(MREG)ELISA試劑盒 PDGF-BB/FITC 熒光標(biāo)記血小板源性生長(zhǎng)因子-BB抗體IgG黑親和(MLPH)ELISA試劑盒 PDGF-R-A/FITC 熒光標(biāo)記血小板源性生長(zhǎng)因子受體-A抗體IgG黑皮質(zhì)激5受體(MC5R)ELISA試劑盒 Phospho-PDGF Receptor alpha (Tyr1018)/FITC 熒光標(biāo)記化血小板源性生長(zhǎng)因子受體-α抗體IgG黑皮質(zhì)激4受體(MC4R)ELISA試劑盒 Phospho-PDGF Receptor alpha (Tyr754) /FITC 熒光標(biāo)記化血小板源性生長(zhǎng)因子受體-α抗體IgG黑皮質(zhì)激3受體(MC3R)ELISA試劑盒 Phospho-PDGF Receptor alpha(Tyr849)/PDGF Receptor beta (Tyr857)/FITC 熒光標(biāo)記化血小板源性生長(zhǎng)因子受體α/β抗體IgG黑瘤抑制性活性1(MIA1)ELISA試劑盒定量檢測(cè)試劑盒重組人狀旁激1-84 細(xì)胞3-羥-3-戊二輔A(HMG-COA)合成活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次花寶5號(hào) 組織3-羥-3-戊二輔A(HMG-COA)合成活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次2-脫氧-D-核糖 血3-羥-3-戊二輔A(HMG-COA)合成活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次L-蘋(píng)果 細(xì)胞羥戊激(mevalonate kinase)活性比色法20次N-辛-N-葡糖 定量檢測(cè)試劑盒化[1-環(huán)己-3-(3-氨)碳二亞] 組織羥戊激(mevalonate kinase)活性比色法20次鄰二 定量檢測(cè)試劑盒氯化銀 血羥戊激(mevalonate kinase)活性比色法20次聚乙二35000 定量檢測(cè)試劑盒癸二二酯 真菌/酵母羥戊激(mevalonate kinase)活性比色法20次烯三環(huán)已鹽 定量檢測(cè)試劑盒亞 植物羥戊激(mevalonate kinase)活性比色法20次氧化鋁H 定量檢測(cè)試劑盒龍血B 細(xì)菌羥戊激(mevalonate kinase)活性比色法20次大黃(唐古特大黃) 糖化酶試劑盒說(shuō)明書(shū)牛痘病IgM檢測(cè)試劑盒角19抗體 唾液睪檢測(cè)試劑盒1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框147抗體 D-絲氨檢測(cè)試劑盒膽固21-羥化抗體 趨化因子20檢測(cè)試劑盒畸胎瘤衍化生長(zhǎng)因子抗體(C端) 趨化因子28檢測(cè)試劑盒補(bǔ)體C1qL3鏈多肽抗體 空泡相關(guān)A抗體檢測(cè)試劑盒腫瘤/抗原27抗體(高遷移率族) 腦膜炎奈瑟氏菌檢測(cè)試劑盒1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框228抗體 髓過(guò)氧化物檢測(cè)試劑盒碳酐3抗體 操作步驟: 實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量,如樣品濃度過(guò)高時(shí),應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋?zhuān)允瓜♂尯蟮臉悠贩显噭┖械臋z測(cè)范圍,計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。 1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。 2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl(在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。 3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。 4. 每孔加檢測(cè)溶液B工作液(同檢測(cè)A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。 5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。 6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見(jiàn)標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。 7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。 8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后立即進(jìn)行檢測(cè)。
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