產(chǎn)品僅用于科研注意事項(xiàng)：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時(shí)間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué)；8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
產(chǎn)品名稱：鴨源雞桿菌PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)
英文名稱：Gallibacterium anatisPCR
編號(hào)：HE31017-R
類別:PCR檢測(cè)試劑盒
儲(chǔ)存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸：低溫、避光，快遞免費(fèi)送貨上門(mén)。
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儲(chǔ)需要自備的器材：
1．儀器：分析天平、離心機(jī)、熒光 PCR 擴(kuò)增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器（2 µL、20
µL、200 µL、1000 µL）。
2．耗材：熒光 PCR 反應(yīng)管、眼科剪、眼科鑷、鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯（DEPC）水
處理的滅菌離心管、吸頭（10 µL、200 µL、1000 µL）、滅菌雙蒸水。
特點(diǎn)：
1.即開(kāi)即用，用戶只需要提供樣品 DNA 模板，操作簡(jiǎn)單，定量準(zhǔn)確快速。
2. 引物經(jīng)過(guò)優(yōu)化，特異性強(qiáng)。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長(zhǎng)度為 560 bp。
3. PCR mix 中含上樣染料，PCR 后可以直接上樣電泳。
4. 提供陽(yáng)性對(duì)照，便于分析試驗(yàn)結(jié)果。
保存條件：
僅用于科研14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè)，請(qǐng)按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
草酸鉀/乙二酸鉀/草酸二鉀一合物/Potassium oxalate monohydrate 質(zhì)量規(guī)格：100mg/L,基體: 5％HNO3 包裝;1g

硬脂酸鉀/十八酸鉀/Potassium stearate 質(zhì)量規(guī)格：1000μg/ml,基體:1.0 mol/L HNO3 包裝;5g

四草酸鉀/四乙二酸鉀/草酸三氫鉀/二草酸三氫鉀/三氫二草酸鉀二合物/Potassium tetraoxalate dihydrate 質(zhì)量規(guī)格：100µg/mL,基體:1%HNO3 包裝;1g

草酸鈦鉀/乙二酸鈦鉀/雙草酸氧化鈦(IV)酸鉀二合物/Potassium titanyl oxalate dihydrate 質(zhì)量規(guī)格：1000μg/ml 包裝;25g

四苯硼鉀/四苯硼化鉀/四苯基硼酸鉀/Potassium tetraphenylborate 質(zhì)量規(guī)格：1000μg/ml，溶劑： 包裝;5g

氯鉑酸鉀/氯化鉑鉀/氯鉑(IV)酸鉀/氯高鉑化鉀/六氯鉑酸鉀/(OC-6-11)六氟合鉑酸(2-)鉀/六氯鉑(IV)酸鉀/六氯鉑鉀/(OC-6-11)六氟合鉑酸鉀/Potassium platinic chloride 質(zhì)量規(guī)格：1000μg/ml,基體:1.0 mol/L HNO3 包裝;100g

氯亞鉑酸鉀/氯亞鉑酸鉀/氯化亞鉑鉀/四氯亞鉑酸鉀/四氯鉑酸鉀/氯亞鉑化鉀/四氯鉑(II)酸鉀/Potassium chloroplatinite 質(zhì)量規(guī)格：100.0μg/g,基體: 0.5mol/L的HCl溶液 包裝;500g

溴酸鉀/Potassium bromate 質(zhì)量規(guī)格：1000μg/ml,基質(zhì)：2.0mol/L鹽酸 包裝;100mg

亞碲酸鉀/碲(IV)酸鉀/亞蒂酸鉀/Potassium lurite 質(zhì)量規(guī)格：500mg/L,溶劑：1%硝酸 包裝;20mg

/四氫硼鉀/鉀硼氫/鉀氫化硼/氫硼化鉀/四氫硼酸(1-)鉀/Potassium borohydride 質(zhì)量規(guī)格：100µg/mL,基體:1%HCl 包裝;100g

丁二酮肟/二甲基乙酰肟/丁二酮二肟/二乙二肟/丁二肟/雙乙酮肟/鎳試劑/二乙酰二肟/二甲基乙二醛肟/二甲基乙二肟/2,3-丁二酮二肟/Dimethylglyoxime 質(zhì)量規(guī)格：1000µg/mL,基體：10%HCl 包裝;25g

二乙酰一肟/2,3-丁二酮一肟/聯(lián)乙酰一肟/雙乙酰一肟/甲基肟乙/丁二酮單肟/2,3-丁二酮肟/2,3-丁烷二酮一肟/肟乙/丁二酮一肟/二甲基乙二酰一肟/Diacetyl monoxime 質(zhì)量規(guī)格：1000μg/ml,基體：0.1mol/LNaOH 包裝;1g

肟/β-異亞硝基丙烷/二甲基酮肟/2-肟/Acetoxime 質(zhì)量規(guī)格：1000μg/ml 包裝;25g

環(huán)戊酮肟/Cyclopentanone oxime 質(zhì)量規(guī)格：1000μg/ml 包裝;5g

楊醛肟/鄰羥基肟/2-羥基肟/柳醛肟/Salicylaldoxime 質(zhì)量規(guī)格：1000µg/mL,基體:10%HCl 包裝;1g

8-羥基喹啉/8-氫氧化喹啉/8-羥基氮(雜)萘/鄰羥基氮(雜)萘/8-羥基氮萘/喔星/8-羥基氮雜萘/喹啉醇/8-Hydroxyquinoline 質(zhì)量規(guī)格：1000μg/ml,溶劑:0.5mol/L HNO3 包裝;1g

2，9-二甲基-1，10-菲羅啉/2,9-二甲基鄰菲啰啉/新銅試劑/2,9-二甲基-1，10-鄰菲羅啉/2,9-二甲基-1，10-鄰菲洛啉/Neocuproine 質(zhì)量規(guī)格：1000μg/ml in 10% HCl 包裝;25g
鴨源雞桿菌PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)Pichia│onychis 中文名稱：指甲畢赤酵母種屬:Pichia│onychis分離基物:生物樣/石鰈魚(yú) 胃提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:共生微生物/魚(yú)類共生菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:513生長(zhǎng)條件:28℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法 純度：99%

Candida│zeylanoides 中文名稱：涎沫假絲酵母種屬:Candida│zeylanoides分離基物:生物樣/狼魚(yú) 腸提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:共生微生物/魚(yú)類共生菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:513生長(zhǎng)條件:28℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法 純度：99%

Candida│inconspicua 中文名稱：平常假絲酵母種屬:Candida│inconspicua分離基物:生物樣/海藻提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:共生微生物/藻類共生菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:513生長(zhǎng)條件:28℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法 純度：99%

Filobasidium│uniguttulatum 中文名稱：線黑粉菌種屬:Filobasidium│uniguttulatum分離基物:生物樣/蜈蚣藻提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:共生微生物/藻類共生菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:513生長(zhǎng)條件:28℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法 純度：95%

Hanseniaspora│uvarum 中文名稱：葡萄有孢漢遜酵母種屬:Hanseniaspora│uvarum分離基物:生物樣/海藻提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:生物轉(zhuǎn)化微生物/蛋白含量高培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:513生長(zhǎng)條件:28℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法 純度：95%

Pichia│sp. 中文名稱：畢赤酵母種屬:Pichia│sp.分離基物:樣/表層海提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:潛在的有機(jī)污染物降解菌/分離自石油富集菌群培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:821生長(zhǎng)條件:28℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法 純度：≥97%, ee 98%

Candida│viswanathii 中文名稱：維斯假絲酵母種屬:Candida│viswanathii分離基物:樣/海提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:降解柴油及原油培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:472生長(zhǎng)條件:28℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法 純度：≥97%, ee 98%

Kocuria│sp. 中文名稱：考克氏菌種屬:Kocuria│sp.分離基物:沉積物/箱式沉積物提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:產(chǎn)酶微生物/產(chǎn)淀粉酶、過(guò)氧化氫酶；未檢測(cè)到果膠酶、酪蛋白酶、纖維素酶、瓊脂酶培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471生長(zhǎng)條件:30℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法 純度：99%
反應(yīng)五要素：
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長(zhǎng)度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布，避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會(huì)形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì)，以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)， 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn)， 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
技術(shù)原理：
DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈，在DNA聚合酶與啟動(dòng)子的參與下，根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。
在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，DNA在高溫時(shí)也可以發(fā)生變性解鏈，當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此，通過(guò)溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性，并設(shè)計(jì)引物做啟動(dòng)子，加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。（ DNA高溫變性低溫復(fù)性）
產(chǎn)品僅用于科研發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對(duì)于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義，該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活，不需要每個(gè)循環(huán)加酶，使PCR技術(shù)變得非常簡(jiǎn)捷、同時(shí)也大大降低了成本，PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用，并逐步應(yīng)用于臨床。